中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

疫苗研究

  • 戊型肝炎疫苗评价用小鼠品系的比较

    苏瑶;林惠娟;孙光;李媛媛;姜崴;吴星;梁争论;

    目的比较不同品系及相同品系不同来源BALB/c小鼠对戊型肝炎疫苗(HE疫苗)的免疫应答,探讨适用于HE疫苗评价的小鼠品系,规范疫苗效力评价用动物。方法分别用2家企业制备的HE疫苗免疫BALB/c、C57BL/6、KM和NIH 4种品系小鼠及3种不同公司来源的BALB/c小鼠,均免疫1针,28 d后采血,分离血清,检测抗体应答,计算效力ED_(50)。结果 2家疫苗免疫C57BL/6、KM和NIH小鼠时,各剂量组均表现出敏感应答,提示C57BL/6、KM和NIH小鼠对本研究中的2家疫苗不能灵敏地反映出剂量变化趋势,不适用于HE疫苗效力评价;BALB/c小鼠对2家企业各剂量组HE疫苗均呈现良好的免疫应答,且呈明显的剂量效应关系。3种不同来源的BALB/c小鼠免疫HE疫苗后,抗体应答存在差异。结论 BALB/c小鼠可作为评价HE疫苗免疫原性和效力ED_(50)的模型动物;应用BALB/c小鼠进行疫苗评价时需固定小鼠来源。

    2017年08期 v.30 785-787+799页 [查看摘要][在线阅读][下载 161K]
    [下载次数:48 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:68 ]

基础研究

  • 辐射后A549细胞上清外泌体TMEM88蛋白表达与细胞周期的相关性

    王溪;贾硕;张心馨;佟志敏;胡媛媛;金鹏;张红梅;

    目的探讨辐射对肺腺癌A549细胞细胞周期的影响,观察其细胞上清外泌体TMEM88蛋白(transmembrane protein 88)的表达情况。方法取对数生长期肺腺癌A549细胞,按0、0.5、1、1.5、2 Gy剂量(剂量率1.75 Gy/min,300 Mu/min)照射细胞,培养6和12 h后,流式细胞术检测不同辐射剂量对细胞周期的影响;收集细胞上清,超速离心提取外泌体蛋白,Western blot法分析外泌体TMEM88蛋白的表达情况。结果 G2期细胞6 h检测结果显示,与0 Gy组相比,各剂量组细胞比例显著增加(P<0.001),且随照射剂量增加,细胞比例增加越明显,除0.5 Gy组与1 Gy组外,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.001);12 h检测结果显示,G2期细胞比例随照射剂量增加而显著增加,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。S期细胞6 h检测结果显示,与0 Gy组相比,0.5、1.0、1.5 Gy组S期细胞比例显著增加(P<0.05);12 h检测结果显示,与0、0.5 Gy组相比,1.0、1.5 Gy组S期细胞比例显著增加(P<0.05)。随照射剂量的增加,外泌体TMEM88蛋白的表达逐渐降低,6 h检测结果显示,0 Gy组与1.5、2.0 Gy组以及0.5 Gy组与2.0 Gy组相比,差异均有统计学意义(P<0.05));12 h检测结果显示,0.5、1.0、1.5、2.0 Gy组与0 Gy组相比,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论辐射能够诱导肺腺癌A549细胞细胞周期阻滞,并能抑制细胞上清外泌体TMEM88蛋白的表达。

    2017年08期 v.30 794-799页 [查看摘要][在线阅读][下载 363K]
    [下载次数:145 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:61 ]
  • 小鼠丝氨酸/精氨酸蛋白特异激酶2基因真核重组表达质粒的构建及其对微管蛋白聚合的影响

    温丽敏;白欣艳;王玉晶;赵文静;张蘋;王海龙;郭睿;

    目的构建小鼠丝氨酸/精氨酸蛋白特异激酶2(serine/arginine-rich protein specific kinase 2,SRPK2)基因(srpk2)的真核重组表达质粒,并分析其对微管蛋白α-Tubulin聚合的影响。方法利用RT-PCR法扩增srpk2的全长cDNA序列,通过分子克隆技术构建真核重组表达质粒pLV-EGFP(2A)Puro-srpk2;在脂质体Lipofectamine 2000的介导下,将真核重组表达质粒及空载体pLV-EGFP2(A)Puro分别转染人胚肾HEK293T细胞,同时设空白对照组(未转染)。采用RT-PCR及Western blot法分别检测HEK293T细胞中srpk2基因mRNA转录及SRPK2蛋白的表达情况;Western blot法分析HEK293T细胞中聚合态和游离态α-Tubulin的含量。结果双酶切及DNA序列鉴定证明真核重组表达质粒pLV-EGFP2(A)Puro-srpk2构建正确,且在HEK293T细胞中实现了srpk2基因过表达。真核重组表达质粒转染组HEK293T细胞中游离态α-Tubulin含量显著低于空载体转染组及空白对照组(P<0.05),而聚合态α-Tubulin水平明显高于空载体转染组及空白对照组(P<0.05)。结论成功构建了srpk2基因的真核重组表达质粒,SRPK2可促进α-Tubulin微管蛋白聚合。

    2017年08期 v.30 800-805页 [查看摘要][在线阅读][下载 479K]
    [下载次数:91 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:68 ]
  • 小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其生物信息学分析

    苗书魁;任方;汪萍;米晓云;陆桂丽;魏玉荣;魏婕;马文戈;王延;黄炯;

    目的原核表达小反刍兽疫病毒(peste-des-petits ruminants virus,PPRV)N基因,评价其抗原性,并进行生物信息学分析。方法参照GenBank中登录的PPRV(Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),IPTG诱导N基因原核表达,表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析。运用Expasy Protparam和SOPMA软件对PPRV N基因编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果成功表达了PPRV N基因,其融合蛋白相对分子质量约64 400,主要以包涵体形式存在,并可被PPRV羊免疫血清特异性识别。PPRV N蛋白含524个氨基酸,相对分子质量约57 900,亲水性氨基酸占57.63%,疏水性氨基酸占42.17%,碱性氨基酸占12.21%,酸性氨基酸占14.12%,等电点理论值为5.11;亲水性平均系数为-0.296,不稳定系数为48.20;二级结构存在242个α螺旋(占46.18%),42个β转角(占8.02%),164个无规则卷曲(占31.3%),76个延伸链(占14.50%)。结论原核表达的PPRV N蛋白具有良好的特异性和抗原性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了参考。

    2017年08期 v.30 806-810页 [查看摘要][在线阅读][下载 413K]
    [下载次数:126 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:60 ]
  • PERK/ATF4/CHOP信号通路在饱和脂肪酸诱导肝细胞脂毒性凋亡中的作用

    曹洁;姚隆;

    目的研究在饱和脂肪酸软脂酸钠诱导肝细胞脂毒性凋亡过程中,蛋白激酶R样内质网激酶(PKR-like ER kinase,PERK)/活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)/C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)信号通路的作用,对参与饱和脂肪酸诱导肝细胞脂毒性凋亡的主要UPR信号通路进行探讨。方法MTT法筛选不同浓度(0、36、72、108、144、180μmol/L)软脂酸钠作用L02和HepG2细胞株的最佳浓度后,将细胞分为正常对照组和模型组(软脂酸钠108μmol/L),甘油三酯试剂盒检测细胞内甘油三酯含量,流式细胞术Annexin V-PE/7-AAD双染检测细胞凋亡率,Western blot法检测Bip、t-PERK、磷酸化PERK(p-PERK)、ATF4、CHOP蛋白的表达。将PERK shRNA转染L02和HepG2细胞沉默PERK基因,以Control shRNA作为对照,将细胞分为Control shRNA、Control shRNA+软脂酸钠、PERK shRNA、PERK shRNA+软脂酸钠组,Western blot法检测t-PERK、ATF4、CHOP蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果软脂酸钠成功诱导建立肝细胞脂变模型。在体外实验中,软脂酸钠能够诱导肝细胞发生脂肪变性以及脂变肝细胞凋亡,细胞凋亡率随软脂酸钠诱导时间延长而增加,与对照组相比,模型组48 h细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。软脂酸钠诱导L02和HepG2细胞0、12、24、48 h,各时间点Bip、p-PERK、ATF4和CHOP蛋白的表达呈时间依赖性增加(P<0.05)。在使用和不使用软脂酸钠诱导下,PERK shRNA组细胞t-PERK蛋白表达水平显著低于Control shRNA组(P<0.05);软脂酸钠诱导下,与Control shRNA组相比,PERK shRNA组细胞ATF4和CHOP蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率也明显降低(P均<0.05)。结论饱和脂肪酸能够诱导脂变肝细胞凋亡,并且启动过度内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress),激活PERK/ATF4/CHOP信号通路。阻断PERK通路能够在一定程度上抑制脂变肝细胞凋亡,提示ER stress UPR信号途径PERK/ATF4/CHOP参与了饱和脂肪酸诱导的肝细胞脂毒性凋亡。

    2017年08期 v.30 811-818页 [查看摘要][在线阅读][下载 545K]
    [下载次数:254 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:79 ]
  • 酵母源金属硫蛋白对急性汞中毒小鼠的排汞作用及对机体氧化损伤的修复

    王颖;王欣卉;徐炳政;张东杰;佐兆杭;刘淑婷;宫雪;

    目的探讨酵母源金属硫蛋白(metallothionein,MT)对急性汞中毒小鼠的排汞及对机体氧化损伤的修复作用。方法经颈部皮下注射氯化汞生理盐水溶液建立急性汞中毒小鼠模型。酵母源MT-1及MT-2的低、中、高剂量组(0.16、0.40、0.80 mg/kg bw)均于每日同一时间灌胃给药,连续给药14 d,同时设模型组(等体积生理盐水)、阳性对照组(DMPS,0.80 mg/kg bw)及正常组小鼠(等体积生理盐水)。末次灌胃给药后小鼠禁食12 h,测量小鼠体重,检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,机体总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量;同时测定血液、肝脏和肾脏中汞离子的含量。结果与正常组小鼠比较,模型组小鼠体重显著下降(P<0.05);血清SOD、GSH-Px活力及T-AOC显著降低(P<0.05),MDA含量及血液、肝脏、肾脏中汞离子含量显著上升(P<0.05)。与模型组小鼠比较,除两种低剂量MT组外,其他剂量MT组小鼠体重均显著上升(P<0.05);各MT组小鼠血清SOD、GSH-Px活力及T-AOC均明显升高(P<0.05),MDA含量及血液、肝脏、肾脏中汞离子含量均明显降低(P<0.05),且高剂量MT效果最佳。结论两种酵母源MT对急性汞中毒小鼠具有良好的排汞作用,并可修复机体的氧化损伤,且作用效果与给药剂量呈正相关。

    2017年08期 v.30 819-823页 [查看摘要][在线阅读][下载 217K]
    [下载次数:60 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:58 ]
  • 低切应力对高血压颈动脉血管重构作用的影响及其信号转导机制

    刘伟;关智媛;王静;郑婷;

    目的观察低切应力对高血压颈动脉血管重构作用的影响,并初步探讨其信号转导机制。方法分离猪右侧颈总动脉,建立血管体外培养模型,实验分为高切应力组(切应力20 dyn/cm~2,对应灌洗液的流量为200 ml/min)、低切应力组(5 dyn/cm~2,对应灌流液的流量为50 ml/min)及对照组(未经培养的新鲜血管)。镜下测量颈动脉内径及壁厚度,并计算壁横截面积;TUNEL法检测切应力对体外培养猪颈总动脉血管平滑肌细胞凋亡影响;Western blot法检测切应力对体外培养猪颈总动脉血管组织中RhoA、P-MYPT-1、P-ERK1/2、P-JNK和P-P38蛋白表达影响。结果与对照组和高应力组比较,低应力组血管壁厚度和壁横截面积明显增加(P<0.05),血管内径明显变小(P<0.05),内径/壁厚比值明显降低(P<0.05);血管平滑肌细胞TUNEL染色阳性细胞明显增多(P<0.05),凋亡率显著增加(P<0.05);血管组织中RhoA、P-MYPT-1、P-ERK1/2、P-JNK和P-P38蛋白的表达水平明显升高(P<0.05)。结论低切应力对体外培养高血压颈动脉血管重构具有显著地诱导作用,其机制可能与其激活RhoA/ROCK信号,从而引起胞质内丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPKs)的3个成员(ERK1/2、JNK、P38)的磷酸化反应有关。

    2017年08期 v.30 824-827+832页 [查看摘要][在线阅读][下载 211K]
    [下载次数:66 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:57 ]

治疗性制剂

  • 一种单克隆抗体的电荷异质体分析

    陈捷敏;郑欣桐;周芳;马红霞;林军;

    目的对抗程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)单克隆抗体的电荷异质体进行结构鉴别及生物学功能分析。方法通过检测抗PD-1单克隆抗体经专一性蛋白酶(唾液酸酶及羧肽酶)酶切前后的变化,初步确认电荷异质体的种类。采用阳离子交换色谱对电荷异质体进行分离和收集,经联用液相色谱-质谱(LC-MS)法分析电荷异质体各组分的组成;通过抑制抗原与配体相互作用影响NFAT荧光素酶报告基因表达的方法确定电荷异质体的生物学功能。结果碱性异质体含量较少,主要变化为重链N-末端谷氨酰胺未环化;酸性异质体主要变化为重链N383脱氨化和糖链末端唾液酸化。各异质体的生物学活性为89%~102%。结论抗PD-1单克隆抗体电荷异质体大部分修饰位点均远离互补决定区(complementary determining region,CDR),且在体外生物学活性方面差异较小。

    2017年08期 v.30 828-832页 [查看摘要][在线阅读][下载 309K]
    [下载次数:123 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:64 ]
  • 重组人血管内皮生长因子抑制剂理化对照品质控方法及质量标准的建立

    毕华;陶磊;韩春梅;秦玺;范文红;杨靖清;丁有学;饶春明;

    目的建立重组人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)抑制剂理化对照品质控方法及质量标准。方法利用HEK293细胞增殖抑制法测定重组人VEGF抑制剂理化对照品生物学活性;紫外分光光度法测定蛋白含量;质谱法进行相对分子质量测定、液质肽图及糖基化位点分析、二硫键分析、N-寡糖糖型及比例分析;SDS-PAGE及SEC-HPLC法分析纯度;等点聚焦法进行电荷异质性分析;Edman降解法进行N-末端氨基酸序列分析。结果重组人VEGF抑制剂理化对照品各项检定指标均符合《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》和《中国药典》三部(2015版)相关要求。结论建立的质控方法和质量标准符合理化对照品的相关规定,具有保证该理化对照品结构正确、质量可控的特点。检定合格的理化对照品可用于该类产品的常规检定。

    2017年08期 v.30 833-837页 [查看摘要][在线阅读][下载 257K]
    [下载次数:94 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:97 ]

诊断制剂

  • 小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达、纯化及其抗体间接ELISA检测方法的建立

    王东方;刘晔;米立娟;张守峰;扈荣良;

    目的原核表达小反刍兽疫病毒(Peste des petits of ruminants virus,PPRV)N蛋白,纯化后建立其抗体间接ELISA检测方法。方法人工合成PPRV N蛋白基因序列,并构建重组质粒pSumo-mut-N,转化至大肠埃希菌Arctic Express中,IPTG诱导表达,并对IPTG浓度和诱导时间进行优化。表达的融合蛋白经Ni柱亲和层析纯化后,以其作为包被抗原建立PPRV抗体间接ELISA检测方法,对临床样本进行检测。结果重组表达质粒pSumo-mut-N经双酶切和测序证明构建正确。N蛋白最佳诱导表达条件为0.5 mmol/L IPTG于11℃诱导10 h。表达的重组蛋白相对分子质量约71 900,纯化后纯度在80%以上,浓度可达120μg/ml,与PPRV阳性抗体具有良好的反应原性。基于N蛋白建立的PPRV抗体间接ELISA方法样品检测结果与已知血清之间的符合率为100%。结论原核表达并纯化了PPRV N蛋白,建立的基于N蛋白的PPRV抗体ELISA检测方法为PPRV抗体间接ELISA检测试剂盒的研制和应用奠定了基础,对于流行病学免疫监测及控制PPRV的流行具有重要意义。

    2017年08期 v.30 838-842+846页 [查看摘要][在线阅读][下载 355K]
    [下载次数:150 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:59 ]

临床研究

  • 乌鲁木齐市2015年手足口病流行特征及病原学分析

    薛娜;樊旭成;韩志国;高枫;陈薇;

    目的分析乌鲁木齐市2015年手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)流行特征及病原种类分布。方法采用描述性流行病学方法分析2015年乌鲁木齐市HFMD流行特征,收集2015年临床诊断为HFMD患者的咽拭子和粪便样本共855份,应用荧光定量RT-PCR方法进行核酸检测,采用统计学方法分析病原检测结果。结果 2015年全市共报告HFMD 2 484例,报告发病率为72.08/10万。实验室诊断样本855份,检出阳性642份(75.09%),其中EV71阳性247份(28.89%),CoxA16阳性161份(18.83%),其他肠道病毒234份(27.37%);粪便样本检出阳性339份(81.69%),咽拭子样本检出阳性303份(68.86%),不同类型病例样本肠道病毒检出阳性率差异有统计学意义(P<0.001)。结论 2015年乌鲁木齐市HFMD报告发病率略有下降,发病集中在5~7月,5岁以下散居儿童为主要发病人群,EV71为优势病原体,其他肠道病毒仅次于EV71。应加强对该病病原的进一步分型检测。

    2017年08期 v.30 843-846页 [查看摘要][在线阅读][下载 161K]
    [下载次数:52 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:52 ]

技术方法

  • 气相色谱法检测重组人血白蛋白中异丙醇残留量

    马秋平;王敏力;侯继锋;王箐舟;

    目的建立重组人血白蛋白产品中异丙醇残留量检测的气相色谱法。方法色谱条件:DB-624毛细管色谱柱(30 m×0.53 mm,3μm);进样口温度150℃;检测器为FID,温度200℃;空气流量400 ml/min;氢气流量40 ml/min;载气为高纯氮气,流量6.0 ml/min;程序升温:起始温度60℃保留5 min,以40℃/min升至120℃,保持3 min;分流进样,分流比为5∶1;进样量为1μl。以正丁醇为内标,对建立的方法进行专属性、精密度、准确度、耐用性验证,确定该方法的线性范围和检测限。用建立的方法检测3批重组人血白蛋白样品中异丙醇残留量。结果异丙醇浓度在10~300μg/ml范围内,与异丙醇与正丁醇峰面积比的线性关系良好(r=0.999 9),最低检出限为0.09μg/ml;该检测条件下与异丙醇性质相似的甲醇和乙醇对异丙醇的测定基本无影响;异丙醇与正丁醇峰面积比3次检测结果的RSD为0.4%,精密度良好;不同浓度异丙醇分别与重组人血白蛋白等体积混合,3次检测结果的回收率在94.2%~105.0%之间,准确度良好;不同检测器温度和不同进样口温度条件下测定的色谱峰面积的平均RSD分别为1.6%和2.2%,对测定结果基本无影响。3批重组人血白蛋白样品均未检测出异丙醇残留,符合《中国药典》三部(2015版)推荐标准。结论建立的气相色谱法快速、准确,可用于检测重组人血白蛋白中异丙醇的残留量。

    2017年08期 v.30 847-849+854页 [查看摘要][在线阅读][下载 170K]
    [下载次数:119 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:56 ]
  • 啤酒花中8-异戊烯基柚皮素提取及含量测定方法的优化及验证

    崔熠可;赖玉清;黄惠明;陈静华;周跃平;闫冀;吴磊;

    目的优化啤酒花中8-异戊烯基柚皮素(8-prenylnaringenin,8-PN)的提取及含量测定方法,并进行验证。方法采用L_8(4~1×2~2)正交试验,料液比为1∶15,利用回流法提取啤酒花中的8-PN,反相高效液相色谱法测定啤酒花中8-PN的含量[色谱分离条件:ODS C18反相柱(4.6 mm×250 mm,0.45μm),用乙腈、1%甲酸进行梯度洗脱,流速:1.2 ml/min,检测波长:288 nm,柱温:30℃]。探讨提取溶剂(甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯)、提取时间(40、60 min)、提取温度(40、60℃)对啤酒花中8-PN提取含量的影响。结果以正丁醇为提取溶剂,料液比为1∶15,利用回流提取,提取温度40℃,时间40 min,测得啤酒花中8-PN的最高提取含量为79.1 mg/kg。该方法的标准曲线相关系数R~2=0.999 8,线性范围为0.001~0.1 mg/ml,检出限为0.122 mg/L;检测浓度为0.03 mg/ml标准液的保留时间和峰面积的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于1%,加标回收率在98%~102%之间。结论优化的方法可简便、准确地测定啤酒花中8-PN含量,为啤酒花中8-PN的进一步分离、纯化提供了实验依据。

    2017年08期 v.30 850-854页 [查看摘要][在线阅读][下载 293K]
    [下载次数:57 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:69 ]
  • 牛副流感病毒3型TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立

    闻晓波;张玲玲;张峣;刘阳阳;倪宏波;冉旭华;

    目的建立检测牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的Taq Man荧光定量PCR方法。方法根据GenBank中公布的BPIV3序列,选取P基因上保守区域设计特异性引物及TaqMan-MGB探针。优化反应体系,建立实时荧光定量PCR方法,并对方法的特异性、重复性和敏感性进行验证。结果标准曲线在104~108copies/μl范围内具有良好的线性关系,R~2达到0.999,斜率为-3.203,扩增效率为105.2%。利用该方法对BPIV3a及BPIV3c进行检测,结果为阳性,对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(infectioils bovine rhinotraeheitis virus,IBRV)进行检测,结果呈阴性。3个浓度质粒标准品,重复3次检测,CV均小于1.5%。建立的方法对质粒的最小检出量为1.0×10~2 copies/μl。结论建立了能够检测BPIV3a及BPIV3c的TaqMan-MGB探针实时定量PCR方法,该方法特异性较强,重复性及敏感性良好,为早期诊断及定量分析提供了更快速、稳定、可靠的方法。

    2017年08期 v.30 855-859页 [查看摘要][在线阅读][下载 291K]
    [下载次数:76 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:62 ]
  • 响应面法优化超声辅助红小豆蛋白糖基化反应

    冯玉超;王长远;张东杰;

    目的响应面法优化超声辅助红小豆蛋白糖基化反应。方法利用超声波辅助机制,对红小豆蛋白进行糖基化改性。通过单因素试验,在确定超声温度、超声功率、超声时间、pH、红小豆蛋白-氨基葡萄糖质量比和红小豆蛋白浓度对红小豆蛋白接枝度和褐变度影响的基础上,经Design-Expert 8.0.6.1软件进行响应面分析。结果最终确定最佳反应条件为:超声温度70℃,超声功率250 W,超声时间28 min,pH 7,红小豆蛋白-氨基葡萄糖质量比1∶1,红小豆蛋白浓度8.5 mg/ml;在此条件下进行验证试验,测得接枝度为56.07%,与理论预测值(56.79%)相差0.72%。结论成功优化了超声辅助红小豆蛋白糖基化反应,确定了最佳工艺,为改善红小豆蛋白的功能性、红小豆精深加工及新产品的研发提供了参考。

    2017年08期 v.30 860-867页 [查看摘要][在线阅读][下载 418K]
    [下载次数:83 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:58 ]
  • 电子束辐照对细胞工厂灭菌效果的验证

    石亮;黄晓娜;张德利;李秋睿;徐国亮;闻向华;高源;

    目的验证电子束辐照对细胞工厂进行灭菌的有效性。方法采用不同剂量(20、25、30、35 kGy)电子束辐照对细胞工厂进行灭菌处理,用辐照的细胞工厂培养2BS细胞,并进行无菌、表面微生物检测,同时利用短小芽孢杆菌指示剂验证不同剂量电子束对细胞工厂灭菌的有效性。确定辐照后细胞工厂的保存时间、耐运输和潮湿性。结果20 kGy的电子束只能满足10层细胞工厂辐照灭菌要求,≥25 kGy的电子束可有效对细胞工厂进行灭菌,能够满足GMP的无菌要求;20 kGy的电子束可对细胞工厂表面10~6 cfu/ml的短小芽孢杆菌完全杀灭,≥25 kGy的电子束对放在细胞工厂中间位置的106 cfu/ml的短小芽孢杆菌能够完全杀灭,灭菌后保存6个月内能够保证无菌,且耐运输和潮湿。结论电子束可有效对细胞工厂进行灭菌处理,且具有灭菌彻底、无污染、无残留、不需加热、可自动化运行、对产品及包装材料无损伤等优点。

    2017年08期 v.30 868-871页 [查看摘要][在线阅读][下载 197K]
    [下载次数:84 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:60 ]

综述

  • 外泌体在白血病免疫调节中的作用

    李瑞玮;张娟娟;欧阳红梅;撒亚莲;

    外泌体是活细胞分泌至胞外的一种微囊泡结构,携带有亲本细胞来源的核酸、蛋白质和脂质等生物大分子信息,是细胞间的通讯载体。外泌体与肿瘤细胞的免疫逃逸、增殖、迁移与血管生成等恶性生物学行为有关,促使白血病细胞对化疗药物产生耐药以及诱导T细胞凋亡。外泌体促进免疫系统激活,是一种潜在的白血病免疫治疗疫苗。另外,外泌体是发现白血病诊断和治疗生物标记物的一个窗口。本文就外泌体的生物学特性及其在白血病免疫调节中的作用作一综述。

    2017年08期 v.30 872-877页 [查看摘要][在线阅读][下载 189K]
    [下载次数:374 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:59 ]

专题报道

  • polio/HAV灭活疫苗抗原国际标准品研制的经验及对EV71国际标准品研制的启示

    姚昕;卞莲莲;高帆;王一平;毛群颖;李长贵;徐苗;梁争论;

    <正>近年来,手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)已成为我国主要的公共健康问题,研发疫苗是控制HFMD的有效措施。目前我国3家企业完成肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗Ⅲ期临床试验,并均已上市。中国食品药品检定研究院(NIFDC)研发的EV71中和抗体国家标准品和抗原标准品在疫苗的研发和质控中发挥了积极作用。

    2017年08期 v.30 878-883页 [查看摘要][在线阅读][下载 164K]
    [下载次数:70 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:70 ]
  • 《EV71疫苗质控和评价技术要点》解读

    毛群颖;卞莲莲;高帆;姚昕;徐苗;梁争论;

    <正>2016年11月16日,中国食品药品检定研究院(以下简称中检院)网站发布了《EV71疫苗质控和评价技术要点》。该技术要点为中检院第一个针对疫苗质控和评价方面具体技术规范的文件,详细阐述了我国创新性EV71疫苗生产和研发过程中的质量控制要点。解读该指导性文件的起草背景,明确其

    2017年08期 v.30 884-886页 [查看摘要][在线阅读][下载 78K]
    [下载次数:121 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:56 ]
  • 麻腮风联合减毒活疫苗2014~2016年批签发质量分析

    崔晓雨;李薇;权娅茹;袁力勇;李长贵;

    <正>麻疹、腮腺炎、风疹是具有高度传染性的经呼吸道传播的病毒性疾病。其中麻疹可引发高烧和皮疹,并造成失明、脑炎或死亡。腮腺炎病毒可导致腮腺炎症、发烧、头痛和肌肉酸痛,并可引起病毒性脑膜炎等严重并发症。风疹在儿童中通常症状较轻,但在怀孕早期感染风疹可能导致胎儿死亡或先天性风疹综合征,进而导致严重的大脑、心脏、眼睛及耳朵的先天缺陷。由于儿童作为极易感人群,感染麻疹、腮腺炎、风疹可产生严重的后果,但目前世界范围内最好的方式就是通过接种麻疹、腮腺炎、风疹

    2017年08期 v.30 887-892+896页 [查看摘要][在线阅读][下载 630K]
    [下载次数:60 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:78 ]
  • 《中国药典》水痘减毒活疫苗质量标准浅析

    马锐;郭中平;

    <正>水痘减毒活疫苗系采用水痘-带状疱疹病毒(varicella-herpes zoster virus,VZV)接种人二倍体细胞,经培养,收获病毒,加入适宜稳定剂冻干制成,用于预防由VZV感染引起的急性传染病,目前属于国家免疫规划管理中的二类疫苗。该产品于2000年在我国批准上市,2015年首次纳入《中国药典》(Chinese Pharmacopoeia,ChP)三部收载。本文

    2017年08期 v.30 893-896页 [查看摘要][在线阅读][下载 117K]
    [下载次数:119 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:55 ]

消息

  • 2017第五届上海国际生物发酵产品与技术装备展览会

    <正>由中国生物发酵产业协会主办、上海信世展览服务有限公司承办的2017第五届上海国际生物发酵产品与技术装备展览会(BIO CHINA),将于2017年10月25~27日在上海新国际博览中心举行。BIO CHINA已成为全球发酵行业年度盛会,业界有识之士汇聚一堂,新观点新思想荟萃一处。BIO CHINA,中国生物发酵行业再创业征程扬帆起航!为生物发

    2017年08期 v.30 867页 [查看摘要][在线阅读][下载 34K]
    [下载次数:4 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:46 ]

  • 重组乙型肝炎疫苗工艺中去除甲醛添加的探讨

    苏彩霞;李逦;韩旭东;金贞姬;赵平;王文雯;张平;李贵兴;鲁秀美;张海春;徐德启;

    目的 通过比较甲醛处理前后重组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和疫苗(汉逊酵母)成品各项检测指标及稳定性的变化,评估甲醛在重组乙型肝炎疫苗工艺中的作用,为重组乙型肝炎疫苗工艺中是否可取消甲醛处理步骤提供参考。方法 采用扫描电镜观察、HPLC检测和疫苗体内效力评价指标半数有效剂量(ED50)、乙肝疫苗常规检测项目比较甲醛处理前后HBsAg及疫苗成品的变化情况,通过稳定性考察确定甲醛对疫苗稳定性和有效期的影响。结果 HBsAg经甲醛处理后产生轻微聚合,但疫苗成品ED50和其他各项检测指标均无明显变化,动物异常毒性合格。甲醛处理和未处理疫苗成品的稳定性考察结果相同。结论 重组乙型肝炎疫苗生产工艺中甲醛处理步骤对疫苗成品检测指标及稳定性无影响,可考虑取消,从而提高乙肝疫苗的质量和安全性。

    2017年08期 788-793页 [查看摘要][在线阅读][下载 387K]
    [下载次数:58 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:95 ]
  • 下载本期数据