中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

基础研究

  • HCV 2a J6JFH细胞感染模型的建立及初步应用

    任浩;王永智;赵平;刘媛;戚中田;

    目的建立能够自主复制的丙型肝炎病毒(HCV)体外细胞感染模型。方法制备HCV2a FL-J6JFH和阴性对照FL-J6JFH(GND)RNA转录体,分别转染Huh-7.5细胞,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测细胞内HCV RNA水平,免疫荧光法(IFA)检测细胞内HCV蛋白的表达。以转染细胞上清液感染Na觙ve Huh-7.5细胞,检测HCV感染性病毒颗粒(HCVcc)的产生。将细胞用不同浓度的IFNα处理,观察所建立的细胞感染模型对IFNα的敏感性。结果转染后第5天,FL-J6JFH转染细胞内HCV RNA为1.2×106GE/μg RNA,第9天下降至最低水平,随后上升,于第13天达到最高值6.5×106GE/μg RNA,此后直至第59天,均保持在106GE/μg RNA左右,而FL-J6JFH(GND)转染细胞内HCV RNA则很快消失。FL-J6JFH转染的细胞内始终可以检测到HCV蛋白表达,而对照细胞内均未检测到。从第5天起,各时间点的FL-J6JFH转染细胞均能产生HCVcc。IFNα能够有效抑制HCVcc感染Huh-7.5细胞,并呈剂量依赖性。结论已成功建立了能持续产生HCVcc的HCV2a型体外细胞感染模型,IFNα能抑制FL-J6JFH HCVcc感染细胞中HCV RNA的复制,为研究HCV的结构与功能提供了实验平台。

    2009年01期 v.22 1-5+9页 [查看摘要][在线阅读][下载 664K]
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  • 人NIRF基因真核表达质粒的构建及其蛋白产物的生物信息学分析

    常蕾;钱冠华;段昌柱;

    目的克隆人NIRF基因,构建其真核表达质粒,并运用生物信息学方法对NIRF蛋白进行分析。方法应用RT-PCR技术,从HeLa细胞中扩增NIRF基因,插入到真核表达载体pcDNA3.1-Flag中,双酶切鉴定并测序。在NCBI蛋白质结构数据库中寻找与NIRF具有较高同源性的1WY8和1Z6U,并利用Insight II结构生物信息学分析软件分析NIRF蛋白的结构和功能。结果扩增出约2400bp的人NIRF全长cDNA;重组真核表达质粒pcDNA3.1-Flag-NIRF酶切后,可见约2400bp的目的片段;测序结果表明NIRF全长cDNA与GenBank中NIRF序列完全一致。1WY8片段有3个赖氨酸残基,主要位于蛋白空间构象的表面;1Z6U片段含有Ring finger结构域,具有ligase活性。结论已成功克隆了人NIRF基因全长cDNA,构建了其真核表达质粒,并利用生物信息学方法,初步分析了NIRF蛋白泛素化作用的机理。

    2009年01期 v.22 6-9页 [查看摘要][在线阅读][下载 790K]
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  • 3株新城疫病毒体外对人喉癌Hep-2细胞杀伤效应的比较

    姜艳华;樊晓晖;黄川;宋德志;高灵茜;杨哲;黄企光;赖振屏;罗金莲;

    目的比较新城疫病毒(NDV)强毒株D817、弱毒株7793和La Sota疫苗株对人喉癌Hep-2细胞的杀伤效应。方法3株病毒经扩增、噬斑纯化后,分别感染Hep-2细胞和喉正常组织细胞,一定时间后,显微镜下观察细胞形态变化,MTT比色法检测病毒对细胞的杀伤效应。结果3株病毒均能在Hep-2细胞中增殖并杀伤细胞,杀伤效应以D817株最高,La Sota株其次,7793株最低,且差异均无统计学意义。杀伤效应与病毒剂量和作用时间呈正相关,显微镜下可见明显的细胞病变。而对喉正常组织细胞的杀伤效应不明显。结论NDV D817株和7793株对喉癌细胞的杀伤效应与La Sota疫苗株相似,而对喉正常组织细胞的杀伤效应不明显,有望成为喉癌生物学治疗新的候选病毒株。

    2009年01期 v.22 10-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 284K]
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  • 激活素A对L929细胞活性的调节作用

    霍德胜;杨煜;王轶楠;张宸豪;刘海岩;柳忠辉;

    目的探讨激活素A对小鼠纤维母细胞L929活性的调节作用。方法用不同剂量的激活素A刺激L929细胞,应用还原酶法分析细胞分泌一氧化氮(NO)的水平,RT-PCR法检测细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、纤维连接蛋白(FN)和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)mRNA的表达,应用中性红检测细胞的吞饮活性,MTT法检测细胞的增殖活性。结果L929细胞经激活素A刺激后,与对照组细胞比较,分泌NO的水平明显升高,iNOS mRNA及FN mRNA的表达水平也升高,而TIMP mRNA的表达水平无明显改变。激活素A可以促进L929细胞的吞饮活性,但对L929细胞的增殖活性无影响。结论激活素A具有促进L929细胞分泌炎性介质和形成细胞外基质的作用,这可能是其促进炎症发展、诱导组织纤维化的原因。

    2009年01期 v.22 14-17页 [查看摘要][在线阅读][下载 520K]
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  • 幽门螺杆菌hp1188基因的克隆及高效表达

    韩飞;杨致邦;郭丽媛;范贵荣;向瑜;

    目的克隆并表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)hp1188基因,为研究幽门螺杆菌的黏附机制奠定基础。方法用PCR法从H.pylori标准株NCTC11637基因组DNA中扩增hp1188基因,克隆入原核表达载体pQE-30,构建重组原核表达质粒pQE30-hp1188,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表达形式和表达量。表达蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化,Western blot鉴定其反应原性。结果所构建的重组表达质粒pQE30-hp1188序列完整,插入的基因片段全长810bp,与GenBank中的hp1188基因同源性达98%。表达的重组蛋白相对分子质量约为30600,以1.0mmol/L IPTG诱导4h,表达量最高,破菌上清和沉淀中均有表达,可溶性蛋白表达量占全菌总蛋白的47%。重组蛋白纯化后纯度可达90%,并可被H.pylori患者血清识别。结论已成功克隆了H.pylori hp1188基因,并在大肠杆菌DH5α中获得高效表达。

    2009年01期 v.22 18-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 1013K]
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  • α-2,6唾液酸转移酶在BHK细胞中的表达

    侯小强;高玉伟;孙培录;夏咸柱;杨松涛;

    目的在BHK细胞中表达α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gal1),为其相关研究奠定基础。方法提取人肝癌HepG2细胞总RNA,经RT-PCR扩增α-2,6唾液酸转移酶的cDNA,克隆入载体pMD18-T中,测序后将目的基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-ST6Gal1,并转染BHK细胞,免疫荧光法检测α-2,6唾液酸转移酶的表达。结果克隆的α-2,6唾液酸转移酶基因与GenBank中报道的已知序列完全一致,重组真核表达质粒转染的BHK细胞表面SAα2,6Gal含量增加。结论α-2,6唾液酸转移酶在BHK细胞中获得了有效表达,为流感病毒受体的研究提供了技术支持。

    2009年01期 v.22 22-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 364K]
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  • 小鼠H-2~q型基因与重组乙型肝炎疫苗免疫应答的相关性

    钟熙;马丽颖;刘双环;贺争鸣;梁争论;李河民;

    目的分析小鼠DNA中H-2q型基因及其与重组酿酒酵母、CHO、汉逊酵母乙肝疫苗免疫应答的相关性。方法重组酿酒酵母、CHO、汉逊酵母乙肝疫苗免疫近交系BALB/c、DBA/1和封闭群NIH小鼠,4周后取血、脾脏和尾,分别采用PCR法和微量细胞毒法检测小鼠H-2q单倍型基因,ELISA法检测小鼠ED50,并分析H-2q型基因概率与ED50的相关性。结果DBA/1小鼠H-2q型基因概率100%,BALB/c小鼠H-2d型基因概率100%。NIH小鼠H-2q型基因概率分别为96%、56%,42%和30%。随着H-2q型基因概率的升高,免疫应答敏感性递增。结论H-2q型基因对重组乙肝疫苗免疫应答敏感,敏感程度与H-2q型基因概率密切相关。

    2009年01期 v.22 25-26+30页 [查看摘要][在线阅读][下载 140K]
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  • 生物素-亲和素-DNA纳米颗粒信号放大检测载体的构建

    王海河;赵春燕;李凡;

    目的构建用于检测细菌、病毒等病原体DNA的生物素-亲和素纳米颗粒信号放大载体。方法设计并合成两端和一端标记生物素的寡核苷酸探针(2B/1B-DNA),与抗生蛋白链菌素葡聚糖(Poly-STV)通过生物素与亲和素作用,偶联形成大分子纳米网状颗粒,并筛选最佳探针类型及其长度、2B-DNA和Poly-STV的浓度及比例和反应条件。结果2B-DNA和Poly-STV形成纳米颗粒信号放大载体的最佳浓度分别为1μmol/L和5μmol/L,最佳浓度比为1∶5,2B-DNA长度为60bp,缓冲液为Buffer B,反应条件为55℃,800r/min,20min。结论已成功构建了生物素-亲和素大分子纳米颗粒,可作为DNA检测信号放大技术的备选载体。

    2009年01期 v.22 27-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 592K]
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  • B型肉毒神经毒素重链C-端片段的修饰及表达

    林琳;林卫;毛晓艳;王棣;

    目的修饰、克隆B型肉毒神经毒素重链C-端(BoNT/b HC)片段,并在大肠杆菌中进行表达。方法以B型肉毒梭状杆菌8806株基因组DNA为模板,PCR扩增B型肉毒神经毒素重链的转膜区和结合区,并以高频密码子替换BoNT/bHC基因N-端的5个低频密码子。将目的片段克隆入表达载体pET-42b,转化E.coli BL21(DE3)PlysS,IPTG诱导表达后,进行Western blot鉴定及可溶性分析。结果重组表达质粒经PCR及酶切鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为80000,表达量占菌体总蛋白的32.6%,主要以包涵体形式存在;重组蛋白可被相应的抗BoNT/b全毒素的多克隆抗体所识别。结论已成功修饰并表达了B型肉毒神经毒素重链C-端片段,为进一步研制重组疫苗及高特异性的诊断试剂奠定了基础。

    2009年01期 v.22 31-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 837K]
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消息

  • 征稿

    <正>《中国生物制品学杂志》为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。由国家卫生部主管,中华预防医学会和中国生物技术集团公司长春生物制品研究所主办,是中华预防医学会系列杂志之一,月刊。

    2009年01期 v.22 34页 [查看摘要][在线阅读][下载 360K]
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基础研究

  • 长春地区丙型肝炎病毒的基因分型及其与肝脏疾病的相关性

    谢风;师庆红;王晶莹;

    目的分析长春地区丙型肝炎病毒(HCV)基因型的分布及其与HCV RNA含量、感染途径、肝病程度的相关性。方法采用荧光定量PCR和型特异性引物PCR对82份抗-HCV阳性病人的血清标本进行HCV RNA检测及HCV的基因分型,并分析基因型与感染途径、HCV RNA含量和肝病程度的相关性。结果78份HCV RNA阳性血清标本中1a型占5.1%、1b型占48.7%、2a型占33.3%、2b型占11.6%、3a型占1.3%,未发现混合型。血源性与非血源性感染患者间HCV基因型构成比差异无统计学意义。基因1b型的HCV RNA含量高于2a型,且差异有统计学意义。HCV感染的不同程度肝病患者的基因型分布差异有统计学意义,基因1b型比率显著高于其他基因型。结论长春地区丙型肝炎病毒基因型流行株为1b和2a型;HCV基因型与感染途径无明显相关性;基因lb型的病毒含量明显高于2a型;HCV基因型与慢性丙型肝炎的严重程度及肝硬化、肝癌的产生有一定的相关性。

    2009年01期 v.22 35-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 184K]
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  • 金黄葡萄球菌ClfA活性基因的克隆及原核表达

    尹荣兰;张乃生;张艳晶;杨正涛;刘辉;杨琦;刘珊;

    目的克隆金黄葡萄球菌表面蛋白凝集因子A(ClfA)活性基因,并进行原核表达。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增ClfA(221-550)活性基因,克隆入载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-ClfA(221-550),转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果PCR扩增出987bp的目的基因片段,重组表达质粒经双酶切证明构建正确。表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约36000处可见目的条带,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的36.76%,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了金黄葡萄球菌ClfA活性基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了目的蛋白。

    2009年01期 v.22 38-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 1181K]
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  • 小鼠sIL-13Rα2基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

    蔡累;宋爱玲;岳燕;王伟华;秦鑫;张英起;李志奎;

    目的克隆并在毕赤酵母中表达小鼠sIL-13Rα2基因。方法提取小鼠脾脏细胞总RNA,逆转录为cDNA,应用分段PCR的方法将sIL-13Rα2基因定向克隆至酵母表达质粒pPICZα-A,并转染至毕赤酵母GS115(his4)菌株,进行目的蛋白的诱导表达。表达的蛋白经SDS-PAGE和Western blot,进行分析。结果重组表达质粒pPICZα-A/sIL-13Rα2经酶切鉴定,表明目的基因为正向插入。重组酵母菌的PCR鉴定结果显示,目的基因片段已插入酵母染色体中。目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的30%,每升发酵液约含2mg重组蛋白。重组蛋白可与兔抗小鼠sIL-13Rα2单抗发生特异性反应。结论已成功克隆并在毕赤酵母中表达了小鼠sIL-13Rα2基因,为应用sIL-13Rα2蛋白治疗哮喘及其他过敏性疾病奠定了基础。

    2009年01期 v.22 41-44页 [查看摘要][在线阅读][下载 732K]
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  • 丙型肝炎病毒全基因重组质粒的构建及其转染细胞系的建立

    张丽颖;赵志辉;扈荣良;

    目的构建丙型肝炎病毒(HCV)全基因重组质粒,并建立其转染细胞系。方法双酶切质粒JFH1,回收HCVDNA,分别与真核表达载体pIRESneo和逆转录病毒载体pLNCX连接,构建重组质粒pIRESneo-HCV和pLNCX-HCV。将重组质粒pIRESneo-HCV转染BHK细胞,pLNCX-HCV转染pA317细胞,通过PCR、间接ELISA和免疫荧光试验鉴定转染细胞。结果重组质粒PCR和酶切鉴定证明构建正确。转染细胞上清经PCR检测均可见目的基因条带;ELISA结果表明,转染细胞冻融上清均可与抗HCV小鼠血清发生强的结合反应;转染细胞均可与抗HCV小鼠血清反应,产生荧光,但荧光不多且斑点不亮。结论已成功构建HCV全基因重组质粒,并建立了可表达HCV蛋白的转染细胞系,为转基因动物模型的建立奠定了基础。

    2009年01期 v.22 45-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 614K]
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  • 表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株的建立

    于海鹏;刘丹;薛雁;任琦;李娟;富锐丽;李铮;姚为民;盛军;

    目的建立表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株。方法采用PCR方法分别扩增HBsAg及rhIFNα2b基因,以GS linker连接后,克隆入表达质粒pBI121,构建植物细胞表达质粒pBISI,转化农杆菌LBA4404,感染人参愈伤组织细胞。经G418筛选抗性细胞株,提取细胞基因组DNA,进行PCR检测;应用ELISA法检测HBsAg及rhIFNα2b的表达;通过Western blot分析表达蛋白的反应原性。结果重组表达质粒pBISI经酶切鉴定,表明构建正确。筛选得到3株正常生长的人参细胞株,基因组DNA扩增得到约1200bp的融合基因片段;经ELISA检测,其中1株能够表达HBsAg及rhIFNα2b;表达的蛋白与鼠抗HBsAg血清在相对分子质量35000处出现特异条带。结论已获得了表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株。

    2009年01期 v.22 49-51+55页 [查看摘要][在线阅读][下载 446K]
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  • 人核迁移蛋白C与血小板生成素受体MPL的结合作用

    刘乐承;朱贵才;张俊杰;

    目的研究人核迁移蛋白C(hNUDC)与血小板生成素受体MPL的结合作用。方法采用PCR技术,分别从人胚胎干细胞和pLexA-MPL-EC质粒中扩增hNUDC和MPL-EC基因,再分别克隆至pET-28b(+)和pMAL-c2表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达hNUDC和MPL-EC蛋白。纯化后,通过MBP pull-down试验检测二者的结合作用。结果表达的融合蛋白His-hNUDC和pMAL-MPL-EC表达量分别约占菌体总蛋白的25%和30%,蛋白回收率分别可达90%和80%,纯化后的蛋白纯度分别在95%和90%以上,且均具有良好的反应原性。His-hNUDC蛋白可与MBP-MPL-EC蛋白共洗脱,二者存在结合作用。结论hNUDC蛋白可与MPL蛋白结合,可能为MPL的一种新配体。

    2009年01期 v.22 52-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 1049K]
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预防制品

  • 乙肝乙脑麻疹多表位噬菌体微球疫苗的体液免疫应答

    兰芸;胡凝珠;胡云章;程玉兴;瞿素;徐军;舒晓明;

    目的探讨乙肝乙脑麻疹多表位噬菌体微球疫苗的体液免疫应答效果。方法用壳聚糖制备乙肝乙脑麻疹多表位噬菌体微球疫苗,经腹腔、皮下和鼻腔3种途径免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清特异性IgG抗体水平。结果3种途径免疫的小鼠均能产生针对各表位的特异性IgG抗体,鼻腔免疫效果最好;多表位噬菌体微球疫苗的抗体水平明显高于多表位噬菌体疫苗。结论壳聚糖微球疫苗投递系统可以提高多表位噬菌体疫苗的体液免疫效果。鼻腔免疫是多表位噬菌体微球疫苗的最佳免疫途径。

    2009年01期 v.22 56-58页 [查看摘要][在线阅读][下载 198K]
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  • 聚乙烯吡咯烷酮稳定剂风疹减毒活疫苗的研制

    公殿力;张玉颖;单宝龙;王爽;王坚;赵凤颖;娄世杰;孙继红;邵美晶;张红权;梁晓云;

    目的研制安全有效的不含人血白蛋白稳定剂的风疹减毒活疫苗。方法将风疹减毒活疫苗毒种RA27/3株按适当比例接种单层人二倍体细胞MRC-5株,使用无血清、无蛋白的CDM培养基培养病毒,收获病毒液,加入聚乙烯吡咯烷酮作为病毒稳定剂,制备疫苗原液,加入冻干保护剂,制备5批冻干疫苗,进行各项检定。另取1批原液样品,分别加入聚乙烯吡咯烷酮和人血白蛋白作为病毒稳定剂,制成疫苗,进行各项检测。结果5批疫苗各项指标均符合《中国药典》三部(2005版)要求。同1批原液制备的聚乙烯吡咯烷酮与人血白蛋白稳定剂疫苗的病毒滴度和热稳定性无明显差异。37℃放置6周,两种稳定剂疫苗的病毒滴度均为3.63LgCCID50/ml。结论聚乙烯吡咯烷酮稳定剂风疹减毒活疫苗质量符合《中国药典》三部(2005版)的要求。

    2009年01期 v.22 59-60页 [查看摘要][在线阅读][下载 83K]
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治疗制品

  • 双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞生长及Survivin表达的影响

    李庆春;高小玲;石之虎;邹聪;罗子国;

    目的观察双氢青蒿素(DHA)对前列腺癌PC-3细胞生长及Survivin表达的影响,并探讨其作用机制。方法PC-3细胞经不同浓度的DHA处理后,MTT法检测细胞增殖抑制率;将PC-3细胞注入裸鼠右侧腋窝下,建立裸鼠种植瘤模型,将20只模型鼠随机分为空白对照组、DMSO对照组、DHA高剂量组(200μmol/kg体重)和低剂量组(100μmol/kg体重),经13d干预后,计算抑瘤率;光镜及电镜观察肿瘤组织形态学改变,免疫组织化学法检测Survivin的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果DHA可显著抑制PC-3细胞的增殖,并具有时间、浓度依赖性;DHA对裸鼠种植瘤生长具有明显的抑制作用,抑瘤率达60%以上;光镜及电镜观察到DHA两剂量组肿瘤组织中散在凋亡细胞及凋亡小体;DHA两剂量组细胞Survivin表达减弱,凋亡率明显升高。结论DHA可明显抑制PC-3细胞生长,其机制与下调Survivin的表达并诱导肿瘤细胞凋亡有关。

    2009年01期 v.22 61-64页 [查看摘要][在线阅读][下载 408K]
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  • 川芎嗪对肝星状细胞增殖及结缔组织生长因子表达的影响

    王文丽;李孝生;陈爽;

    目的探讨川芎嗪(TMP)对肝星状细胞HSC-T6增殖及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法不同剂量的TMP作用于HSC-T6细胞不同时间后,MTT法检测细胞的增殖;ELISA法检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原和透明质酸(HA)的合成;West-ern blot法测定CTGF的表达。结果100~1000mg/L的TMP作用于HSC-T6细胞后,细胞的增殖明显受到抑制,且呈剂量依赖性;Ⅰ型、Ⅲ型胶原和HA的合成减少,CTGF的表达也减少,二者下降程度呈正相关(r分别为0.727、0.643和0.769)。结论TMP能够有效抑制肝纤维化形成,其可能的机制为抑制HSC增殖并降低CTGF的表达,从而阻断细胞内基质的形成。

    2009年01期 v.22 65-68+77页 [查看摘要][在线阅读][下载 280K]
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诊断制品

  • 不同HIV抗体检测试剂检测抗HIV-1膜蛋白抗体的敏感性

    李秀华;许四宏;宋爱京;王佑春;

    目的分析不同HIV抗体检测试剂检测HIV-1B’和BC重组型膜蛋白抗体的敏感性。方法选择HIV-1B’和BC重组型感染者血浆,用gp41抗原和gp160抗原分别进行亲和层析纯化。将各纯化产物进行系列稀释,用15种HIV抗体ELISA检测试剂以及3种HIV抗原/抗体联合检测试剂进行检测。结果用gp41抗原纯化后的样品只含有抗gp160和gp41的抗体带型,而用gp160抗原纯化后的样品含有抗gp160、gp120和gp41的抗体带型。进口试剂检测不同基因型样品的敏感性低于大部分国产试剂,国产试剂检测不同基因型的样品的敏感性无明显差异,而进口试剂检测B’亚型抗体的能力低于检测BC重组型抗体的能力。结论不同基因型的抗体对HIV抗体检测试剂的敏感性可能有一定的影响。

    2009年01期 v.22 69-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 253K]
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  • 全氟丙烷人血白蛋白微球注射液的稳定性

    艾智武;盛凤仙;姚佳佳;李晓;

    目的评价全氟丙烷人血白蛋白微球注射液在2~8℃保存的稳定性。方法将3批全氟丙烷人血白蛋白微球注射液放2~8℃保存,于不同时间取样,检测微球浓度、平均粒径、全氟丙烷气体含量、IgG各组分含量及其他各项主要指标。结果3批制品保存30个月,其微球浓度、平均粒径、直径小于10μm的微球百分数和全氟丙烷气体含量均无明显变化,IgG各组分含量及其他各项主要指标均达到《中国药典》三部(2005版)的要求。结论全氟丙烷人血白蛋白微球注射液在2~8℃保存30个月,稳定性良好。

    2009年01期 v.22 72-73页 [查看摘要][在线阅读][下载 94K]
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临床观察

  • 滁州市CDC 2004~2007年预防狂犬病门诊就诊者监测分析

    韩茂昌;许卫年;宋延举;姚红;

    目的对滁州市CDC2004~2007年预防狂犬病门诊就诊者的登记资料及流行病学监测资料进行监测分析。方法采用描述性流行病学方法,对暴露者的登记资料及当地狂犬病流行病学资料进行分析。结果4年间共有12种动物不同程度伤人11024例,其中被犬伤害者由2004年的84.03%降至2007年的65.03%,猫伤由2004年的12.28%上升至2007年的28.12%,其他动物如鼠、兔等肇事呈逐年增多趋势;被动物伤害后常规接种人用狂犬病疫苗,Ⅲ级暴露者加注狂犬病人免疫球蛋白,4年来无免疫失败现象;免疫人群中,年龄最小为出生19d,最大93岁,小于1岁39例,大于80岁78例;接种狂犬病疫苗者中,7支组和6支组阳性率均显著优于5支组;接种狂犬病疫苗联合狂犬病人免疫球蛋白者与单用狂犬病疫苗者相比,无明显自动免疫力滞后现象。结论对狂犬病暴露者彻底清洗、消毒伤口,并全程接种狂犬病疫苗,Ⅲ级暴露者加注狂犬病人免疫球蛋白,可以阻止狂犬病发生。

    2009年01期 v.22 74-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 187K]
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  • 血管内皮生长因子和胎盘生长因子在子痫前期及子痫患者胎盘组织中的表达

    滕红;程春花;邱玲;王改珍;

    目的检测血管内皮生长因子(VEGF)和胎盘生长因子(PLGF)在子痫前期及子痫患者胎盘组织中的表达,探讨两者与子痫前期和子痫的相关性。方法采用亲和免疫细胞化学技术SABC(链霉素-生物素-过氧化物酶复合物技术)对正常妊娠组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组和子痫组(每组各20名孕妇)胎盘组织中的VEGF和PLGF进行检测。结果各组孕妇胎盘组织中的VEGF和PLGF主要分布于滋养叶细胞,其次是蜕膜组织,绒毛血管内皮细胞和部分间质细胞也有表达。轻度和重度子痫前期组胎盘组织中VEGF和PLGF的表达强度明显低于正常妊娠组,重度子痫前期组明显低于轻度子痫前期组,且差异均有统计学意义;子痫组与重度子痫前期组比较,差异无统计学意义。结论VEGF和PLGF在子痫前期及子痫患者胎盘组织中表达的下降可能是其发病的重要因素。

    2009年01期 v.22 78-80页 [查看摘要][在线阅读][下载 395K]
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实验技术

  • 提高内毒素去除效果的质粒DNA层析纯化工艺的优化

    王贻杰;刘勇;程海;范文玲;韩建;霍烛;郝彦玲;邵一鸣;

    目的优化质粒DNA分子筛或离子交换层析工艺,提高内毒素去除效果。方法在经精胺沉淀初步纯化的质粒DNA溶液中,加入不同浓度的EDTA(5、10和20mmol/L)或SDS(0.1%、0.2%和0.5%),分别进行Sephacryl S-1000分子筛层析及Source30Q离子交换层析,收集质粒峰,测定内毒素含量。结果用含0.5%SDS的质粒溶液进行分子筛层析,用含10~20mmol/L EDTA或0.1%~0.5%SDS的质粒溶液进行离子交换层析,质粒DNA的内毒素含量均<5EU/mg。结论添加一定浓度的EDTA或SDS可提高质粒DNA分子筛层析或离子交换层析去除内毒素的效果。综合考虑安全性因素,推荐用含10mmol/L EDTA的质粒溶液进行Source30Q离子交换层析。

    2009年01期 v.22 81-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 339K]
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  • 质粒DNA中宿主菌基因组DNA残留检测方法的比较

    徐向明;张泉;

    目的对检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA含量的Southern blot和Real-time PCR法进行比较。方法PCR扩增宿主菌染色体DNA的16SrRNA片段,以地高辛标记回收的目的片段为探针,对提取的质粒pcDNAH进行Southern blot,同时根据16SrRNA基因序列设计探针,建立Real-time PCR反应体系和标准曲线,分别检测质粒中宿主菌基因组DNA的含量。结果应用Southern blot和Real-time PCR检测质粒pcDNAH中宿主菌基因组DNA的含量,结果均符合WHO相关标准。结论两种检测方法各有优缺点,均可用于检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA的残留,可根据不同情况,采用不同方法或配套使用。

    2009年01期 v.22 85-87页 [查看摘要][在线阅读][下载 357K]
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综述

  • 分子生物学技术在黄病毒属病毒疫苗研制中的应用及该类疫苗的研究进展

    李静;俞永新;

    黄病毒科黄病毒属包括70多种病毒,其中约40多种与人类疾病相关,大部分为虫媒病毒。其中对人类致病的重要病原主要有登革病毒、乙型脑炎病毒、黄热病毒、蜱传脑炎病毒等。分子生物学技术的发展为黄病毒属病毒疫苗的设计带来了新的策略。本文对当前分子生物学技术如感染性克隆技术在黄病毒属病毒疫苗研制中的应用以及嵌合疫苗、蛋白亚单位疫苗和DNA疫苗的研究进展作一综述。

    2009年01期 v.22 88-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 186K]
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  • 从细胞核移植技术到治疗性克隆与去衰老克隆的研究进展

    陈建华;傅文庆;

    从1997年多莉羊诞生后,又相继出现了人类胚胎干细胞系培养技术和器官重建技术,这些技术的发展为治疗性克隆与去衰老克隆的发展提供了可能。本文综述了从细胞核移植技术到治疗性克隆与去衰老克隆的研究进展。

    2009年01期 v.22 94-97页 [查看摘要][在线阅读][下载 130K]
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  • 单链抗体及其医学应用

    乔媛媛;陈宇萍;

    基因工程抗体的研究,使人们可以通过基因重组技术获得各种新型的小分子抗体,其中单链抗体具有相对分子质量低、穿透力强、血中半衰期短、抗原结合特异性强、异原性低、容易基因操作、能在原核细胞中表达、易于大量生产等优点,并且可以用化学偶联或基因工程方法构建成与其他靶分子连接的融合蛋白,有利于药物、毒素、放射性同位素导向治疗,因此具有很大的医学应用价值。本文就单链抗体的研究进展及其医学应用作一综述。

    2009年01期 v.22 98-101页 [查看摘要][在线阅读][下载 133K]
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  • 白细胞介素-10在感染性疾病中的作用

    郎需龙;王兴龙;

    白细胞介素-10是一种具有多种生物学功能的细胞因子,在疾病的治疗及诊断中具有重要的作用。本文对白细胞介素-10的分子结构特点、在感染性疾病中的作用及其临床应用作一综述。

    2009年01期 v.22 102-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K]
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  • 《中国生物制品学杂志》稿约

    <正>《中国生物制品学杂志》为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊,由国家卫生部主管,中华预防医学会和中国生物技术集团公司长春生物制品研究所主办,月刊。1刊载内容和设置栏目本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。优先报道基金项目及

    2009年01期 v.22 105页 [查看摘要][在线阅读][下载 31K]
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