中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

疫苗研究

  • 冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)冻干保护剂的筛选

    李春艳;赵淑洁;孙宏亮;闫峰;郑华;赵博;柴博雅;杨屹;

    目的筛选适用于冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的冻干保护剂。方法用同一批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液在同一冻干条件下,改变右旋糖酐40、海藻糖及人血白蛋白3种保护剂主要成分的含量,组合成6种保护剂配方,分别制备成半成品。冻干后检测成品外观、疫苗效力及热稳定性,确定最佳冻干保护剂配方。以最佳保护剂配方制备6批成品进行适用性验证,并选择3批成品进行长期稳定性验证。结果确定最佳冻干保护剂的配方为4%海藻糖、3%右旋糖酐40、1%蔗糖、0.5%甘露醇、2%人血白蛋白。以该配方制备的6批成品的各项检测指标均符合《中国药典》三部(2010版)的要求,其中3批成品经2~8℃保存12个月后的效价较稳定。结论筛选获得了最佳冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的冻干保护剂,且具有良好的稳定性。

    2017年03期 v.30 225-228页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
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  • 不同分子大小b型流感嗜血杆菌结合物免疫原性的比较

    孙述学;陈中伟;穆姗姗;王振业;刘晓磊;王震;刘峰;马宏初;褚自青;

    目的评价不同分子大小b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合物的免疫原性,确定结合物的最适分子大小。方法制备不同活化度的Hib多糖,分别与载体蛋白CRM197以胺还原法制备不同分子大小(K_D)的Hib结合物;此外,利用凝胶过滤层析分离Hib结合疫苗原液,收集K_D于0.05~0.25、0.25~0.45之间及大于0.45的结合物组分;分别免疫小鼠,采用间接ELISA法测定小鼠血清中抗Hib多糖IgG抗体滴度,以市售Hib疫苗作为对照。结果不同分子大小Hib结合物第2针及第3针免疫后,K_D0.35组与K_D0.01组诱导的抗体水平相当(P=0.166和0.882),显著高于K_D0.53组(P=0.008和0.031),也高于对照疫苗组;同样K_D0.25组第2针免疫后诱导的抗体滴度也显著高于K_D0.48组(P=0.037)。不同分子大小片段的Hib结合物组分第2针及第3针免疫后,K_D0.05~0.25组抗体水平最高,K_D0.25~0.45组次之,K_D>0.45组最低。结论较高分子大小Hib结合物的免疫原性优于较低分子大小的结合物,在制备Hib结合疫苗时,以分子大小K_D0.20~0.35为宜。

    2017年03期 v.30 229-233页 [查看摘要][在线阅读][下载 281K]
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基础研究

  • 人颗粒酶B融合蛋白的原核表达及其免疫血清的制备

    汪文寰;冯方方;蔡一奇;张婵琼;岑丹维;宋易玲;郭刚强;张丽芳;李文姝;

    目的在原核体系中表达人颗粒酶B(granzyme B,Gzm B)融合蛋白,并制备Gzm B免疫血清多克隆抗体。方法构建Gzm B原核表达重组质粒p ET32a-Gzm B,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组Gzm B(r Gzm B)蛋白,镍离子螯合亲和层析柱纯化表达产物。以纯化的r Gzm B蛋白为免疫原,皮下多点注射BALB/c小鼠,共免疫3次,分别于免疫后2、4、6周经小鼠尾静脉采血,分离血清,间接ELISA法检测免疫血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平,并确定其抗体最大稀释度,免疫斑点试验检测免疫血清多克隆抗体对Gzm B的特异免疫结合特性。结果质粒p ET32aGzm B经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的r Gzm B蛋白相对分子质量为48 000;纯化的r Gzm B蛋白免疫小鼠血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平随免疫时间延长至第4周达到高峰,随后维持一定水平;抗体最大稀释度为1∶1 600;r Gzm B免疫血清能够特异地结合Gzm B,显示了其免疫结合特性。结论制备了r Gzm B蛋白和Gzm B小鼠免疫血清多克隆抗体,为后续开展Gzm B的靶向杀伤、靶向检测等应用研究奠定了基础。

    2017年03期 v.30 234-238页 [查看摘要][在线阅读][下载 518K]
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  • 不同尿细胞诱导多能干细胞效率的比较

    时良;崔亚洲;周小艳;栾静;韩金祥;

    目的比较不同来源及不同批次尿细胞诱导多功能干细胞的效率。方法收集夜尿样本25份及非夜尿样本81份(其中31份来自男性,50份来自女性),采用非整合、无血清、无饲养层细胞、无致癌基因c-MYC的重编程法诱导获得诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)。经碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)染色估算尿细胞重编程效率。结果夜尿与非夜尿中尿细胞分离的成功率分别为8%和44%,差异有统计学意义(P<0.05);同一来源不同批次尿细胞间及不同尿液来源尿细胞间的重编程效率的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论夜尿不适宜作为收集尿细胞的来源。不同的尿细胞会影响重编程的效率,本实验为提高诱导效率的研究奠定了基础。

    2017年03期 v.30 239-242+248页 [查看摘要][在线阅读][下载 606K]
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  • 骨形态发生蛋白10在中国仓鼠卵巢细胞中的表达、纯化及其生物活性

    郑雄飞;金坚;龚笑海;李文军;徐栋生;万爱妮;

    目的在中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)中表达改造后的骨形态发生蛋白10(bone morphogenetic protein 10,BMP10)全长基因,纯化后检测其生物活性,以期获得具有生物活性的BMP10分子。方法于rh BMP10的propeptide与mature chain基因片段之间插入6×his-tag标签及DDDDK(肠激酶识别位点),构建p MH3-rh BMP10-histag-DDDDK质粒,电转入CHO细胞,用500μg/ml G418从单克隆中筛选出稳定表达目的蛋白的重组细胞,悬浮驯化表达8 d后,收集培养液上清,阴离子交换柱和镍柱纯化目的蛋白。采用q-PCR法检测纯化蛋白的体外细胞活性。结果目的蛋白纯化液经SDS-PAGE检测到的条带相对分子质量与目的蛋白理论值相符,Western blot分析可见相对分子质量约48 000、96 000和190 000的3个条带,与目的蛋白单体及多聚体相对分子质量一致。酶切后的目的蛋白可有效刺激P19细胞的标志蛋白(Smad6)表达上调。结论 BMP10 propeptide的存在对BMP10的蛋白活性具有重要作用,改造后的BMP10在CHO细胞中表达具有一定的生物活性。本研究为全长BMP10活性二聚体的制备提供了新的思路。

    2017年03期 v.30 243-248页 [查看摘要][在线阅读][下载 1054K]
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  • 吉林省2001~2014年麻疹病毒血凝素蛋白基因亲缘关系分析

    单元春;王爽;周剑惠;吴东林;杨尧;田鑫;魏雷雷;程涛;曹凤瑞;

    目的分析吉林省2001~2014年间麻疹病毒血凝素(hemagglutinin,H)蛋白基因的亲缘关系。方法选取35株吉林省麻疹病毒株作为代表株,采用RT-PCR法获得麻疹病毒H蛋白核酸分段扩增产物,将测得的序列用DNASTAR软件进行拼接,并用Mega 4.0和Bioedit软件对序列进行亲缘关系和同源性分析。结果 35株麻疹病毒代表株均属于H1基因型H1a基因亚型,且明显处于两个小分支上。35株麻疹病毒株H蛋白基因同源性变化为:株间核苷酸同源性为98.2%~99.8%,株间氨基酸同源性为95.2%~99.8%;与H1a中国代表株(China93-4/H1a)相比,核苷酸同源性为98.8%~99.6%,氨基酸同源性为96.7%~98.8%;与中国疫苗株(Shanghai-191)相比,核苷酸同源性为94.5%~95.2%,氨基酸同源性为84.7%~86.7%。结论吉林省2001~2014年间,麻疹病毒H蛋白与中国代表株(China93-4/H1a)的亲缘关系呈逐年渐远的态势发展,与中国H1a代表株和中国疫苗株相比,核苷酸和氨基酸同源性均呈逐年下降的趋势,提示应对吉林省麻疹病毒H蛋白进行持续监测和分析。

    2017年03期 v.30 249-253页 [查看摘要][在线阅读][下载 811K]
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  • 沙门菌对小鼠胃癌细胞增殖及β-防御素-2表达的影响

    陈竞霞;张柏宁;孙鹏;牛燕;赵方新;陆景坤;张烜;赵鹏伟;

    目的探讨沙门菌对小鼠胃癌细胞MFC增殖及β-防御素-2(mouseβ-defensin,m BD-2)表达的影响。方法将不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌分别作用MFC细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT法检测沙门菌对细胞抑制的最佳浓度及时间;TUNEL法检测不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌作用MFC细胞不同时间(12、24和48 h)对细胞凋亡的影响;将不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌作用MFC细胞4、8和12 h,定量PCR及Western blot法检测m BD-2 m RNA及蛋白水平。结果浓度103个/ml沙门菌作用24 h对MFC细胞的抑制作用明显,细胞凋亡也明显;沙门菌作用MFC细胞8 h时,m BD-2的表达量无论在蛋白还是m RNA水平均较高。结论m BD-2的表达在浓度103个/ml沙门菌作用8 h后达到最高,为进一步研究m BD-2的产生机制奠定了基础。

    2017年03期 v.30 254-257页 [查看摘要][在线阅读][下载 850K]
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  • 中度嗜盐菌Halobacillus Y5甘氨酸甜菜碱转运蛋白opuD基因的克隆及功能分析

    王艳红;曹宁;贾桂燕;余丽芸;姜巨全;

    目的克隆中度嗜盐菌Halobacillus Y5甘氨酸甜菜碱转运蛋白(betaine-choline-carnitine transporter,BCCT)opu D基因,对其结构及蛋白功能进行分析,并通过耐盐碱特性试验明确其功能。方法将经过Sau3AⅠ部分酶切回收的Halobacillus Y5基因组总DNA,与用Bam HⅠ酶切并去磷酸化的线性p UC18载体连接,电转化法导入E.coli KNabc感受态细胞中,涂布在含0.2 mol/L Na Cl、Amp~(50)的LBK固体培养基上,筛选阳性克隆,提取质粒测序后,进行生物信息学分析及耐盐碱特性检测。结果已从中度嗜盐菌-喜盐芽孢杆菌Halobacillus Y5中成功克隆了1个新的耐盐碱基因,将其命名为HY5_opu D,该基因是1个新的甘氨酸甜菜碱转运蛋白基因,其编码的蛋白氨基酸序列和结构不同于以往报道的Opu D转运蛋白,且该基因能够使KNabc在0.2 mol/L Na Cl、5 mmol/L Li Cl及碱性p H 8.0环境下生长。结论成功克隆了1个新型的opu D转运蛋白基因,为开发利用中度嗜盐菌的耐盐碱基因奠定了理论基础。

    2017年03期 v.30 258-263页 [查看摘要][在线阅读][下载 3328K]
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  • 烯效唑对干旱胁迫下薏苡抗氧化酶活性及DNA甲基化水平的影响

    向君亮;黄玉兰;殷奎德;刘兆冰;徐业梅;丰经书;任海娟;

    目的探讨烯效唑(S3307)对干旱胁迫下薏苡抗氧化酶活性及DNA甲基化水平的影响。方法将薏辽5号种子培养至幼苗的两叶一心期,实验分为3组:对照组(control):用Hoagland培养液处理;干旱胁迫组(PEG):用25%PEG的营养液处理;S3307缓解组(PEG+S3307组):经S3307预处理后,再用25%PEG处理。检测各组幼苗的形态指标(苗高、茎粗、根长、根数)及过氧化物酶(peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性,同时采用高效液相色谱(HPLC)法测定各组幼苗的DNA甲基化水平。结果经S3307预处理后,幼苗的株高和根长显著降低(P<0.05),茎粗及根冠比显著增加(P<0.05);SOD、CAT和POD抗氧化酶的活性显著升高(P<0.05);幼苗叶片中5-甲基胞嘧啶(5-m C)比例比control组增加了34.29%(P<0.001),增加幅度比PEG组降低了12.99%。结论 S3307可缓解干旱胁迫下薏苡的膜脂过氧化损伤及DNA甲基化水平的上升,具有良好的壮苗作用,为薏苡的抗旱性机理研究奠定了基础。

    2017年03期 v.30 264-270页 [查看摘要][在线阅读][下载 804K]
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  • 大肠埃希菌对人结肠癌细胞RKO产生β防御素-3的影响

    张丽英;杜肖彦;赵鹏伟;

    <正>β防御素是天然抗菌肽家族的重要成员,同时也是机体先天性防御屏障的重要组成部分,对细菌、真菌和病毒入侵机体具有重要的防御作用~[1-2]。β防御素-3通常受外界环境的刺激而产生~[3],在人体上皮细胞和黏膜组织中广泛表达,具有广谱的抗微生物活性,能促进伤口愈合,发挥免疫调节

    2017年03期 v.30 271+277页 [查看摘要][在线阅读][下载 229K]
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治疗性制剂

  • 水牛干扰素α的可溶性原核表达、纯化及其抗病毒活性

    李树启;赵俊;王利利;俞海洋;甘霖;王明丽;

    目的在E.coli中高效表达可溶性水牛干扰素α(recombinant bovine interferon alpha,r Bo IFNα),纯化后检测其抗病毒活性。方法采用RT-PCR方法从水牛肝脏总RNA中扩增IFNα基因,插入原核表达载体p ET-32a中,构建重组表达质粒p ET-32a-IFNα,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot检测后,使用His Trap~(TM) HP镍离子亲和层析柱进行纯化,并采用细胞病变抑法,在水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)/MDBK细胞滴定系统上检测其抗病毒活性。结果核酸测序结果显示,r Bo IFNα基因全长498 bp,与Gen Bank报道的牛IFNαC亚型基因核苷酸序列同源性为100%;表达的r Bo IFNα蛋白主要存在于破碎菌体的上清中,表达量约占菌体总蛋白的63.8%;纯化的r Bo IFNα纯度高达98.52%,能与牛IFNα多克隆抗体特异性结合,比活性为(3.6±0.2 5)×10~6 U/mg。结论成功在E.coli中高效表达了可溶性r Bo IFNα蛋白,纯化的蛋白具有较强的抗病毒活性,为其临床应用奠定了基础。

    2017年03期 v.30 272-277页 [查看摘要][在线阅读][下载 1099K]
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诊断制剂

  • 肠出血性大肠埃希菌O157免疫磁珠的制备

    梁冰;张雅洁;纪雪;祝令伟;郭学军;刘彦晶;刘军;周伟;李丽红;冯书章;孙洋;

    目的制备可高效、特异性富集肠出血性E.coli O157(enterohemorrhagic Escherichia coli O157,EHEC O157)的免疫磁珠。方法分别用5种不同规格磁珠与E.coli O157特异性单克隆抗体偶联制备免疫磁珠,通过比较磁珠蛋白偶联量,选取包被效果最佳的磁珠规格;对制备工艺进行优化(包括活化时间、温度,偶联缓冲液p H值,偶联温度、时间);对制备的O157免疫磁珠选择性集菌的敏感性和特异性进行评价,并与进口磁珠吸附率进行比较。结果直径0.5~1.0μm羧基磁珠抗体包被效果及目的菌分离效果最好。加入NHS后,活化30 min为最佳时间;4℃磁珠活化温度、0.01 mol/L PBS(p H 7.4)构成的体系对磁珠偶联单克隆抗体效果最佳;偶联温度为37℃、偶联时间为120 min时,偶联蛋白量最高,且波动范围较小,为最佳偶联温度及时间。在复杂的微生物环境中,O157免疫磁珠的敏感性达到20 CFU/ml。在混合菌液中,E.coli O157菌含量在1.4×10~3 CFU/ml时,免疫磁珠特异性捕获率达到90%。结论获得羧基磁珠与E.coli O157单克隆抗体偶联的最佳条件。制备的免疫磁珠能够特异性富集EHEC O157,具有操作简便,分离速度快,捕获率高等特点,可用于临床样品或食品中EHEC O157的分离鉴定。

    2017年03期 v.30 278-282页 [查看摘要][在线阅读][下载 241K]
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临床研究

  • 冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)在10~60岁健康人群中的安全性及免疫原性

    黄莉荣;吕腾荣;潘贵秋;曹守春;张巍;侯玉婷;李明丽;李艳萍;

    目的评价冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)在10~60岁健康人群中的安全性及免疫原性。方法在广西岑溪市和苍梧县选择1 200名10~60岁健康人群,采用随机、盲法、同类制品阳性对照的试验设计,将1 200名受试者按1∶1随机配对,分别接种试验及对照疫苗(市售国产同类制品)。按0、3、7、14、28 d免疫程序接种,观察首剂疫苗接种后42 d随访期内全身和局部不良反应;于首次接种后14及42 d采集静脉血,通过快速荧光灶抑制试验检测狂犬病病毒中和抗体,计算抗体几何平均浓度(GMC)。结果共有1 199名受试者完成安全性观察,试验疫苗组(600名)和对照疫苗组(599名)的全身反应发生率分别为12.33%和18.03%(P<0.05),常见症状均为发热(发生率分别为8.00%和13.19%);局部反应发生率分别为5.33%和10.52%(P<0.05),均以疼痛为主(发生率分别为4.17%和8.85%)。1 147名受试者完成免疫原性观察,试验疫苗组(571例)和对照疫苗组(576例)首剂疫苗免后14 d抗体阳转率分别为100.00%和99.83%,42 d均达100.00%,差异均无统计学意义(P>0.05);14 d抗体GMC分别为8.94和7.96 IU/ml,42 d分别为17.26和15.04 IU/ml,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)具有良好的安全性及免疫原性。

    2017年03期 v.30 283-287+289页 [查看摘要][在线阅读][下载 213K]
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  • 非特异性免疫技术治疗病毒性肝病

    谷杰;唐杰;周仲强;张霖;

    <正>近年来,由于细胞免疫疗法治疗病毒性肝炎疗效显著,不良反应罕见,在病毒的清除和疾病免疫发病中的作用明显,而引起医学界重视。研究证实,麻疹疫苗注入人体,在清除麻疹病毒的同时,HBV也得到部分清除或抑制;而且通过非特异性细胞免疫的激活,可直接清除和抑制HBV。停止应用后,CD4和CD8的比值保持在正常范围可长达48周~[1-2]。推

    2017年03期 v.30 288-289页 [查看摘要][在线阅读][下载 80K]
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  • 3例麻疹住院患儿医院感染暴发流行病学调查

    任亚萍;彭毅;费怡;肖绍坦;

    目的调查上海市某医院肝脏外科儿童病区内麻疹感染暴发的原因。方法对该院肝脏外科儿童病区2014年5月4~15日发生的3例麻疹确诊病例的病历资料进行回顾性调查分析。结果 3例麻疹患儿麻疹病毒Ig M抗体检测均阳性。3例患儿同住该院肝脏外科儿童病区,住院时间均超过麻疹的最长潜伏期,发病时间间隔不超过麻疹的最短潜伏期。结论此次事件属于一起医院感染的暴发事件,但未发现明显的共同传染源。建议加强关注患有基础性疾病儿童的麻疹早期诊断。做好包括医技科室在内的发热预检、通风消毒工作,避免造成麻疹病例交叉感染。

    2017年03期 v.30 290-292页 [查看摘要][在线阅读][下载 108K]
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技术方法

  • 重组抗TNF-α单克隆抗体ADCC生物学活性检测方法的建立

    吕丽娟;陈保汉;周冬梅;徐军;孙文正;杨彬;

    目的建立抗TNF-α单克隆抗体抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)生物学活性检测方法。方法以健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)作为效应细胞,自主构建膜表面表达TNF-α(membrane-expressed form of TNF-α,m TNF-α)CHO细胞作为靶细胞,通过系列不同浓度的重组抗TNF-α单克隆抗体原研药(m Ab-O)和候选药(m Ab-S)进行ADCC检测,采用四参数拟合计算二者的半数抑制浓度(IC_(50))及m Ab-S的相对活性,并在优化实验条件的基础上进行专属性、精密度验证。结果重组抗TNF-α单克隆抗体的浓度与细胞毒性存在量效关系,符合四参数方程式,曲线在半对数坐标上呈典型S型,R2>0.99。方法经优化确定相同个体来源PBMC作为效应细胞,靶细胞数目4×10~4个/孔,效靶比25∶1,抗体靶细胞孵育时间1 h,诱导时间4 h。该方法具有良好的专属性,对于相同个体来源的PBMC,m Ab-S活性总体与m Ab-O相近(50%~200%),相对活性重复性RSD为4.64%,同一实验人员间隔3个工作日检测结果的RSD为12.50%,2名实验人员2次检测结果的RSD为8.21%,均符合方法验证的可接受标准。结论成功建立了重组抗TNF-α单克隆抗体ADCC生物学活性检测方法,该方法专属性强,精密度好,可作为重组抗TNF-α单克隆抗体与上市原研药相对ADCC生物学活性的评估方法。

    2017年03期 v.30 293-297页 [查看摘要][在线阅读][下载 419K]
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  • 不同样品处理方法对T淋巴细胞亚群及功能分析的影响

    任静;张耀方;王桂琴;樊卫平;

    目的研究Ficoll-Hypaque密度梯度离心法、先裂解红细胞后标记抗体、先标记抗体后裂解红细胞3种不同处理方法对T淋巴细胞(T细胞)亚群及功能分析的影响。方法采用3种方法制备样本后,采用流式细胞术检测T细胞表面分子及亚群比例,台盼蓝染色检测细胞存活率,Con A刺激检测细胞活性。结果 Ficoll-Hypaque密度梯度离心法与两种裂解红细胞法相比,T细胞亚群比例差异无统计学意义(P>0.05),细胞存活率及细胞活性均较高(P<0.05)。两种裂解红细胞法处理样本结果无差异。结论 Ficoll-Hypaque密度梯度离心法适合研究工作,先标记抗体后裂解红细胞的方法更适合临床检验。

    2017年03期 v.30 298-301页 [查看摘要][在线阅读][下载 615K]
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  • 生物反应器微载体放大培养Marc-145细胞及PRRSV增殖情况

    任飞;冯二凯;尹茉莉;栾杨;程悦宁;张淼;于竞杰;盛程程;程世鹏;陈立志;

    目的确定不同级别生物反应器间Marc-145细胞在微载体上消化放大培养条件,实现Marc-145细胞二级放大后,在生物反应器内增殖猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)。方法在一级生物反应器(BC-7L型)内,以微载体密度4 g/L培养Marc-145细胞,培养72 h时经灭菌PBS漂洗、胰酶消化后,接种至二级生物反应器(BC-14L型)继续培养,实现反应器间微载体细胞5倍体积增殖培养。以0.05 MOI接种PRRSV(TJM-F92株),接毒后24、36、48、60、72 h分别取上清及全液样品,检测病毒效价(TCID50)。结果 Marc-145细胞经过一级生物反应器培养72 h后,细胞密度达28.7×105个/ml;消化放大后,二级生物反应器培养72 h后,细胞密度达24.9×10~5个/ml。接毒后36 h,样品效价峰值可达108.19 TCID50,上清与全液样品效价差异较小。结论 Marc-145细胞从BC-7L型到BC-14L型不同反应器之间进行放大培养是可行的,为PRRSV活疫苗新型工艺改进及大规模放大生产奠定了基础。

    2017年03期 v.30 302-306页 [查看摘要][在线阅读][下载 2907K]
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  • 嗜热糖苷酶Fpendo5A转化绞股蓝皂苷XLIX的产物鉴定及分离纯化

    于渤浩;李男;赵幻希;李晶;郑飞;戴雨霖;李卓;刘淑莹;于珊珊;

    目的对嗜热糖苷酶Fpendo5A转化绞股蓝皂苷XLIX的产物进行鉴定及分离纯化。方法应用Fpendo5A酶转化绞股蓝皂苷XLIX,通过高效液相色谱法(HPLC)和快速分离液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(rapid resolution liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry/mass spectrometry,RRLC-Q-TOF MS/MS)对转化产物进行鉴定,全制备型高效液相色谱对转化产物进行分离纯化。结果在65℃和p H 6.0条件下,利用Fpendo5A酶转化绞股蓝皂苷XLIX 48 h后,获得单一转化产物,该酶能够水解绞股蓝皂苷XLIX的C20位葡萄糖苷键,生成长梗绞股蓝皂苷Ⅰ。纯化后的转化产物纯度达95.42%,产率为21.6%。结论利用Fpendo5A酶能够成功转化绞股蓝皂苷XLIX,纯化后的绞股蓝皂苷转化产物纯度好,产率高,为今后的药理活性及相关基础研究奠定了基础。

    2017年03期 v.30 307-311页 [查看摘要][在线阅读][下载 525K]
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  • 幼兔法检测Hib-CRM 197结合疫苗免疫原性的可行性试验

    曹方;刘海昌;李强;王良超;潘玲玲;杨玲;

    目的评价幼兔法检测Hib-CRM197结合疫苗免疫原性的可行性。方法用Hib-CRM197结合疫苗经家兔腋窝处皮下注射,12.5μg多糖/(只·次),分别于0、7、14 d各免疫1次,同时设阴性对照组(生理盐水)及阳性对照组(3个厂家的市售同类产品)。免疫前经家兔耳缘动脉采血,末次免疫1~2周内经家兔心脏采血,分离血清,采用ELISA法检测家兔血清抗体水平。结果 Hib-CRM197结合疫苗组及阳性对照组家兔免疫后血清的A_(490)值均高于免疫前血清A_(490)值5倍以上,是cutoff值2倍以上。结论用幼兔法检测Hib-CRM197结合疫苗免疫原性是可行的。

    2017年03期 v.30 312-314页 [查看摘要][在线阅读][下载 264K]
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  • 气质联用技术分析大兴安岭野生玫瑰花的脂肪酸组成

    贾鹏禹;李良玉;李朝阳;宋大巍;

    目的采用气质联用技术分析生长于黑龙江北部地区大兴安岭野生玫瑰花脂肪酸的组成。方法将同一天采摘并储存于相同条件下的野生玫瑰花,采用索氏提取法,以石油醚为溶剂对野生玫瑰花的不同部位萃取得到玫瑰花脂肪酸,经三氟化硼-甲醇酯化后,用气质联用技术进行定性和定量分析。结果野生玫瑰花不同部位(花瓣、花蕊、花托及花萼)的脂肪酸组成不同,花瓣中共检测出14种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸相对含量为63.78%;花蕊中共检测出15种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸的相对含量为59.1%;花托中共检测出13种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸的相对含量为47.02%;花萼中共检测出20种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸的相对含量为40.3%。结论野生玫瑰花不同部位(花瓣、花蕊、花托及花萼)的脂肪酸组成不同,花瓣部位富含不饱和脂肪酸,对提升玫瑰花精油的质量,充分利用野生玫瑰花资源提供了参考。

    2017年03期 v.30 315-319+324页 [查看摘要][在线阅读][下载 764K]
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综述

  • 静注人免疫球蛋白质量控制要求的比较

    雷敏;马莉;李长清;

    静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)p H 4目前已广泛用于治疗各种免疫缺陷疾病及自身免疫性疾病。严格的质量控制是确保IVIG临床疗效的重要保障,欧美及我国药典均对IVIG的质控作出了严格规定。但IVIG成分复杂,随着其作用机制逐渐明确以及新的临床适应症不断增加,现有的规定可能需实时补充、完善和改进。本文比较了目前国际主流药典关于IVIG制品质量控制要求的差异,以及现有文献资料中对于IVIG制品质量控制新方法的探索,以期对相关人员研究及血液制品企业生产质控有所启发。

    2017年03期 v.30 320-324页 [查看摘要][在线阅读][下载 177K]
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  • 白细胞介素-12生物学作用的研究进展

    周鹏;柏琴琴;陈丽丽;

    白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)是一种异源二聚体细胞因子,被认为是细胞免疫应答反应中的初始因子,具有激活T淋巴细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞的功能,可促进这两种细胞的分化与增殖,调控细胞免疫,并诱导这些细胞分泌干扰素γ(interferonγ,IFNγ)。本文就IL-12在抗感染、抗肿瘤和疫苗佐剂中的作用作一综述。

    2017年03期 v.30 325-328+334页 [查看摘要][在线阅读][下载 189K]
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  • 微生物来源抗肿瘤药物的研究进展

    魏艳红;尧晨光;奚彩丽;胡康洪;

    自然界拥有丰富的微生物资源,可产生多种天然产物。许多产物含有抗肿瘤的活性成分,包括不同的结构类型:蛋白类、多糖类、蒽环类、有机酸酯类、萜类、生物碱类、大环内酯类及烯二炔类等,已有多种天然产物开发为药物应用于临床。本文就来源于陆地微生物、海洋微生物及共生微生物抗肿瘤药物的种类,微生物来源抗肿瘤药物面临的挑战和应对策略及其优势和发展前景等方面作一综述。

    2017年03期 v.30 329-334页 [查看摘要][在线阅读][下载 223K]
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专题报道

  • 一疯犬咬伤13人的暴露后处置分析

    温宇环;王泽鉴;郑新雄;孟胜利;

    <正>2016年1月8日,陕西铜川市发生一条藏獒连续咬伤13人的突发事件,经铜川市卫计局、市疾病预防控制中心、新区卫生局、农业、公安部门及正阳路街道办事处等部门的合作,进行了妥善处理,现将情况报道如下。2016年1月8日早上6:00~7:00,陕西省铜川市一只成年藏獒沿着长虹路由南向北流窜至袁家村附近,先后共咬伤13人。随后该藏獒被正阳路派

    2017年03期 v.30 335-336页 [查看摘要][在线阅读][下载 62K]
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消息

  • 欢迎光临2017第五届上海国际生物发酵产品与技术装备展览会

    <正>由中国生物发酵产业协会主办、上海信世展览服务有限公司承办的2017第五届上海国际生物发酵产品与技术装备展览会(BIO CHINA),将于2017年10月25~27日在上海新国际博览中心举行。BIO CHINA已成为全球发酵行业年度盛会,业界有识之士汇聚一堂,新观点新思想荟萃一处,为生物发酵行业和相关行业搭建了一个技术交流、促进合作、扩大上下游贸易、提高品牌和企业知名度的平台。届时将邀请食品、饮料、医药、饲料、生物发酵、糖果、酿

    2017年03期 v.30 228页 [查看摘要][在线阅读][下载 38K]
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  • 欢迎参加BioCon China 2017中国国际生物药大会

    <正>BioCon China 2017中国国际生物药大会将于2017年3月24~25日在上海龙之梦大酒店盛大召开。大会由第四届中国国际生类似药论坛(主办方:BMAP;协办方:上海复宏汉霖生物技术有限公司)和第三届生物药物创新及研发国际研讨会(主办方:细胞工程及抗体药物教育部工程研究中心、上

    2017年03期 v.30 253页 [查看摘要][在线阅读][下载 38K]
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  • 征稿

    <正>《中国生物制品学杂志》为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的生物制品专业学术期刊。由国家卫生部主管,中华预防医学会和长春生物制品研究所有限责任公司主办,是中华预防医学会系列杂志之一,月刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等

    2017年03期 v.30 263页 [查看摘要][在线阅读][下载 41K]
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  • 《中国生物制品学杂志》移动版上线了

    <正>为深度推进《中国生物制品学杂志》数字化转型,使期刊的资源得到广泛传播和利用,本刊已入北京世纪超星信息技术发展有限责任公司的移动"域出版"平台,旨在更好地为业内同仁提供快捷的学习方式。扫描二维码,下载"超星学习通",点击"移动图书馆→期刊",输入"中国生物制品学杂志"即可浏览,敬请关注指导。

    2017年03期 v.30 270页 [查看摘要][在线阅读][下载 35K]
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技术方法

  • 风疹单次病毒收获液生产工艺的改进

    公殿力;苍天乐;林新旭;郑仲;解通;

    <正>风疹单次病毒收获液的生产采用人二倍体细胞MRC-5株进行病毒培养,但经MRC-5细胞培养及扩增较困难,使用10 L转瓶培养不易培养致密的单层细胞,生产的单次病毒收获液病毒滴度较低。改用5 L转瓶培养,既可培养致密的单层细胞,又可提高单次病毒收获液病毒滴度和单位产量。现将结果报道如下。取26代MRC-5细胞,复苏后接种至500 ml培养瓶培养,

    2017年03期 v.30 306页 [查看摘要][在线阅读][下载 37K]
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