中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

消息

基础研究

  • 耻垢分枝杆菌与卡介苗作为载体在鼠结核病治疗中的作用比较

    杨春;张黎;何永林;徐蕾;李娜;王渝伟;朱道银;

    目的比较耻垢分枝杆菌(MS)与卡介苗(BCG)作为载体在鼠结核病治疗中的作用。方法分别以不同剂量的MS和BCG免疫BALB/c小鼠,观察二者的致病作用。以结核分枝杆菌H37Rv感染BALB/c小鼠4周后,分别用生理盐水、MS、GLS/IL-12、重组MS、BCG及GLS/IL-12重组BCG治疗6次,于第6次治疗后7d处死小鼠,检测肺、脾荷菌量、血清IL-12和IFN-γ水平、脾淋巴细胞IFN-γ和TNF-α的水平及肺、脾组织中颗粒溶素表达,并观察小鼠肺组织病理改变。结果重组MS和重组BCG组器官荷菌量明显低于MS和BCG组;重组MS和重组BCG组血清IL-12和IFN-γ水平明显高于MS和BCG组,MS和BCG组明显高于生理盐水组;重组MS和重组BCG组脾淋巴细胞IFN-γ和TNF-α的水平明显高于其他组;MS与BCG组比较,重组MS与重组BCG比较,荷菌量、病理变化、肺、脾中的IL-12和IFN-γ水平差异均无显著意义;淋巴细胞中的IFN-γ和TNF-α水平,MS与BCG组差异有显著意义,而重组MS与重组BCG组差异无显著意义;重组MS和重组BCG组在肺、脾中均有颗粒溶素表达;MS所致病变比相同剂量BCG轻。结论MS与BCG一样,可将要表达的基因靶向递送到相应的组织,并诱导特异性细胞免疫,同时其在体内的副作用低于BCG,因此可作为良好的有机载体。

    2008年07期 545-548页 [查看摘要][在线阅读][下载 793K]
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  • 前列腺酸性磷酸酶在胃癌中的表达及其体外诱导抗胃癌免疫应答

    王毅;陈玉丙;陈月;周余来;原田守;山田亮;伊东恭悟;

    目的检测前列腺酸性磷酸酶(PAP)在胃癌中的表达水平,探讨PAP作为胃癌主动免疫治疗新靶点的可能性。方法分别用RT-PCR和Western blot方法检测胃癌细胞系中PAP mRNA和PAP蛋白的表达;用免疫组织化学方法检测胃癌组织中PAP的表达。利用PAP表位肽对胃癌患者的PBMCs进行体外诱导,ELISA法检测PAP特异性IFN-γ分泌水平;51Cr释放法检测CTLs的细胞毒活性。结果3种胃癌细胞(MKN-7、MKN-28和MKN-45)表达PAP mRNA,其中MKN-28和MKN-45表达PAP蛋白,胃癌组织中PAP呈阳性表达。从2/4胃癌患者PBMCs中诱导出的PAP多肽特异性CTLs可特异性杀伤HLA-A24+/PAP+的胃癌细胞MKN-45,CTLs的细胞毒活性依赖于CD8+T淋巴细胞。结论PAP有可能成为胃癌特异性免疫治疗的新靶点。

    2008年07期 549-552页 [查看摘要][在线阅读][下载 213K]
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消息

  • 征稿

    <正>《中国生物制品学杂志》为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。由国家卫生部主管,中华预防医学会和中国生物技术集团公司长春生物制品研究所主办,是中华预防医学会系列杂志之一,月刊。

    2008年07期 552页 [查看摘要][在线阅读][下载 15K]
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基础研究

  • 重组人IL-12真核表达载体的基因佐剂功能

    王丽娜;孙运芳;吕锐;于红;曹永献;刘志军;张文卿;

    目的探讨重组人IL-12真核表达载体(pcDNA6-p70)对核酸疫苗(HCMV pp65基因重组腺病毒,Adeno-pp65)的基因佐剂功能。方法pcDNA6-p70与Adeno-pp65共免疫BALB/c小鼠,每2周1次,共4次,同时设立Adeno-pp65对照组及生理盐水对照组。于初次免疫后第6周末尾静脉取血,第9周处死小鼠,分离脾细胞,分别检测细胞内细胞因子水平、CTL杀伤活性、特异性淋巴细胞增生和IFN-γ水平,并观察pcDNA6-p70对小鼠的安全性。结果共免疫组HCMV特异性CD4/IFN-γ、CD8/IFN-γ双标记阳性细胞的百分率均高于Adeno-pp65组及生理盐水对照组,差异均有显著意义;其CTL杀伤活性、HCMV特异性淋巴细胞增生水平及脾淋巴细胞特异性IFN-γ释放水平均高于Adeno-pp65组和生理盐水对照组,差异均有显著意义。pcDNA6-p70肌肉注射昆明小鼠,其体温、体重及一般情况与对照组差异均无显著意义。结论pcDNA6-p70与Adeno-pp65共免疫可提高核酸疫苗的免疫效果,且具有较好的安全性。

    2008年07期 553-556页 [查看摘要][在线阅读][下载 146K]
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  • 结核分枝杆菌H_(37)Rv株Rv0341编码基因iniB的克隆与表达

    吴园;钟敏;王易伟;钟静;胡频频;毛旭虎;

    目的克隆并表达编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因。方法利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增iniB基因,克隆于pET-22b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性。结果克隆并表达了iniB基因,表达的蛋白相对分子质量约43000,诱导2h表达量较高,约为25%。目的蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化后蛋白纯度可达98%以上。经Western blot检测,纯化蛋白与依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)肺结核患者血清呈现强阳性反应,而与非依R菌肺结核患者血清不反应。结论已成功克隆并表达了编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因,表达的重组蛋白具有反应原性及特异性,为依R菌结核病临床血清学快速诊断方法的建立及试剂盒的研发奠定了基础。

    2008年07期 557-559+564页 [查看摘要][在线阅读][下载 129K]
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  • 人纤溶酶原K5基因在毕赤酵母中的表达及其抗肿瘤活性

    袁力勇;刘勇;饶春明;马雁冰;史新昌;王军志;戴长柏;

    目的在毕赤酵母中表达人纤溶酶原K5基因,并检测hK5蛋白的抗肿瘤活性。方法根据酵母遗传密码的偏爱性优化设计hK5基因,构建重组表达质粒p819-8α-hK5,经G418加压筛选和甲醇诱导表达,并对摇瓶发酵条件进行优化。表达的hK5蛋白经纯化后,通过荷H22肿瘤昆明小鼠模型检测其抗肿瘤活性。结果筛选到2株高表达hK5蛋白的转化子,摇瓶表达量超过150mg/L,纯化后的蛋白纯度大于95.0%,并能够显著抑制昆明小鼠H22肿瘤的生长。结论hK5基因能够在毕赤酵母中高效分泌表达,且表达的hK5蛋白具有良好的抗肿瘤活性。

    2008年07期 560-564页 [查看摘要][在线阅读][下载 395K]
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  • 牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体的构建及其在SP2/0细胞中的表达

    宫强;刘思国;

    目的构建牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体,并在SP2/0细胞中表达。方法利用PCR技术和重叠延伸剪接(SOE)技术扩增牛分枝杆菌ag85b、mpb64、esat-6基因和mpb64-ag85b融合基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pcMAE。将该重组质粒体外转染SP2/0细胞,间接免疫荧光法检测目的基因的表达。结果真核表达质粒pcMAE经酶切鉴定及测序,证实构建正确,转染后SP2/0细胞膜上出现均质的蓝绿色荧光。结论已成功构建了牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体,并在SP2/0细胞中获得表达,为进一步研制牛结核病多基因融合DNA疫苗奠定了基础。

    2008年07期 565-567页 [查看摘要][在线阅读][下载 180K]
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  • 牛乳铁蛋白十肽的基因改造、克隆及表达

    姚海燕;韩跃武;张雪燕;谢俊秋;

    目的克隆并表达牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因。方法参照大肠杆菌偏爱密码子,分别针对牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因,设计并合成两个具有相同黏性末端的DNA片段,同时在其基因前后分别加上天冬酰胺和甘氨酸的密码子,构成羟胺裂解位点,通过连接获得其二拷贝基因同向串联体。分别将该串联体克隆至载体pUC18上,经双酶切、PCR及测序鉴定后,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物纯化后,用凝血酶切割及羟胺裂解。结果获得了牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2二拷贝基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出相对分子质量约29000的目的蛋白条带,纯化后的蛋白经凝血酶切割后,相对分子质量约29000的目的蛋白条带消失。结论已成功克隆并表达了牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因,为基因工程抗真菌肽的制备奠定了基础。

    2008年07期 568-571页 [查看摘要][在线阅读][下载 249K]
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  • CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响

    罗萍;顾华;卢雪红;王静;吴曼;

    目的观察CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响。方法将Wistar雄性大鼠随机分为N组(正常对照)、M组(模型对照)、CpG组和GpC组。N组大鼠经尾静脉注射生理盐水2.5ml/(kg·d),其余3组大鼠经尾静脉注射抗-thy1.1单克隆抗体2.5ml/(kg·d),隔日1次,共3次。注射抗-thy1.1单克隆抗体后,隔天,CpG组经尾静脉注射CpG-ODN,300μg/只,GpC组经尾静脉注射GpC-ODN,300μg/只,隔日注射,共3次。各组大鼠分别于用药前和第1针注射后1周测定尿蛋白;用药后第8周留取大鼠24h尿、血清及肾脏组织,检测24h尿蛋白定量、血清白蛋白和肾功;肾脏组织用于肾脏病理检查以及RT-PCR法检测TLR-9mRNA的表达。结果CpG组与M组和GpC组相比,血清白蛋白含量明显降低,且差异有显著意义;M组、CpG组和GpC组在给药后1周均出现尿蛋白,在给药后8周,24h尿蛋白含量明显增多;CpG组与M组相比,TLR-9mRNA在肾脏的表达水平明显增加,且差异有显著意义;GpC组与M组相比,差异无显著意义;光镜下可见CpG组肾组织病理改变明显加重。结论天然CpG-ODN可促进肾小球肾炎病情加重,TLR-9可能在其发生机理中起重要作用。

    2008年07期 572-574页 [查看摘要][在线阅读][下载 315K]
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  • 人巨细胞病毒糖蛋白gB基因重组腺病毒载体的构建及包装

    马超;陈勇;巩莉;郭敏;李萍;蒋琳;

    目的构建携带有人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白gB基因的重组腺病毒载体,并在HEK293细胞中进行包装。方法将gB基因克隆至穿梭质粒Track-CMV,构建重组质粒Track-CMV/gB,亚克隆至转移载体pAD-Easy-1,构建重组质粒pAD-Easy-1/gB,将该重组骨架质粒转染HEK293细胞,利用HEK293细胞产生重组腺病毒。空斑法及PCR法挑选重组病毒,荧光显微镜观察标志蛋白(绿色荧光蛋白)的表达,利用噬斑法检测病毒滴度。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确,转染重组腺病毒载体的HEK293细胞经PCR扩增,可见约700bp的目的基因片段,荧光显微镜观察可见绿色荧光蛋白表达,空斑试验检测病毒滴度为2×106PFU/ml。结论已成功构建了含有gB基因的重组腺病毒载体,为进一步研制重组腺病毒载体HCMV疫苗提供了条件。

    2008年07期 575-578页 [查看摘要][在线阅读][下载 340K]
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消息

基础研究

  • HIV-1 Vif与ElonginC蛋白在大肠杆菌中的共表达

    朱可彤;王小丹;杜娟;郭博;孔维;于湘晖;

    目的在大肠杆菌中共表达HIV-1Vif与ElonginC蛋白。方法PCR扩增ElonginC基因全长DNA片段,克隆入pMDT-easy载体,经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切后,与质粒pRSETB连接,构建质粒pRSETB-ElonginC。将质粒pMRI-Vif转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株,再将此菌株制备成感受态细胞,用pRSETB-ElonginC质粒转化该细胞,经1mmol/L IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果质粒pRSETB-ElonginC经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切,可切出约3000和400bp的2条片段,测序证明质粒构建正确。在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白,该蛋白具有良好的抗原特异性。结论在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白。

    2008年07期 579-580+583页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K]
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  • 人Bik基因的克隆、表达与纯化

    李晶华;何侃;佟立全;李杨;高畅;孔维;金英花;

    目的克隆人Bik基因,并进行表达及纯化。方法用PCR方法从HeLa细胞cDNA文库中扩增Bik基因,克隆至pGEX-6P-1表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物进行GST亲和层析纯化。结果PCR扩增得到483bp的DNA片段,重组质粒pGEX-6p-1-Bik经酶切鉴定和测序分析,表明构建正确。表达的重组蛋白占菌体总蛋白的38%,纯化后蛋白纯度达96%。结论已成功克隆并利用原核表达系统表达了人Bik基因,为进一步研究Bik蛋白结构和功能奠定了基础。

    2008年07期 581-583页 [查看摘要][在线阅读][下载 92K]
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  • 人巨细胞病毒pp65基因片段的原核表达及鉴定

    宋玉靖;樊卫平;王宏伟;张帆;范国权;

    目的构建人巨细胞病毒(HCMV)pp65基因片段(363~505位氨基酸)的原核表达质粒,并鉴定所表达蛋白的反应原性。方法以含有HCMVpp65全长基因的pGEM-T-pp65质粒为模板,PCR扩增pp65基因第1087~1515位核苷酸片段,酶切后插入pET-21a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)。经IPTG诱导表达,纯化后进行Western blot鉴定。结果酶切分析和测序证明原核表达质粒pET-21a(+)-pp65构建正确。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,以1.0mmol/L IPTG诱导5h,目的蛋白的表达量最高。纯化后的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功构建了HCMV pp65基因片段原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了融合蛋白。

    2008年07期 584-587页 [查看摘要][在线阅读][下载 250K]
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消息

  • 《实用药品正异名词典》(2007年版)征订启事

    <正>为方便临床医生合理选用药物,以及便于医药科研、经营工作者学习与掌握有关药物知识,同时顺应国家食品药品监督管理局逐步加强对药品说明书的规范和管理形势,我们在工作实践中收集

    2008年07期 587页 [查看摘要][在线阅读][下载 13K]
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基础研究

  • 血管内皮生长因子反义基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌细胞的生长抑制作用

    李国栋;房学东;陈学博;宋燕;刘力华;段秀梅;谭岩;

    目的构建反义血管内皮生长因子(VEGF165)基因真核表达载体,分析该基因对乳腺癌细胞的生长抑制作用。方法将人VEGF165cDNA反向克隆至pcDNA3真核表达载体中,构建VEGF165反义基因的真核表达载体,转染人乳腺癌细胞MCF-7,观察转染前后MCF-7细胞的VEGF165表达及细胞生长周期。结果所构建的VEGF165反义基因真核表达载体转染MCF-7细胞后,VEGF165表达下降,细胞生存率下降,G1期细胞数量增加,S期细胞数量减少,细胞增殖能力降低。结论成功构建了VEGF165反义基因表达载体,该基因对乳腺癌细胞的生长具有明显的抑制作用。

    2008年07期 588-590页 [查看摘要][在线阅读][下载 272K]
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预防制品

  • A群脑膜炎球菌多糖-重组蛋白Pep10结合物的制备及其免疫原性

    刘汉平;薛红刚;方志正;

    目的制备A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)-重组蛋白Pep10结合物,并检测其免疫原性,探讨重组蛋白Pep10作为一种候选载体蛋白的可行性。方法GAMP经溴化氰(CNBr)活化后,共价接合己二酰肼(ADH)手臂,在碳二亚胺(EDAC)催化下与重组蛋白Pep10偶联,制备结合物GAMP-ADH-Pep10。纯化后免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测小鼠血清中抗GAMP IgG抗体水平,并分析载体诱导的免疫抑制率。结果所制备的多糖衍生物GAMP-ADH及多糖-蛋白结合物GAMP-ADH-Pep10均具有GAMP抗原特异活性,免疫小鼠后可诱生比多糖单独免疫更高水平的GAMP血清IgG抗体,且接近GAMP-ADH-TT疫苗诱生的抗体水平,并能形成免疫记忆。重组蛋白Pep10诱导的免疫抑制率远低于TT诱导的免疫抑制率。结论制备的重组蛋白Pep10与A群脑膜炎球菌多糖偶联能发挥较强的载体效应,为研究理想载体蛋白提供了新的思路。

    2008年07期 591-594页 [查看摘要][在线阅读][下载 247K]
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  • 国内甲型副伤寒沙门菌疫苗株的16S rRNA基因序列分析

    么山山;王薇;计国欣;梁昊宇;王斌;曾明;

    目的对我国4株用于或拟用于疫苗生产的甲型副伤寒沙门菌的16S rRNA基因进行序列分析,考察其保守性和差异。方法提取4株菌基因组DNA,以16S rDNA通用引物进行PCR扩增,并对产物进行克隆及测序。结果4株菌均可扩增出约1500bp的目的基因片段,测序结果表明,4株菌中16S rDNA核苷酸序列一致性达99.77%。结论选择保守性高的16S rDNA区段进行序列测定,以防止种子批的变异,便于对疫苗生产用种子进行质量控制。

    2008年07期 595-597页 [查看摘要][在线阅读][下载 78K]
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治疗制品

  • IL-17对髓鞘碱性蛋白诱导鼻黏膜免疫耐受治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响

    邓晓波;孙博;孔庆飞;张瑶;王菁华;靳轶敏;王秀云;李呼伦;王广友;

    目的探讨IL-17对髓鞘碱性蛋白(MBP)68-86诱导鼻黏膜免疫耐受治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的影响。方法将大鼠分为5组,分别经鼻黏膜滴注PBS、MBP68-86、MBP68-86+IL-17(0.01μg/d)、MBP68-86+IL-17(0.05μg/d)和MBP68-86+IL-17(0.1μg/d)诱导其发生免疫耐受,并在此基础上建立EAE动物模型,观察各组大鼠发病情况;通过3H掺入试验检测特异性抗原MBP68-86多肽诱导T淋巴细胞增殖活性;HE染色观察脊髓淋巴细胞浸润情况,免疫组化方法检测脊髓中单位面积IL-17+细胞数。结果PBS组和IL-170.1μg/d组与MBP组相比,大鼠免疫后出现进食减少、体重减轻、尾瘫、后肢瘫痪等临床症状,IL-170.01μg/d组和0.05μg/d组大鼠临床症状较轻或无症状。淋巴细胞增殖试验结果显示,PBS组和IL-170.1μg/d组与MBP组相比,特异性淋巴细胞增殖反应显著增高,IL-170.01μg/d组和0.05μg/d组与MBP组相比,差异无显著意义,与IL-170.1μg/d组相比差异有显著意义;PBS组、IL-170.1μg/d组与MBP组、IL-170.01μg/d组和0.05μg/d组相比,脊髓切片中淋巴细胞浸润面积较大且细胞数量较多,IL-17+细胞数也显著增多。结论MBP68-86特异性肽段可诱导EAE免疫耐受的形成,预防EAE的发生;鼻黏膜给予IL-17可以打破MBP诱导的特异性免疫耐受,且存在剂量依赖性。

    2008年07期 598-601页 [查看摘要][在线阅读][下载 672K]
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  • 外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子凝胶与注射用重组人生长激素联合应用对实验性烫伤动物的疗效

    裴瑾;姜晶;赵丽娟;赵立欣;王班;金磊;

    目的观察外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)凝胶与注射用重组人生长激素(rhGH)联合应用对实验性烫伤动物的疗效。方法将脱毛的Wistar大鼠背部皮肤浸入(85±1)℃恒温水浴中持续15s,造成深Ⅱ度烫伤。大鼠烫伤部位分别涂抹外用rhGM-CSF凝胶、易孚凝胶、美宝湿润烧伤膏、磺胺嘧啶银、医用凡士林膏,金因肽组用金因肽喷湿创面,rhGH组和GM+GH组在烫伤后24h开始皮下注射rhGH。各组每天给药1次,连续用药25d。每5d用透明硫酸纸描绘烫伤皮肤面积,并称重,计算烫伤皮肤愈合率;烫伤后6h、9d和25d,各组随机选取3只大鼠,对其烫伤创面进行病理学检查。结果从给药第10天开始,各给药组大鼠烫伤皮肤愈合率均比模型组明显提高;以GM+GH组最高。病理学观察显示,烫伤后25d,各给药组大鼠绝大多数创面表皮细胞增生明显,真皮层可见毛囊、皮脂腺腺体修复,GM+GH组炎细胞浸润不明显,模型组多见化脓性炎症改变,并见脓肿灶形成。结论各给药组均可减轻烫伤后炎症反应,促进烫伤皮肤愈合,对深Ⅱ度烫伤大鼠皮肤有明显治疗作用,其中以外用rhGM-CSF凝胶联合应用rhGH的治疗效果最好。

    2008年07期 602-604页 [查看摘要][在线阅读][下载 273K]
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  • 可溶性重组人成骨蛋白-1的制备

    王素红;韩金祥;王世立;张翠;葛鲁娜;丁宁;

    目的制备可溶性重组人成骨蛋白-1(rhOP-1),并尝试制备注射制剂。方法rhOP-1工程菌经发酵表达,收集菌体,提取包涵体,用SP-FF阳离子层析柱纯化。取纯度达95%以上的rhOP-1蛋白,透析复性,加入L-精氨酸作为复性助溶剂,制备成冻干粉末,以不加助溶剂的rhOP-1为对照。将制备的冻干粉末复溶后,观察rhOP-1溶解性,并检测其活性。结果复性液中加入L-精氨酸的复性rhOP-1蛋白浓度为0.5mg/ml,回收率可达60%,冻干粉末复溶后,溶解性及rhOP-1活性良好。结论用此复性方法制备的rhOP-1溶液作为注射剂,有较好的应用前景。

    2008年07期 605-607页 [查看摘要][在线阅读][下载 511K]
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消息

  • 《中国药学大辞典》(2008年版)征订启事

    <正>《中国药学大辞典》收集词汇近26000条,涉及药用动物、植物、矿物、中药和方剂、药用化学物质、化学药物、药剂学、药物化学、中药学和生药学、微生物药学、生物药学、药物分析、药理学和毒理学、医院药学、临床药学、药学史、药事管理、信息科学、药学相关学科和专业、技术和设备、教育学名词等方面内容。定价352元。

    2008年07期 607页 [查看摘要][在线阅读][下载 275K]
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治疗制品

  • 重组人骨形成蛋白-2的质量控制

    史新昌;韩春梅;李响;刘兰;丁有学;饶春明;

    目的建立重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)质控方法和质量标准。方法以小鼠体内异位成骨试验测定rhBMP-2的生物学活性,HPLC-SEC法测定纯度,蛋白N-末端测序仪测定N-末端15个氨基酸残基序列,其余检测项目按《中国药典》三部(2005版)规定进行。结果1批rhBMP-2原液鉴定结果显示,样品比活性为5.9×104BU/mg,纯度为97.6%,N-末端序列为(MKR)LKSSCKRHPLYV,其余项目检测结果均符合《中国药典》三部(2005版)的要求。结论该质控标准可用于rhBMP-2产品的常规检定。

    2008年07期 608-610页 [查看摘要][在线阅读][下载 75K]
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消息

  • 欢迎订阅《中国生物制品学杂志》

    <正>《中国生物制品学杂志》于1988年创刊,由中华人民共和国卫生部主管,系中华预防医学会系列杂志之一,为报道我国生物制品研究开发重大成果和最新进展的国内唯一生物制品专业学术期刊。主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。

    2008年07期 610页 [查看摘要][在线阅读][下载 12K]
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诊断制品

  • MenA PS-EA偶联物的制备及其在多糖抗体检测中的应用

    肖丽君;赵恩山;孔健;蒋先敏;

    目的制备MenA PS-EA偶联物及以MenA PS-EA为包被抗原的A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体的ELISA检测试剂。方法培养A群脑膜炎奈瑟菌,提取多糖(MenA PS),与卵清蛋白(EA)以还原氨基法偶联,Sepharose CL-4B纯化。制备以MenA PS-EA为包被抗原的A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体的ELISA检测试剂,考察试剂的精密性和稳定性,并与血清杀菌力试验(SBA)比较。结果纯化的MenA PS-EA经高效液相色谱检测,纯度为81.50%;以MenA PS-EA为包被抗原的ELISA检测试剂精密性和稳定性良好;将该试剂与SBA法比较,其敏感性为96.91%,特异性为90.00%,一致性为95.83%。两种检测方法之间差异无显著意义。结论以纯化MenA PS-EA作为包被抗原建立的A群脑膜炎奈瑟菌多糖特异性IgG抗体ELISA检测试剂可用于检测多糖IgG抗体,为进一步研究及开发细菌多糖类抗体诊断试剂提供参考。

    2008年07期 611-614页 [查看摘要][在线阅读][下载 142K]
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消息

  • 第二届中国国际生物制药研讨会征文通知

    <正>继"第一届中国国际生物制药研讨会"在2006年12月成功举办后,"第二届中国国际生物制药研讨会"将于2008年12月7日~11日在北京召开。会议语言为英文、中文,设中、英文同声翻译,会议地点在北京五洲皇冠假日大酒店(五星)。为使与会者能够得到疫苗领域的最新资讯,大会将邀请包括WHO在内的知名专家与会,并将通过壁报交流、企业展示等多种方式加强与会代表间的交流。

    2008年07期 614页 [查看摘要][在线阅读][下载 12K]
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诊断制品

  • 应用IU标准对HBsAg检测试剂的分析

    周诚;吴星;黄维金;蓝海云;辜文洁;祁自柏;李河民;

    目的应用IU标准对HBsAg检测试剂进行比较分析。方法筛选1份HBsAg阳性血浆,血清学检测证实为HBsAg adr亚型,参照WHO HBsAg标准品稀释方法进行稀释,以IU为单位的HBsAg国际标准品为标准,应用双平行线终点稀释方法对该样品进行定量标定。以标定的IU为单位样品,对国内外13家HBsAg检测试剂进行检测。结果待标定的样品经平行稀释后,测定的浓度值与理论浓度值误差均在11%以内,应用IU标准对国内外HBsAg检测试剂进行检测,国外试剂的最低检出限可达0.02~0.06IU/ml,国产试剂除1家可达0.14IU/ml外,其余试剂均在0.29~0.91IU/ml之间。结论应用IU标准检测HBsAg检测试剂,国外试剂的灵敏度明显高于国内试剂。

    2008年07期 615-617页 [查看摘要][在线阅读][下载 29K]
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消息

  • 欢迎登录《中国生物制品学杂志》网站

    <正>尊敬的专家、读者、作者及各位同仁:您们好!自2007年8月起,《中国生物制品学杂志》网站(www.zgswj.com.cn,中文域名:中国生物制品学杂志.com)正式运行。本站网页有杂志简介、在线投稿、稿件查询、过期目录、广告合作等您所需要的信息,欢迎登录。

    2008年07期 617页 [查看摘要][在线阅读][下载 12K]
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临床观察

  • 红细胞自身抗体的检测及结果分析

    吴远军;吴勇;陈宝婵;刘艳;

    目的分析红细胞自身抗体阳性患者的临床诊断,探讨红细胞自身抗体的临床意义。方法采用微柱凝胶抗球蛋白试验,筛检和鉴定患者红细胞血型不规则抗体,根据抗体是否凝集其自身红细胞,鉴别同种抗体或自身抗体;对鉴定存在红细胞自身抗体的患者,进行红细胞直接抗球蛋白试验,并分析其临床诊断。结果在46000名检测红细胞血型不规则抗体的患者中,检出23名红细胞自身抗体阳性,其中红细胞直接抗球蛋白试验阳性者13名。在23名红细胞自身抗体阳性者中,临床诊断为自身免疫溶血性疾病6名,系统性红斑狼疮5名,Evans综合征2名,自身免疫性肝炎2名,药物性急性自身免疫溶血性贫血1名,过敏性紫癜性肾炎1名,Ⅰ型糖尿病酮症酸中毒1名,溃疡性结肠炎1名,4名未检出与自身免疫相关。结论红细胞自身抗体可出现于多种自身免疫性疾病或与自身免疫相关疾病患者的血浆中,检测红细胞自身抗体对自身免疫性疾病的诊断及治疗有参考意义。

    2008年07期 618-619页 [查看摘要][在线阅读][下载 20K]
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实验技术

  • 检测轮状病毒滴度的荧光灶法的改进

    梁婧;徐葛林;黄晓媛;王继麟;孙文;夏飞;Kapikian AZ;杨晓明;

    目的对检测轮状病毒滴度的荧光灶试验(FFA)方法进行改进。方法以FFA法检测轮状病毒滴度,并观察残留血清、病毒吸附量、甲基纤维素、离心以及Ca2+等因素对检测结果的影响,并验证改进后FFA的重复性。结果残留血清、病毒接种量、吸附后不洗涤、PBST洗板对FFA检测结果均无影响。而接种病毒后离心及不加甲基纤维素覆盖与对照组比较,差异有显著意义。用改进后方法对同批病毒进行18次试验,CV值为1.7%。结论改进后的方法具有操作简便、结果稳定、重复性好等优点。

    2008年07期 620-622页 [查看摘要][在线阅读][下载 87K]
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  • 固定化胰蛋白酶制备条件的优化及其在纯化抑肽酶中的应用

    李晓丽;李辰;杨斌;李春元;王萍;王磊;

    目的优化固定化胰蛋白酶的制备条件,并探讨固定化胰蛋白酶在纯化抑肽酶中的应用。方法以介孔分子筛SBA-15作为载体,戊二醛作为交联剂,对胰蛋白酶进行固定化,并对固定化条件进行优化。将优化条件制备的固定化胰蛋白酶作为亲和吸附剂,对抑肽酶进行分离纯化。结果固定化胰蛋白酶制备的最适条件为:戊二醛浓度0.8%,加酶量3.0mg,反应温度35℃,反应时间3h。以此条件制备的固定化胰蛋白酶活力可达15.6U/mg。以此酶作为亲和吸附剂纯化抑肽酶,纯化倍数可达420倍以上,活性回收率超过80%。结论优化了固定化胰蛋白酶的制备条件,以此酶作为亲和吸附剂用于抑肽酶的分离纯化,效果较好。

    2008年07期 623-625页 [查看摘要][在线阅读][下载 355K]
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综述

  • 狂犬病减毒活疫苗的研究进展

    明平刚;罗静;严家新;

    减毒活疫苗是新一代狂犬病疫苗的发展方向,应用最近十余年发展起来的反向遗传学技术,有可能在不久的将来,研制出高效、安全、廉价且使用方便的狂犬病减毒活疫苗。本文就反向遗传系统及4种类型的狂犬病减毒活疫苗的研究进展作一简要综述。

    2008年07期 626-627+631页 [查看摘要][在线阅读][下载 35K]
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  • 水痘疫苗使用现状及研究进展

    王钰宁;井申荣;

    水痘是由水痘-带状疱疹病毒引起的儿童期高度传染性疾病,初次感染时引起水痘,恢复后,残余病毒可潜伏在机体内,在合适的条件下再次活跃,引起带状疱疹。目前预防水痘病毒感染的有效方法是接种水痘疫苗。本文主要就水痘疫苗的使用现状和研究进展进行综述。

    2008年07期 628-631页 [查看摘要][在线阅读][下载 47K]
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  • 人乳头瘤病毒中和抗体检测方法的研究进展

    吴雪伶;王佑春;

    人乳头瘤病毒疫苗已成为预防宫颈癌的最根本手段,而疫苗成功的关键是诱导有效的体液免疫,产生具有保护作用的中和抗体。本文就目前几种中和试验方法的原理及其优缺点进行综述。

    2008年07期 632-636+640页 [查看摘要][在线阅读][下载 67K]
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  • 植物可食疫苗研究现状与展望

    田佳;贾会勇;李杰;

    可食疫苗是一类新型的基因工程疫苗,其优势主要体现在可食用性。抗原基因在动植物体内表达后,通过直接食用转基因受体,诱导人或动物体内产生免疫应答。与传统疫苗相比,可食疫苗具有安全、方便、成本低等优点,因此对用于生产可食疫苗的转基因植物的研究在全世界范围内都得到广泛关注。目前已有一些编码细菌和病毒抗原的基因在植物中成功表达,并且通过口服试验证明了其有效性。本文就转基因植物可食疫苗的作用机理、优点、在人畜疾病预防方面的研究现状及存在的问题与应对措施作一综述。

    2008年07期 637-640页 [查看摘要][在线阅读][下载 45K]
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  • 《中国生物制品学杂志》稿约

    <正>《中国生物制品学杂志》为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊,由国家卫生部主管,中华预防医学会和中国生物技术集团公司长春生物制品研究所主办,月刊。

    2008年07期 641页 [查看摘要][在线阅读][下载 763K]
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