中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

新冠肺炎防治专栏

  • 康复期血浆应用于急性病毒性传染病现状及其治疗新型冠状病毒肺炎前景

    杨晓明;侯继峰;

    随着康复期血浆(convalescent plasma,CP)被成功地用于治疗多种急性病毒性传染病,其独到的治疗技术优势越来越受到肯定和认同。新近在中国武汉发现并鉴定一种命名为2019-nCoV(SARS-CoV-2)的新型冠状病毒,目前暂无特异性治疗其感染的有效手段。本文就CP应用于埃博拉、大流行流感、严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)、中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)的现状作一综述,并对其治疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的前景作一展望。

    2020年03期 v.33 241-245页 [查看摘要][在线阅读][下载 600K]
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疫苗研究

  • 两种不同培养工艺制备森林脑炎灭活疫苗的免疫原性及安全性评价

    李文娟;张颖;孙宏亮;梅可佳;张朔;王庆有;邵燕;姜崴;李玉华;

    目的评价细胞工厂工艺制备森林脑炎灭活疫苗的免疫原性及安全性。方法利用10 L转瓶和细胞工厂两种工艺在地鼠肾细胞上培养森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV),收获病毒液,经病毒灭活、超滤浓缩、柱层析纯化、除菌过滤后,制备森林脑炎灭活疫苗。采用透射电子显微镜及SDS-PAGE对病毒进行形态观察及鉴定。将两种工艺共制备的6批疫苗免疫小白鼠,评价疫苗的免疫原性;通过家兔刺激试验及豚鼠主动过敏性试验评价疫苗的安全性。结果两种工艺共制备的6批疫苗原液,透射电镜下观察均可见约为50 nm的圆形病毒颗粒,SDS-PAGE分析均可见相对分子质量分别为50 000和40 000~45 000的蛋白条带,病毒形态及蛋白条带大小均与TBEV相符;免疫保护指数均大于1. 0×10~5,符合《中国药典》三部(2015版)标准;家兔刺激试验对注射部位无刺激性,豚鼠主动过敏试验无小鼠出现过敏性反应。结论细胞工厂工艺和10 L转瓶工艺制备的森林脑炎灭活疫苗均具有良好的免疫原性及安全性。

    2020年03期 v.33 246-249页 [查看摘要][在线阅读][下载 816K]
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  • 狂犬病疫苗脂质体冻干粉的免疫原性评价

    赵祥月;范宇超;谢青昕;刘艳红;普梦笛;付围;鲁卫东;

    目的评价狂犬病疫苗脂质体冻干粉的免疫原性。方法将狂犬病疫苗原液稀释至15 IU/mL,制备为稀释液冻干粉(Y1组);将该稀释液冻干粉与脂质体冻干粉按5∶3的体积比混合,制成物理混合物(Y2组);同时采用冻融-冻干法将狂犬病疫苗稀释液和脂质体配制成狂犬病疫苗脂质体冻干粉(Y3组)。将各组疫苗复溶后,分别于0、3、7、14、21 d经小鼠腹腔给药,0. 5 mL/只。MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测T淋巴细胞表面标记,ELISA法测定小鼠体液中狂犬病病毒抗体IgG(RV-IgG)浓度。结果与Y1组及Y2组比较,Y3组初次免疫后3 d小鼠脾细胞刺激指数(stimulatingindex,SI)值明显升高(P <0. 01);初次免疫后7、14、21、28 d,CD4~+/CD8~+值明显升高(P <0. 05),初次免疫后7、14、21 d,RV-IgG浓度明显升高(P <0. 05)。结论狂犬病疫苗脂质体冻干粉在小鼠体内具有良好的免疫原性,脂质体能提高疫苗免疫原性,延长疫苗的免疫时间,有望开发成为新一代广泛应用的疫苗佐剂。

    2020年03期 v.33 250-253+265页 [查看摘要][在线阅读][下载 926K]
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基础研究

  • 阳离子PLGA纳米颗粒作为核酸疫苗递送载体的能力及其特性评价

    杨蕴琦;卢渊录;罗新;茹嘉喜;赵翔;孙世琪;冉旭华;闻晓波;郭慧琛;

    目的对阳离子聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(D,L-lactide-co-glycolide),PLGA]纳米颗粒作为核酸疫苗载体的能力及其特性进行评价。方法采用双重乳化法制备阳离子PLGA纳米颗粒,检测其粒径分布和表面电势,获得合成的最适方案。通过考察其形貌、吸附效率、抵抗核酸酶降解能力、细胞毒性、细胞摄取及转染真核表达质粒的能力,分析其作为核酸疫苗载体的适用性及可行性。结果由两种试剂修饰PLGA制备的纳米颗粒粒径分布、表面电势及分散性最佳;透射电镜及扫描电镜下观察粒径均一且呈规则球形;对质粒DNA的吸附效率可达65%;能够有效保护吸附于纳米颗粒的质粒DNA免受核酸酶降解;两种细胞系中的细胞毒性试验均显示细胞存活率高于80%;共聚焦显微镜下可观察到其能被细胞内化;间接免疫荧光试验结果表明,其能有效转染真核表达质粒并使其正确表达。结论成功制备了具有递送核酸疫苗能力的阳离子PLGA纳米颗粒,为核酸疫苗载体的发展奠定了理论基础。

    2020年03期 v.33 254-259页 [查看摘要][在线阅读][下载 1319K]
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  • 森林脑炎病毒不同感染途径对小鼠模型的感染性分析

    刘双军;李景良;王颖;苗会;拱小棠;刘晶晶;孙宏亮;姜崴;李玉华;

    目的分析森林脑炎病毒不同感染途径对小鼠模型的致病性、病毒分布及增殖动态。方法将适应原代地鼠肾(primary hamster kidney,PHK)细胞的森林脑炎病毒进行10倍系列稀释,取4个连续稀释度的病毒液,分别通过脑腔注射、灌胃、滴鼻、肌肉注射、腹腔注射的感染方式,对昆明小鼠进行攻毒,逐日连续观察14 d,计算半数致死量(median lethal dose,LD_(50));并分别取攻毒后第3、5、7天发病典型的腹腔感染组小鼠脑、肺、肾脏、肝脏、心脏、小肠、血液7种组织器官,采用蚀斑法检测病毒滴度。结果脑腔、灌胃、滴鼻、肌肉注射和腹腔注射攻毒方式的LD_(50)分别为10、10~(5.1)、10~5、10~(1.2)和10~2PFU/mL。所有攻毒途径小鼠的脑腔中病毒滴度最高,达10~9PFU/mL,肺组织为10~(6.5)PFU/mL,肾脏为10~5PFU/mL,心脏和肝脏中病毒滴度较低,分别为10~2和10~(1.5)PFU/mL,肠道中出现一过性病毒感染,而血液中病毒滴度最高为10~(5.5)PFU/mL。结论森林脑炎病毒可通过多种途径感染小鼠模型,除具有较强易感性的脑组织外,对肺组织细胞同样具有较强的感染性。

    2020年03期 v.33 260-265页 [查看摘要][在线阅读][下载 1034K]
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  • 赤子爱胜蚓蛋白磷酸酶2A类似激活剂样蛋白cDNA和氨基酸序列分析

    马培元;于保锋;王萱;张丽娜;田九博;穆秀丽;孟涛涛;弓韬;

    目的分析赤子爱胜蚓蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)类似激活剂样蛋白的cDNA和氨基酸序列。方法从赤子爱胜蚓cDNA文库中随机测序得到目标cDNA序列,应用DNAMAN、NCBI ORF finder、BLAST、Conserved Domains、GOR、SWISS-MODEL、PDB等基因和蛋白质分析软件进行该目标基因测序及氨基酸序列分析。结果赤子爱胜蚓PP2A类似激活剂样蛋白cDNA序列长547 bp,编码87个氨基酸残基;与该蛋白基因序列相似度较高的多是不同物种中PP2A类似激活剂蛋白基因序列,其中与Crassostrea virginica serine/threonine-protein phosphatase 2A activator-like mRNA核苷酸相似度为67%;与该蛋白氨基酸序列相似度较高的多是不同物种中的PP2A类似激活剂蛋白氨基酸序列,其中与serine/threonine-protein phosphatase 2A activator(Crassostrea gigas)氨基酸相似度为70%;目标序列中存在一段PTPA超家族保守结构域,蛋白质二级结构以α螺旋以及无规则卷曲为主,三级预测结果与二级结构一致。结论本实验分析的赤子爱胜蚓PP2A类似激活剂样蛋白与牡蛎PP2A类似激活剂蛋白及存在于所有真核生物中且高度保守的PTPA同源度较高,可能具有特异性激活肿瘤抑制因子PP2A的间接抑制肿瘤作用。

    2020年03期 v.33 266-270页 [查看摘要][在线阅读][下载 1546K]
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治疗制剂

  • 重组人粒细胞刺激因子注射液比活性的对比分析

    刘兰;韩春梅;范文红;史新昌;饶春明;

    目的评估国产重组人粒细胞刺激因子(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF)注射液比活性的总体水平。方法收集2009及2017年国家抽验性评价部分批次rhG-CSF样品的比活性数据,并与近5年进口注册检验部分批次rhG-CSF样品进行比较分析。结果 2009部分批次rhG-CSF样品比活性均值为0. 74×10~8IU/mg,标准差为0. 10×10~8IU/mg;2017部分批次rhG-CSF样品比活性均值为0. 83×10~8IU/mg,标准差为0. 15×10~8IU/mg;进口注册批次比活性数据的均值为0. 93×10~8IU/mg,标准差为0. 17×10~8IU/mg。结论国产rhG-CSF注射液质量不断提升,与进口制品间的差距在逐渐缩小,部分企业制品的质量已达到进口药品水平。

    2020年03期 v.33 271-274页 [查看摘要][在线阅读][下载 1013K]
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  • 万古霉素水凝胶对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抑菌效果评价

    于立权;宋成祺;胡波;解婉婕;王梦瑶;孙先宇;余崴;王歆桐;崔玉东;

    目的评价担载万古霉素的水凝胶缓释药剂对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的体外抑菌效果。方法制备担载万古霉素的水凝胶,确定其对MRSA的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),探讨其对MRSA的抑菌杀伤效应及生物菌膜生物量和细胞活性的影响。结果与未成胶的万古霉素相比,万古霉素水凝胶对MRSA的MIC(1μg/mL)和MBC(2μg/mL)分别各降低了1倍。对于MRSA的抑菌杀伤效应,万古霉素水凝胶呈缓慢释放并持续抑菌。万古霉素水凝胶对MRSA成熟生物菌膜生物量无显著影响,能增强对生物菌膜细胞活性的杀伤并减少万古霉素使用量,具有很好的抑菌杀菌效果。结论担载万古霉素水凝胶在减少用药剂量下与万古霉素抑菌效果相当,本研究为后续研发生物利用度好的新型缓释万古霉素药剂提供了参考。

    2020年03期 v.33 275-279+292页 [查看摘要][在线阅读][下载 1312K]
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  • 屋尘螨变应原制剂外观异常对其质量的影响

    张影;鲁旭;梁昊宇;董思国;胡玥;王斌;曾明;

    目的分析屋尘螨变应原制剂外观异常对其质量的影响。方法依据进口药品注册标准(JS20130104)对1批(T6469)屋尘螨变应原制剂进行全面质量检定,同时与检定合格样品(A3016、A3064及A3110批)进行相应比对,Western blot鉴定主要变应原组分,纳米粒径颗粒分析仪检测制剂中铝佐剂-蛋白吸附物的中值粒径(D50)。选取检定合格样品进行冷冻模拟验证,观察低温冷冻对制剂外观性状的影响。结果 T6469批制剂外观不均一(外观性状异常与正常样品),混悬液浊度有差异,部分样品出现摇不散的贴壁颗粒,外观性状异常样品与正常样品比较,浑浊度降低,沉降速度增快,铝佐剂吸附物液面高度明显低于外观正常样品。经检定,T6469、A3016、A3064及A3110批制剂pH、铝含量、苯酚含量及游离上清活性均在质量标准范围内,在相对分子质量25 000及14 000处均出现特异性条带,但T6469批外观性状异常样品条带变弱。T6469外观性状异常与正常样品之间D50差异有统计学意义(P <0. 05);检定合格样品冻存前后D50差异有统计学意义(P <0. 05)。T6469批外观性状异常样品与正常样品和检定合格样品比较,总生物学活性明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。检定合格样品放置低温环境至冻结后重现了上述外观异常性状,生物活性与未处理样品相比显著降低(P <0. 05)。结论该批屋尘螨变应原制剂的外观异常可能是由于样品贮存及运输中出现低温冻结,引起铝佐剂-蛋白凝胶颗粒出现聚集,形成较大颗粒,最终导致其生物活性显著降低。

    2020年03期 v.33 280-285页 [查看摘要][在线阅读][下载 1479K]
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诊断制剂

  • 结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白的原核表达及其表达条件的优化

    杨晰朦;陈香梅;

    目的原核表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuber-culosis,MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白(recombinant ESAT6-CFP10,rEC),并优化表达条件。方法以(GGGGS)3为linker将ESAT6和CFP10两个基因连接,合成rEC全基因,插入至载体pET-28a,构建重组质粒pET-28a-rEC,转化至感受态E. coli BL21(DE3),筛选优势菌株进行诱导表达,并对诱导温度(25、30、37℃)、诱导剂种类及浓度(0. 05、0. 1、0. 2、0. 5、1. 0 mmol/L IPTG及0. 5、1、5、10、15、20 g/L乳糖)、诱导时间(2、3、4、5、6 h)、诱导起始A600(0. 4、0. 6、0. 8、1. 0)进行优化。菌种经5 L发酵罐发酵培养后,采用亲和层析及离子交换层析纯化rEC融合蛋白,于-20℃分别储存0、2、4、6个月,12. 5%SDS-PAGE分析rEC融合蛋白,并对保存0、6月的样品进行HPLC-SEC分析。结果重组质粒pET-28a-rEC经双酶切及测序鉴定,构建正确。rEC融合蛋白最适诱导条件为:于30℃,以0. 1 mmol/L IPTG诱导4 h。纯化后rEC融合蛋白纯度达95%以上,且可与鼠抗ESAT6单克隆抗体发生特异性结合,于-20℃保存6个月未见蛋白降解及聚体产生。结论原核表达了rEC融合蛋白,并优化了其表达条件,获得的rEC融合蛋白具有较高纯度及稳定性。

    2020年03期 v.33 286-292页 [查看摘要][在线阅读][下载 1676K]
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临床研究

  • 2017~2018年福建省0~5岁儿童出生队列肠道病毒71型疫苗接种率分析

    潘伟毅;赵志远;陈俊磊;

    目的分析2017~2018年福建省0~5岁儿童肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)疫苗的接种率。方法通过福建省免疫规划信息管理系统查询2017~2018年福建省0~5岁儿童EV71疫苗接种数据,应用Excel 2007软件对数据进行整理和统计分析。结果 2017~2018年福建省0~5岁儿童接种EV71疫苗950 598剂次。2017和2018年人均接种剂次分别为1 000. 71和1 812. 46剂次/万人,1岁组和2岁组为最高,3岁组次之,再次为6~12月龄组和4岁组,5岁组最低。2017和2018年全省全程接种率分别为4. 18%和8. 47%,各地市全程接种率为0. 70%~10. 46%和4. 62%~10. 96%;全省未全程接种与全程接种人数比值分别为1. 39和1. 14,各地区比值分别为1. 27~1. 85和1. 01~1. 21。结论目前福建省EV71疫苗接种率较低,需进一步提高,特别是6~12月龄儿童的接种率。应加强家长对手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)认知及EV71疫苗安全性、保护力等方面的宣传教育,做好预防接种人员培训,严格执行接种程序,确保疫苗保护效果。

    2020年03期 v.33 293-296页 [查看摘要][在线阅读][下载 1109K]
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  • 冻干A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗在3~8月龄健康婴幼儿人群中的免疫原性和安全性评价

    施礼威;梁馨元;李红华;方文建;李亚南;莫兆军;

    目的评价冻干A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗在3~8月龄健康婴幼儿人群中的免疫原性和安全性。方法采用随机、盲法、对照设计,在广西全州县选择3~8月龄健康婴幼儿300人,按照1∶1分别随机进入试验组和对照组,对照组接种已上市A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗,试验组接种冻干A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。分别于免疫前和全程免疫后30 d采集静脉血,检测血清中抗A、C群流脑抗体滴度,并计算阳转率(4倍增长)。观察并记录每针次疫苗接种后30 min、6~8 h、24 h、48 h、72 h~7 d的不良反应,并随访30 d。结果 261名受试者完成免疫原性观察,对照组(132人)和试验组(129人)A群、C群抗体阳转率分别为93. 94%、96. 90%和97. 73%、98. 45%,试验组与对照组率差为2. 96%(-2. 09%,∞)和0. 72%(-2. 60%,∞);A群和C群免疫后抗体GMT分别为134. 90、163. 89和152. 22、154. 48,组间比较差异均无统计学意义(P均> 0. 05)。300名受试者均进入安全性分析集,对照组(150人)和试验组(150人)全身反应发生率分别为50. 00%和56. 67%,局部反应发生率分别为6. 00%和3. 33%,组间比较差异均无统计学意义(P均> 0. 05)。结论冻干A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗在3~8月龄健康婴幼儿人群中具有良好的免疫原性和安全性。

    2020年03期 v.33 297-301+307页 [查看摘要][在线阅读][下载 1258K]
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技术方法

  • α-肿瘤坏死因子吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立及验证

    欧赛英;徐海伟;陈秀发;沙利烽;梁辰;冯杰;薛辉;颜光涛;

    目的建立检测ɑ-肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorɑ,TNF-ɑ)的吖啶酯化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)方法并进行验证。方法采用全自动化学发光分析仪,用吖啶酯标记TNF-ɑ多克隆抗体,生物素标记TNF-ɑ单克隆抗体,链霉亲和素包被磁颗粒,利用磁颗粒-链霉亲和素-生物素系统实现固相和液相的分离,建立检测TNF-ɑ的吖啶酯CLIA方法;验证方法的检测限、线性范围、准确性、精密度及特异性,用优化后的方法检测150份健康血清样本确定正常参考值范围。应用该方法与西门子immulite1000试剂盒平行测定75份TNF-ɑ血清样本。结果吖啶酯CLIA方法反应条件为加入50μL样本,用PBS-1%BSA稀释校准品,加入1∶2 000稀释生物素及吖啶酯标记抗体。该方法最低检测限为0. 245~0. 519 pg/mL,样本在5~1 000 pg/mL范围r均大于0. 990 0;TNF-ɑ质控品回收率为92. 6%~104. 9%,3种浓度质控品批内CV <5%,总CV <10%;对溶血、脂血、类风湿因子及常见肿瘤药等干扰率均小于10%;系统检测值可溯源至国际标准品。150份健康血清样本正常参考值范围确定为<10 pg/mL。该方法与西门子TNF-ɑ蛋白检测试剂盒相关系数r=0. 989 0;检测值之间差异呈现随机化,无系统误差。结论成功建立了优化检测TNF-ɑ的吖啶酯CLIA方法,该方法精密度高、线性范围广、特异性强、检测结果准确性好,适合临床推广使用。

    2020年03期 v.33 302-307页 [查看摘要][在线阅读][下载 1300K]
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  • 重组人肠道病毒71型病毒样颗粒疫苗外源DNA残留量检测方法的建立

    杨萍;张艳;李微;刘大维;闫慧;褚彦飞;白鹭;谷铁军;孙博;

    目的建立重组人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗原液中昆虫细胞宿主DNA残留的地高辛探针杂交检测方法。方法抽提昆虫细胞sf9基因组DNA,经分子筛纯化后作为阳性对照品;分别以1 000~5 000 bp和100~1 000 bp的基因组DNA超声随机小片段为模板,制备地高辛探针,与阳性对照进行杂交试验。同时验证方法的检测范围、灵敏度和特异性,并采用该方法对3批重组EV71 VLPs疫苗原液中宿主DNA残留量进行测定。结果纯化后DNA样品浓度为47. 5 ng/μL,A_(260)/A_(280)值为1. 86,可作为阳性对照。以100~1 000 bp DNA超声随机小片段作为模板,探针标记效率更高,杂交显色更清晰。该法检测范围为10 pg~10 ng,灵敏度达1 pg,特异性强。3批重组EV71 VLPs疫苗原液中每人份剂量的宿主细胞DNA残留均<50 pg。结论本实验建立的方法特异性强,灵敏度高,可用于重组EV71 VLPs疫苗制备过程中的原液检定及质量控制。

    2020年03期 v.33 308-311+315页 [查看摘要][在线阅读][下载 1399K]
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  • 脊髓灰质炎病毒颗粒分离纯化方法学评价

    曾智坤;喻刚;王继麟;陈晓琦;

    目的比较3种不同密度梯度离心方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。方法选择蔗糖密度梯度离心、氯化铯密度梯度离心、Optiprep(碘克沙醇溶液)密度梯度离心方法,对脊髓灰质炎病毒进行纯化,抽取离心之后的蛋白条带,通过计算蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察,评价其对病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。结果病毒液经蔗糖、氯化铯和Optiprep 3种介质超速离心,均能分离空心颗粒和实心颗粒。氯化铯密度梯度离心法蛋白回收率优于Optiprep及蔗糖密度梯度离心法;Optiprep密度梯度离心法蛋白纯度优于氯化铯及蔗糖密度梯度离心法。结论通过蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察初步评价了3种方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒和实心颗粒的分离效果,为脊髓灰质炎病毒分离纯化提供了参考。

    2020年03期 v.33 312-315页 [查看摘要][在线阅读][下载 1410K]
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  • 19F型肺炎链球菌菌种的复壮及其荚膜多糖纯化工艺的优化

    陈元芬;陈道远;吴强;范杨艳;陶杨;张堃;王学;马礼耕;文彬;刘思麟;

    目的开发复壮肺炎链球菌19F型(Sreptococcus pneumoniae serotype 19F,简称PN19F)菌种的方法,并优化其荚膜多糖的纯化工艺。方法配制PN19F菌种用液体扩增培养基和固体选择培养基,筛选出荚膜较厚的单菌落,比较复壮前后PN19F菌种的发酵培养情况、纯化后多糖收获量及多糖质量;将发酵液裂解后分别酸沉淀8、24和48 h,并经100 KD超滤纯化,再分别用乙醇法和冻干法制备精制多糖,比较其多糖收获量、组分检定结果、抗原活性、核磁共振图谱。结果两种培养基复壮前后的PN19F菌种,发酵收获菌液A_(600)值及培养时间变化不大。纯化后多糖收获量分别为0. 2和0. 6 g/L,即复壮后多糖收率提高了195%。酸沉淀8、24 h后纯化的多糖质量合格,且24 h较8 h多糖收率高约38%,酸沉淀时间达48 h时,产率无明显变化,但多糖质量不合格。乙醇法和冻干法制备的精制多糖各项指标均合格,且无明显差异。结论应用制备的两种培养基复壮的PN19F菌种,可明显提高荚膜多糖产量。PN19F菌种的酸沉淀时间不超过24 h,乙醇法和冻干法均可用于精制多糖制备。

    2020年03期 v.33 316-320+333页 [查看摘要][在线阅读][下载 1474K]
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  • 带有约束条件的四参数Logistic曲线分析在干扰素生物学活性检定中的应用

    陈万革;姜丽君;李建平;徐福平;

    目的改进目前干扰素(interferon,IFN)生物学活性检定中的数据处理方法。方法在四参数Logistic曲线回归中加入约束条件,使之成斜度比例或平行曲线。结果用改进的方法对已有的实验数据进行分析,生物学活性计算结果与当前检定方法近似。此方法可对实验的可靠性进行初步估计,并可估计检测结果的置信区间。结论带约束条件的四参数Logistic曲线分析法可用于IFN生物学活性检定,模型在统计学方面较目前的数据处理方法更完整、可靠。

    2020年03期 v.33 321-327页 [查看摘要][在线阅读][下载 1622K]
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综述

  • 登革病毒反向遗传学技术的研究进展

    房恩岳;王玲;李玉华;

    登革病毒(dengue virus,DENV)是流行于世界范围内的重要虫媒病毒之一,近年来其传播范围的不断扩大给疾病防控带来了极大困难。反向遗传学技术作为一种重要手段,广泛应用于RNA病毒的相关研究,自1991年第1次成功构建DENV感染性克隆以来,明显加速了DENV相关领域的研究。本文总结了DENV反向遗传学技术的构建策略及技术突破,为DENV致病机制研究及疫苗研发提供新思路。

    2020年03期 v.33 328-333页 [查看摘要][在线阅读][下载 1382K]
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  • 新型H7N9禽流感疫苗的研究进展

    张家友;仇书兴;黄晓媛;杨晓明;

    2013年03月,中国部分城市出现了人感染H7N9禽流感病毒病例,随后H7N9禽流感感染疫情迅速暴发,进而引起全球高度关注,接种疫苗是预防H7N9禽流感病毒大流行最有效的措施。本文对H7N9禽流感疫苗临床前研究进展、临床研究概况及免疫原性评价方法等方面作一综述,旨在为H7N9禽流感疫苗的研发提供参考及借鉴。

    2020年03期 v.33 334-338页 [查看摘要][在线阅读][下载 1366K]
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  • miRNA对尤因肉瘤作用机制的研究进展

    杨亮;任恩惠;杨风光;康学文;

    微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性非编码的小分子RNA,其通过与靶mRNA的结合,降解或抑制其翻译,在转录后水平参与基因的调控,从而控制细胞的增殖、分化、凋亡等,参与疾病的发生及发展。尤因肉瘤(Ewing sarcoma,EWS)是原发性骨肿瘤中发病率仅次于骨肉瘤的骨恶性肿瘤,青少年多发,恶性程度高,复发及远处转移是导致患者死亡的主要原因。miRNA可通过基因水平的调控,参与EWS的发生发展、侵袭、转移等重要生物学过程,与患者的预后密切相关。本文就miRNA参与EWS相关的分子机制作一综述,以期为后期研究及临床治疗EWS提供依据。

    2020年03期 v.33 339-342页 [查看摘要][在线阅读][下载 1331K]
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  • 脊髓灰质炎病毒及其疫苗研究现状

    吴雅楠;廖国阳;

    脊髓灰质炎疫苗接种策略引发了全球根除脊髓灰质炎进程的转折。从口服脊髓灰质炎疫苗(OPV)转向灭活脊髓灰质炎疫苗(IPV),前者可能导致疫苗衍生的脊髓灰质炎病毒循环和恢复毒力。目前使用的所有疫苗均来源于脊髓灰质炎病毒培养,Salk IPV还涉及野生型病毒。通过重组技术产生空的病毒衣壳,可以实现不使用病毒生产疫苗的目标,但迄今为止这样的病毒样颗粒(VLP)非常不稳定。本文对脊髓灰质炎病毒的生物学特性、脊髓灰质炎疫苗的发展现状及研究进展进行概述。

    2020年03期 v.33 343-345+351页 [查看摘要][在线阅读][下载 1384K]
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专题报道

  • 人乳头瘤病毒疫苗效力评价用核酸检测试剂的讨论及思考

    田亚宾;张春涛;

    <正>宫颈癌是影响女性健康的第二常见的癌症,每年约有50多万女性罹患宫颈癌,死亡约20多万例,严重影响女性健康。宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的持续性感染密切相关。目前,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)国际癌症研究中心将12种HPV型别(HPV16、18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59)定为高危型HPV(High-risk HPV,HR-HPV),HPV66、68、73型别列为潜在高危风险型别[1],其中,约70%宫颈癌患

    2020年03期 v.33 346-351页 [查看摘要][在线阅读][下载 1423K]
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  • 地中海贫血儿童的预防接种建议及探讨

    肖雷;王凤双;

    <正>地中海贫血又称"珠蛋白生成障碍贫血",是由于一种或多种珠蛋白肽链合成受阻或完全抑制,导致Hb成分组成异常引起的慢性溶血性贫血,其中以α、β-地中海贫血较常见,α-地中海贫血有静止型、标准型、中间型及Hb Bart胎儿水肿综合征4种临床分型;β-地中海贫血有轻型、中间型及重型3种临床类型[1]。该贫血为全球分布最广、累积人数最多的常染色体隐性单基因遗传病,在中国广东、广西、海南发病率较高。其中,海南省α-地中海贫血发病率为

    2020年03期 v.33 352-354+360页 [查看摘要][在线阅读][下载 1361K]
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  • TCR T细胞疗法的研究挑战和审评考虑

    徐隆昌;韦薇;

    <正>随着生物技术的发展,细胞基因疗法已成为生物制药领域的新热点。2017和2018年,Kymriah(Novartis公司)和Yescarta(Kite Pharma)两款嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞治疗产品在美国和欧盟相继上市,推动了CAR T细胞疗法的研发热潮。与此同时,国内外多家企业已在研发与CAR T细胞疗法同属于细胞基因疗法的T细胞受体(T cell receptor,TCR)T细胞疗法。TCR T细胞疗法是过继细胞疗法应用于肿瘤等疾病的一种新

    2020年03期 v.33 355-360页 [查看摘要][在线阅读][下载 1428K]
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