中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 关于“中华预防医学会第二届学术年会暨全球华人公共卫生协会第三届年会”的征文通知

    2006年05期 440页 [查看摘要][在线阅读][下载 24K]
    [下载次数:3 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:17 ]
  • 四川地区宫颈癌患者组织中部分高危HPV亚型感染及E6基因序列分析

    邱爱东;乌恩奇;任源;于湘晖;吴永革;金英花;姜春来;查晓;孔维;

    目的调查四川地区宫颈癌患者组织中高危人乳头瘤病毒(HPV)33、52和58亚型的感染状况及E6基因突变特性,为制备适合中国人群的HPV疫苗提供流行病学资料。方法采用PCR技术,并结合基因测序分析。结果对四川地区2003~2004年60份宫颈癌患者癌组织DNA进行HPV检测,获得HPV52和HPV58亚型各4份,检出率为6·7%;HPV33亚型1份,检出率为1·7%。对所获得的各份HPV33、52和58E6基因测序,均有碱基突变。结论HPV52型感染率在四川地区相对较高。与GenBank标准株相比,四川地区发现的HPV33和HPV52E6基因有多处突变,与日本发现的HPV33和HPV52突变株相近。

    2006年05期 441-444页 [查看摘要][在线阅读][下载 171K]
    [下载次数:143 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:33 ]
  • 红系造血相关转录因子在红系诱导分化中表达的变化

    谭业辉;王畅;王冠军;

    目的探讨红系细胞分化中细胞生长及相关转录因子表达的变化。方法利用红白血病细胞株HB60-5的生长特性,通过改变培养条件,促使细胞向成熟细胞分化。绘制细胞生长曲线,应用Northern blot方法检测诱导分化过程中红系造血相关基因表达变化。结果HB60-5细胞随着诱导分化时间的延长,生长减慢,红系分化标记α-珠蛋白表达逐渐升高,同时伴有GATA-1、p45NF-E2、EDRF等基因表达上调,Fli-1基因表达下调。结论红系分化过程中,细胞增殖受到抑制,红系细胞分化的基因表达上调,红系细胞增殖的基因表达下调。

    2006年05期 445-447页 [查看摘要][在线阅读][下载 273K]
    [下载次数:106 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:30 ]
  • 转基因人参细胞中HBsAg的表达及稳定性研究

    吉海滨;刘丹;刘黎红;李娟;于海鹏;富锐丽;李铮;盛军;

    目的对转基因人参CS83细胞系表达HBsAg的特异性、稳定性及表达效率进行分析。方法提取CS83细胞表达蛋白,分别以Lowry法和ELISA法检测总蛋白含量和HBsAg含量,SDS-PAGE和Western blot分析表达蛋白的HBsAg特异性。采用冷冻干燥、干燥和低温处理方法检测CS83细胞中HBsAg的稳定性。结果CS83细胞表达产物中总蛋白含量为2·024mg/g,HBsAg含量为504ng/g,占总蛋白含量的0·025%。表达的目的蛋白相对分子质量约为25000,具有HBsAg特异性。经不同方法处理后的保存结果表明,冻干保存稳定性最好。结论所建立的CS83细胞系能够稳定地表达特异性HBsAg。

    2006年05期 448-449+453页 [查看摘要][在线阅读][下载 157K]
    [下载次数:73 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:40 ]
  • 幽门螺杆菌VacA-HpaA融合蛋白的表达及其免疫学特性

    叶翠莲;杨致邦;黄进;邓颖;刘淼;吴利先;

    目的构建H.pylori细胞空泡毒素VacA与黏附素HpaA融合基因的原核表达载体,诱导其表达融合蛋白,并检测表达产物的抗原性与免疫原性。方法用PCR从pQE30-VacA质粒扩增出VacA基因,克隆至pTrc99A-HpaA载体中,与HpaA基因融合后,插入原核表达载体pQE30中,再将pQE30-VacA-HpaA转化入大肠杆菌DH5α,诱导表达并提纯融合蛋白,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达,Bradford法检测融合蛋白含量,Western blot鉴定特异性。将融合蛋白免疫家兔,得到多克隆抗血清,用双向免疫扩散和ELISA检测免疫原性。结果SDS-PAGE显示融合蛋白相对分子质量约为65000,表达量在35%以上,主要以包涵体形式表达,蛋白含量为0·72mg/ml,具有良好的VacA和HpaA抗原性与免疫原性。结论VacA-HpaA融合蛋白已成功表达,且具有良好的免疫原性,为进一步研究制备H.pylori疫苗创造了条件。

    2006年05期 450-453页 [查看摘要][在线阅读][下载 421K]
    [下载次数:48 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:27 ]
  • 产气荚膜梭菌α-β_2-β_1融合基因的构建及表达

    韩学波;许崇波;曾瑾;王玉炯;

    目的构建产气荚膜梭菌α-β2-β1融合蛋白基因表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法利用PCR技术,从含α毒素基因的质粒pXCPA02中扩增出α毒素基因,经NcoⅠ酶切,回收0·95kb的α基因片段,再与经NcoⅠ酶切并含融合基因β1-β2的质粒pXETB1B2连接,获得重组质粒pXETAB2B1,经NcoⅠ、BamHⅠ和EcoRⅠ酶切鉴定,并对其表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果重组质粒pXETAB2B1含有α-β2-β1融合基因。表达产物相对分子质量约为95000,并可被特异性抗体识别。结论已获得高效表达α-β2-β1的重组菌株。

    2006年05期 454-456页 [查看摘要][在线阅读][下载 298K]
    [下载次数:106 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:21 ]
  • 丙型肝炎病毒C区和NS3区嵌合基因的克隆及表达

    彭祥兵;余健;黄仕和;周志军;李健;朱华松;张爱华;闭兰;赵亚杰;余模松;

    目的获得丙型肝炎病毒(HCV)C-NS3嵌合抗原,以提高HCV酶联免疫吸附试验诊断试剂的质量。方法应用SOE-PCR(拼接重叠延伸PCR)的方法,构建了HCV的C区和NS3区的嵌合基因,克隆于表达载体pGEX-4T3,并转化于大肠杆菌BL21,经筛选,IPTG诱导HCV的C-NS3嵌合抗原的表达。经SDS-PAGE检测表达水平,Western blot检测抗原特异性。结果SOE-PCR构建的HCV C区和NS3区嵌合基因在BL21中获得表达。经鉴定,其相对分子质量约为75000,并具有高度特异性。结论已获得HCV C-NS3嵌合抗原,为提高HCV酶联免疫吸附试验诊断试剂的质量奠定了基础。

    2006年05期 457-460页 [查看摘要][在线阅读][下载 617K]
    [下载次数:83 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:37 ]
  • Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白的表达及纯化

    张文艳;楼朝平;朱可彤;张帆;姜春来;吴永革;于湘晖;孔维;

    目的获得高纯度的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白。方法以Vif/VR1012质粒为模板,PCR扩增出Vif-ΔN28基因并插入pRSETB质粒。将构建的原核表达载体Vif-ΔN28/pRSETB以及已有的Cullin5-N138/pRSETB质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,产物经Ni-NTA离子纯化柱纯化、复性。结果所表达的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白约占各自菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度均可达90%以上。结论已成功构建了Vif-ΔN28原核表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性的纯化的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白。

    2006年05期 461-463+467页 [查看摘要][在线阅读][下载 472K]
    [下载次数:119 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:36 ]
  • HLA-DR/DQ等位基因与HBV感染的相关性

    王波;王欣;谢风;

    目的对大连地区不同人群的HLA-DR/DQ基因型与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性进行初步分析。方法利用微量聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,分别检测乙型肝炎后肝硬化患者、乙型肝炎病毒携带者和正常对照人群的HLA-DR/DQ基因型。结果随机选择的乙型肝炎后肝硬化患者的HLA-DR7的抗原频率与正常对照人群比较显著升高(P<0·05);乙型肝炎病毒携带者的HLA-DQ8的抗原频率与正常对照人群比较显著升高(P<0·05);乙型肝炎后肝硬化患者与乙型肝炎病毒携带者比较,后者的HLA-DQ8抗原频率明显高于前者,差异有显著意义(P<0·05)。其它HLA等位基因频率在不同人群中差异无显著意义(P>0·05)。结论HLA-DR7/DQ8基因型与HBV感染之间可能存在一定相关性。

    2006年05期 464-467页 [查看摘要][在线阅读][下载 210K]
    [下载次数:61 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:31 ]
  • 结核分枝杆菌RD1区重组11 kD蛋白的克隆表达及效力

    陈保文;徐苗;徐敬华;沈小兵;苏城;王国治;

    目的在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌RD1区11kD蛋白,并检测表达产物的效力。方法构建11kD蛋白编码基因原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)IPTG诱导表达,离子层析柱分离纯化重组蛋白。以结核分枝杆菌致敏豚鼠进行皮肤变态反应(DTH)测定。结果结核分枝杆菌11kD蛋白在大肠杆菌中以可溶形式表达,表达蛋白占总菌体蛋白的33%以上,纯化后纯度达95%以上,并可诱导结核分枝杆菌致敏豚鼠产生迟发型超敏反应,5μg/ml11kD蛋白的效力与50IU/ml TB-PPD相当。结论重组11kD蛋白已在大肠杆菌中成功表达,并有望成为结核病皮试鉴别诊断用新试剂。

    2006年05期 468-470页 [查看摘要][在线阅读][下载 438K]
    [下载次数:84 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:55 ]
  • pET28a-Chaperonin 10重组载体的构建及SARS-CoV蛋白高效表达

    张秀霞;向泽敏;李娟;王宣军;盛军;

    目的建立在大肠杆菌中高效表达SARS-CoV蛋白的表达系统。方法PCR扩增BCG分子伴侣10基因,并将其连接到pET28a载体上,构建成分子伴侣10融合蛋白表达载体。在该载体Chaperonin10基因的3′端克隆SARS-N、SARS-E、SARS-S和SARS-M基因,在BL21(DE3)中进行诱导表达。结果SARS-E、SARS-N在与分子伴侣10融合后能获得高效表达。结论该表达系统可使部分在大肠杆菌中难于表达的SARS-CoV蛋白获得高表达。

    2006年05期 471-473页 [查看摘要][在线阅读][下载 282K]
    [下载次数:244 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:30 ]
  • 社区人群乙型肝炎疫苗接种状况及影响因素调查

    王增朝;车淑丽;

    2006年05期 473页 [查看摘要][在线阅读][下载 27K]
    [下载次数:20 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:22 ]
  • 治疗性乙型肝炎病毒载体疫苗的构建

    陈宇;杨小松;李惟;孔维;

    目的研制治疗慢性乙型肝炎的重组修饰的Ankara痘病毒(MVA)载体疫苗。方法将HBV的表面抗原基因克隆到MVA病毒的重组载体pSC11上,重组质粒与空MVA病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组。经过10轮筛选,挑选出阳性的重组MVA病毒。经PCR鉴定,感染不同细胞系,确定病毒表达量。结果获得目的重组MVA病毒,ELISA检测到表面抗原在不同细胞系中的表达。结论已成功地构建了表达HBV表面抗原的重组MVA病毒。

    2006年05期 474-476页 [查看摘要][在线阅读][下载 330K]
    [下载次数:113 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:29 ]
  • 重组人红细胞生成素二聚体工程细胞的建立

    李秋生;张春莉;李金凤;有红霞;李景利;

    目的建立重组人红细胞生成素二聚体工程细胞株。方法用重组人红细胞生成素二聚体表达载体转染COS-7细胞,通过dot blot进行检定。然后对CHO-dhfr-细胞进行稳定转染,再经过稀释克隆和MTX的加压扩增,筛选二聚体工程细胞株并进行传代及无血清培养基培养、目的蛋白纯化及检测。结果瞬时转染70h细胞有目的蛋白表达。稳定转染后选取表达量最高的细胞株为工程细胞株。该细胞株连续传15代及经无血清培养基培养,目的蛋白表达量均无明显下降。所表达的目的蛋白相对分子质量为70000,并具有高度特异性。结论已获得稳定高效表达重组人红细胞生成素二聚体的工程细胞株。

    2006年05期 477-479页 [查看摘要][在线阅读][下载 190K]
    [下载次数:51 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:37 ]
  • 《中国生物制品学杂志》被《剑桥科学文摘(CSA)》收录

    2006年05期 479页 [查看摘要][在线阅读][下载 105K]
    [下载次数:4 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:21 ]
  • 乙型肝炎病毒X基因DNA竞争子的构建及鉴定

    刘汉平;宴萍;方志正;

    目的构建乙型肝炎病毒X基因DNA(xDNA)竞争子L180,为竞争PCR定量分析xDNA打下基础。方法以扩增的xDNA片段为模板,用引物1434和Lx PCR扩增竞争子DNA,并将扩增产物克隆到pUCm-T载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,酶切鉴定和测序,筛选阳性竞争子质粒,并建立竞争PCR定量分析xDNA的方法。结果所构建xDNA竞争子L180,经测序及PCR定量分析证实,PCR扩增的产物即为目的xDNA。初步建立了竞争PCR定量分析xDNA的方法。结论已成功构建乙肝病毒xDNA竞争子。

    2006年05期 480-481+487页 [查看摘要][在线阅读][下载 292K]
    [下载次数:21 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:37 ]
  • 冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分相容性的研究

    刘令九;谢宝生;官桂范;李淑焱;薛勇;岳丹;刘景晔;王鹏富;

    目的研究冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分的相容性。方法将所制备的联合疫苗与同批单价甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗进行甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力检测,同时分别以联合疫苗与甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗接种恒河猴,检测甲肝抗体和HBsAb阳转率。结果该联合疫苗与同批单价疫苗的甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力及诱导猴体的甲肝抗体和HBsAb阳转率差异均无显著意义。结论冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分间无拮抗作用,具有相容性。

    2006年05期 482-483页 [查看摘要][在线阅读][下载 58K]
    [下载次数:79 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:32 ]
  • 黄热疫苗病毒17D株在Vero细胞上的适应性传代

    董翊;刘保奎;

    目的建立黄热疫苗病毒17D株的Vero细胞适应株。方法将2批鸡胚黄热疫苗病毒在Vero细胞上进行2次蚀斑筛选,并连续传代培养,然后对获得的4株Vero细胞适应株病毒YFV-Vero(5)-A1、YFV-Vero(5)-A2、YFV-Vero(5)-B1和YFV-Vero(5)-B2进行稳定性和免疫原性检测。结果4株Vero细胞适应株病毒可被黄热病毒(17D)猴免疫血清中和。在传代过程中,不同代次的病毒滴度稳定在6·90LgPFU/ml以上,高峰病变出现时间为5~7d。家兔和小鼠的免疫血清中和抗体效价分别为1∶640~1∶5120和1∶640~1∶2560。结论4株Vero细胞适应株病毒生物学性状稳定,免疫原性良好。

    2006年05期 484-487页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
    [下载次数:97 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:24 ]
  • 人用皮内注射布氏菌活疫苗毒理及药效学研究

    李恪梅;王秉翔;薛晓红;肖忻;王燕;徐苗;陈保文;沈小兵;王国治;

    目的研究人用皮内注射布氏菌活疫苗的毒理及药效学作用,以评价其可行性。方法对布氏菌活疫苗进行小白鼠急性毒性试验、局部刺激试验、全身过敏试验、长期毒性试验及豚鼠皮肤变态反应试验并免疫小鼠,进行血清抗体检测。结果小鼠皮内注射布氏菌活疫苗的最大耐受量为1·0×109个菌,用布氏菌素注射足底,可引起明显的迟发型变态反应。局部刺激试验,只有注射1·0×109个菌的部位会在48h后化脓,但在1~2周内可自愈。全身过敏试验均未出现任何异常反应,毒性试验、各项血常规、血生化检查均未见显著差异,各脏器组织的病理学检查亦未见病理改变。免疫12周后,对豚鼠骨髓造血细胞亦无影响。对皮内免疫12周的豚鼠作背部皮肤变态反应试验,24~48h结果为阳性。皮内免疫小鼠14d后可测得小鼠体内有抗体产生,50d后测得小鼠体内抗体均呈强阳性,对照组小鼠14d与50d抗体检测均为阴性。结论毒理和药效学试验结果显示,布氏菌活疫苗用皮内注射的途径进行免疫是可行的。

    2006年05期 488-491页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K]
    [下载次数:138 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:62 ]
  • 黄芪多糖对人用狂犬病疫苗免疫原性的影响

    崔颖杰;吴晓娟;郭岩;袁延宝;代长海;鲁文艳;于洪涛;

    目的研究黄芪多糖对狂犬病疫苗免疫应答的影响。方法将BALB/c小鼠和昆明小鼠各自随机分为2组,即试验组与对照组,分别于0、7d接种冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)。对照组疫苗用灭菌注射用水稀释,试验组疫苗用10%黄芪多糖(APS)溶液稀释,每只腹腔免疫0·5ml。BALB/c小鼠于15d无菌取脾,进行淋巴细胞转化实验;昆明小鼠在免疫前和第1针免疫后4、7、14、30、45和60d眶静脉采血,分别进行外周血淋巴细胞CTL试验和小鼠中和抗体水平测定。结果试验组疫苗诱导小鼠产生的中和抗体和细胞免疫水平均高于对照组疫苗,二者差异有显著意义。结论黄芪多糖能提高狂犬病疫苗的免疫原性。

    2006年05期 492-493+496页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K]
    [下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:13 ] |[阅读次数:39 ]
  • HIV-1 DNA疫苗的构建及免疫原性

    滕红刚;姜春来;于湘晖;孔维;

    目的构建稳定表达HIV-1Gag-Pol蛋白的DNA疫苗,提高目的基因的表达效率。方法对HIV-1野生型Gag-Pol基因序列进行优化,使用本室构建的表达载体VR,构建重组质粒VR-GPCINS。将构建的重组质粒VR-GPCINS转染HEK293细胞,Western blot鉴定表达产物。用构建的DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,Western blot检测体液免疫反应。结果成功构建能稳定高效表达HIV-1Gag-Pol蛋白的VR-GPCINS质粒,Western blot在免疫小鼠的血清中检测到抗p24的特异性抗体。结论含优化Gag-Pol基因序列的质粒DNA疫苗VR-GPCINS在细胞表达和体液免疫方面均明显优于含野生型Gag-Pol基因序列的质粒DNA疫苗VR-GP。

    2006年05期 494-496页 [查看摘要][在线阅读][下载 201K]
    [下载次数:126 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:31 ]
  • 天花疫苗的规模化制备

    安焕宇;范淑兰;安丽颖;韩亚儒;过琴媛;

    目的建立大规模制备天花疫苗的方法。方法用SPF鸡胚细胞培养痘苗病毒,经细胞破碎、膜过滤提取痘苗病毒,加保护剂制得天花疫苗。结果疫苗经检测,动物免疫效果和疫苗稳定性良好。结论此方法可以用于大规模制备天花疫苗,疫苗质量符合1979版《中国生物制品规程》要求。

    2006年05期 497-498页 [查看摘要][在线阅读][下载 49K]
    [下载次数:127 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:27 ]
  • 《中国生物制品学杂志》将于明年改为月刊

    2006年05期 498页 [查看摘要][在线阅读][下载 27K]
    [下载次数:4 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:17 ]
  • 重组人血白蛋白与小分子药物结合功能研究

    陶苒;李梅彦;王慧欣;董爱华;贾茜;

    目的研究重组人血白蛋白与小分子药物的结合功能。方法在366nm下检测地西泮与人血白蛋白结合前后吸收值的变化,计算二者的结合常数;华法令与人血白蛋白结合后,用SephadexG-25HPLC柱进行分离,对游离华法令和二者结合产物分别积分,得到华法令与人血白蛋白的结合率。结果重组人血白蛋白与地西泮的结合常数为14·68mol Diaze-pam/mol rHSA,天然人血白蛋白与地西泮结合常数为12·82mol Diazepam/mol HSA。重组人血白蛋白中华法令的结合率为8·69%,而天然人血白蛋白中华法令的结合率为6·73%。结论重组人血白蛋白与天然人血白蛋白小分子药物结合功能基本一致。

    2006年05期 499-501页 [查看摘要][在线阅读][下载 91K]
    [下载次数:378 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:24 ]
  • 幽门螺杆菌重组VacA蛋黄抗体的制备

    毛小琴;杨致邦;黄伟;张绍兰;田一玲;叶翠莲;

    目的研制高效价、高特异性的抗细胞空泡毒素VacA的鸡蛋黄抗体(IgY),为研制幽门螺杆菌(H.pylori)治疗性抗体奠定基础。方法用纯化的重组细胞空泡毒素抗原免疫22周龄洛曼产蛋母鸡,取免后所产鸡蛋,将蛋黄稀释、离心,收集上清,加硫酸铵沉淀。以ELISA间接法检测抗体效价,Bradford法检测蛋白含量,SDS-PAGE法检测相对分子质量及纯度。结果母鸡初次免疫后76d,抗体效价达到1∶6400,最高可达1∶12800。蛋黄抗体经纯化浓缩后,用SDS-PAGE分析,出现2条蛋白带,纯度可达80%以上,其含量为25·66mg/ml。结论已成功制备了抗重组细胞空泡毒素的特异性蛋黄抗体。

    2006年05期 502-504页 [查看摘要][在线阅读][下载 199K]
    [下载次数:63 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:25 ]
  • 重组人肝再生增强因子的纯化及生物学活性分析

    李茹冰;王治伟;傅泳航;易学瑞;曾平鲁;邹清雁;佟明华;潘韵;杨联萍;孔祥平;

    目的对在大肠杆菌中表达的重组人肝再生增强因子(rhALR)进行分离纯化及生物学活性分析。方法以大肠杆菌DH5α发酵表达重组人肝再生增强因子,经包涵体洗涤、变性、目的蛋白复性,以离子交换、分子筛等技术纯化,并进行一系列检定。结果目的蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性及柱层析纯化,纯度大于98%,SDS-PAGE测定相对分子质量为30000,MOLDI-TOF-MS测定其相对分子质量为30780·522,N-末端15个氨基酸与理论序列一致。Western blot证实rhALR正确表达,等电点5·85~6·85,氨基酸含量与理论值基本符合。动物实验证实rhALR具有明显的促进CCl4毒性肝损伤小鼠肝细胞修复活性。结论经柱层析纯化的rhALR具有促进小鼠CCl4肝损伤肝细胞修复的活性。

    2006年05期 505-508页 [查看摘要][在线阅读][下载 493K]
    [下载次数:49 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:27 ]
  • 蓉生静注人免疫球蛋白(pH4)质量稳定性考察

    江砚芳;贺娟;苏志芬;王黔川;张月星;刘素芳;杨汇川;曲蓬;

    目的考察蓉生静注人免疫球蛋白(pH4)存放于不同温度、不同时期的质量稳定性,以及内包装材料对制品质量稳定性的影响。方法将静注人免疫球蛋白(pH4)分别放置于2~8℃和20~25℃的条件下,定期取样。依照《中国生物制品规程》(2000年版)的相应标准进行检测,并比较进口与国产模制瓶灌装对产品质量的影响。结果静注人免疫球蛋白(pH4)在2~8℃条件下存放2年后,与出厂时的检验结果比较,质量指标无显著变化;在20~25℃条件下存放2年后,分子大小分布、抗-HBs效价、浊度等质量指标变化显著。静注人免疫球蛋白(pH4)灌装于进口模制瓶的质量稳定性优于国产模制瓶。结论蓉生静注人免疫球蛋白(pH4)保存在2~8℃在有效期内质量稳定。

    2006年05期 509-510页 [查看摘要][在线阅读][下载 50K]
    [下载次数:195 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:19 ]
  • 乙型脑炎病毒抗原定量检测试剂的研制

    张国强;冯素英;沈淑芹;王晋;施彤;张月兰;张影;

    目的制备酶联免疫乙型脑炎病毒抗原定量检测试剂,用于乙型脑炎灭活疫苗中抗原定量检测。方法分别用2株杂交瘤细胞分泌的抗乙型脑炎病毒单克隆抗体作为包被和标记物,配以辅助试剂,建立酶联免疫检测系统,用经标化的乙型脑炎疫苗参考品绘制定量标准曲线,对试剂各项技术指标进行验证。结果试剂对乙型脑炎病毒抗原的最佳定量范围是0·131~0·666ELISA单位(EU/ml),标准曲线相关系数r=0·996,平均变异系数CV小于10%。与NIH法测定结果相比较,相关有非常显著意义(P<0·01)。对2批乙型脑炎疫苗9次测定,变异系数分别为2·7%和4·4%。结论试剂的精密性和准确度高,特异性和稳定性可靠,可用于乙型脑炎疫苗中的抗原定量检测。

    2006年05期 511-513页 [查看摘要][在线阅读][下载 82K]
    [下载次数:153 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:24 ]
  • 重组人白介素-12生物学活性检测方法的建立

    王威;饶春明;王军志;

    目的建立重组人白介素-12(rhIL-12)的生物学活性检测方法。方法采用重组人白介素-12刺激外周血淋巴细胞分泌IFN-γ,并用国际标准品校正,进行生物学活性检测。结果用该方法对重组人白介素-12成品及原液进行检测,成品比活性平均值为1037460IU/mg,变异系数为26·0%(n=5);原液比活性平均值为1262270IU/mg,变异系数为16·8%(n=5)。结论该方法检测结果准确、客观,重复性好,可用于重组人白介素-12生物学活性的常规检测。

    2006年05期 514-515页 [查看摘要][在线阅读][下载 55K]
    [下载次数:236 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:36 ]
  • 软琼脂克隆法与裸鼠体内接种法检测细胞致瘤性的比较

    孟淑芳;林林;李修兰;冯建平;王佑春;李德富;

    目的比较体外软琼脂克隆法与裸鼠体内接种法检测细胞致瘤性的敏感性及相关性。方法用软琼脂克隆法检测不同种类、不同来源的细胞的致瘤性,并与裸鼠体内接种法的结果进行比较。结果不同的细胞在体外软琼脂中形成细胞集落的能力及集落形态明显不同。肿瘤细胞在体外可形成肉眼可见的细胞集落,而人二倍体细胞及组织工程用细胞在体外不形成或仅形成极少的细胞集落克隆,其集落形成率与细胞代次没有相关性,在裸鼠体内亦不形成瘤。重组CHO细胞经过遗传改造后,有的在裸鼠体内的致瘤性减弱,但体外软琼脂克隆行为没有发生明显改变。从128至169代次的Vero细胞均可在体外软琼脂中形成不同的细胞集落克隆,高代次细胞的集落形成率明显高于低代次细胞,但所有检测代次的细胞在裸鼠体内均未形成瘤。结论用软琼脂克隆法检测细胞的致瘤性与裸鼠体内接种法不仅具有良好的相关性,而且敏感性高于裸鼠体内接种法。

    2006年05期 516-519页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K]
    [下载次数:831 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:31 ] |[阅读次数:25 ]
  • 乳鼠心肌细胞的原代培养方法的改进

    陈妍;王振远;郭秀侠;于洪涛;邓英杰;

    目的对乳鼠的心肌细胞进行原代培养方法的改进。方法参照乳鼠心肌细胞原代培养方法,并进行改进,选用Ⅱ型胶原蛋白酶及IMDM培养液进行消化和培养,减少了消化及离心时间,差速贴壁分离纯化后,加入5-溴脱氧核苷抑制成纤维细胞污染。结果本方法培养的心肌细胞存活率为95·6%,培养2~5d观察,视野中绝大多数为已搏动的心肌细胞和心肌细胞团,成纤维细胞无明显增殖。结论本方法是一种较为理想的乳鼠心肌细胞原代培养方法。

    2006年05期 520-521页 [查看摘要][在线阅读][下载 125K]
    [下载次数:433 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:23 ]
  • 食管癌细胞中热休克蛋白70-多肽复合物的分离

    陈兰英;高富荣;张玉焕;谢素嫩;

    目的分离纯化癌细胞中热休克蛋白70(HSP70)-多肽复合物。方法以食管癌组织为材料,通过一系列的层析柱(ConA-Sepharose、ADP-Agarose、MonoQ及HSP70抗体亲和层析柱)进行分离及纯化。结果所分离纯化的HSP70-多肽复合物相对分子质量与预期相符。结论为提取肿瘤HSP70-多肽复合物提供了具体方法,并为研制多肽疫苗奠定了基础。

    2006年05期 522-523页 [查看摘要][在线阅读][下载 103K]
    [下载次数:33 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:19 ]
  • PC12细胞体外培养法测定蛇毒神经生长因子活性

    骆鹏;谭亚军;田霖;张庶民;

    目的建立PC12细胞检测蛇毒NGF活性的方法。方法在有血清条件下,观察NGF诱导PC12细胞分化情况。在无血清条件下,以SRB染色定量NGF维持PC12细胞存活数量,计算NGF效价,并与鸡胚背根神经节法比较。结果在有血清条件下,NGF能诱导PC12细胞分化,出现神经突触样生长。在无血清条件下,NGF浓度对数值与PC12细胞数呈直线相关,标准品与样品的生物效应平行性良好,以量反应平行线法可计算样品的NGF平均效价为1108·3U/ml,与鸡胚背根神经节法检测结果相符。结论该法简便易行,定量准确,重复性好,实验周期短。

    2006年05期 524-526页 [查看摘要][在线阅读][下载 256K]
    [下载次数:176 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:20 ]
  • 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位特异性抗体检测方法的建立与评价

    王斌;邹全明;朱凤才;计国欣;毛旭虎;刘开云;鲁东水;李亮;曾明;

    目的建立并评价幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)特异性抗体的检测方法。方法应用纯化的重组HpUreB作为包被抗原,建立检测HpUreB特异性抗体的ELISA间接法。以Hp抗体Western blot检测作为“金标准”,评价所建立方法的真实性和可靠性。结果检测血清特异性IgG的灵敏度为100·0%,特异度为97·7%,阳性预测值为97·2%,阴性预测值为100·0%,约登指数为0·977,符合率为98·7%,试验的一致率为98·5%;检测血清中总的特异性Ig灵敏度为97·1%,特异度为95·3%,阳性预测值为94·4%,阴性预测值为97·6%,约登指数为0·925,符合率为96·2%,试验的一致率为97·8%;检测唾液中特异性sIgA的灵敏度为96·2%,特异度为94·5%,阳性预测值为89·3%,阴性预测值为98·1%,约登指数为0·907,符合率为95·1%,试验的一致率为97·5%;检测粪便标本中的特异性sIgA的灵敏度为92·0%,特异度为90·2%,阳性预测值为85·2%,阴性预测值为94·9%,约登指数为0·822,符合率为90·9%,试验的一致率为98·6%,CV值均小于15%。结论该检测方法真实性、可靠性、重复性良好,能满足临床标本检测的要求。

    2006年05期 527-529页 [查看摘要][在线阅读][下载 94K]
    [下载次数:79 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:41 ]
  • 破伤风抗毒素细菌内毒素检查方法的建立

    白春杰;夏天瑶;薛向光;张梅;柳春红;杨琳;

    目的建立破伤风抗毒素细菌内毒素的检测方法。方法确定内毒素限值和供试品溶液的最大有效稀释倍数,制备供试品溶液;用细菌内毒素工作标准品作鲎试剂灵敏度复核试验,用供试品溶液在最大有效稀释倍数下作干扰试验,在前者试验有效,且后者试验无干扰作用时,在该浓度下对供试品进行凝胶限量试验,并与热原检查法比较。结果检测的10批破伤风抗毒素细菌内毒素的限量与热原检查法热原的限度完全相符。结论凝胶限量法可以替代热原检查法,对破伤风抗毒素进行细菌内毒素的限量检测。

    2006年05期 530-531页 [查看摘要][在线阅读][下载 51K]
    [下载次数:46 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:30 ]
  • 碘化钾与酚/氯仿提取外周血基因组DNA方法的比较

    鞠海英;刘亚珍;刘永茂;李勇;

    目的建立碘化钾快速提取外周血基因组DNA的方法。方法采用碘化钾法和酚/氯仿提取法,直接从人外周血中提取基因组DNA,并以此为模板,进行人类生长激素(HGH)基因片段的扩增及鉴定。结果此方法提取的DNA量大,DNA体外扩增结果稳定。结论该方法较传统酚/氯仿提取基因组DNA法快速、简便、经济,可用于PCR模板DNA的制备。

    2006年05期 532-533页 [查看摘要][在线阅读][下载 114K]
    [下载次数:398 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:21 ]
  • IgY的冻融法脱脂条件研究

    刘颖;王玉华;王冬倩;张超;栾勇;牟忠梅;李勇;

    目的寻求IgY的最佳脱脂条件。方法用人IgG免疫产蛋母鸡,待蛋黄中抗体效价达1∶64以上时,选用不同的稀释度、酸碱度、冻融次数、离心力等条件分离IgY。测定除脂率、效价、蛋白含量,以确定最佳脱脂条件。结果稀释度为1∶7,pH为5·2,冻融1~2次,离心力大于或等于3000g,离心20min以上,其除脂率可超过98%,IgY的特异性抗体效价未降低,蛋白含量平均为8·033mg/ml。结论用冻融法分离IgY能有效去除蛋黄液中的脂肪,此工艺便于批量生产低脂IgY产品。

    2006年05期 534-536页 [查看摘要][在线阅读][下载 83K]
    [下载次数:109 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:32 ]
  • 细菌生物膜酶学消解的新方法

    胡晓梅;贾鸣;孙卫忠;胡福泉;

    2006年05期 536页 [查看摘要][在线阅读][下载 25K]
    [下载次数:152 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:22 ]
  • 钩端螺旋体外膜蛋白致病性及免疫性研究进展

    林玮;谭立志;郭晓奎;

    钩端螺旋体外膜蛋白在钩端螺旋体的致病与免疫应答过程中起着十分重要的作用,它在疾病感染时既可以作为一种外膜毒性物质,又可以作为一种特异性抗原而诱导免疫应答。本文作者对钩端螺旋体外膜蛋白的生物学特性、致病机理和免疫原性作了全面的综述,为有效地筛选特异的钩体候选疫苗提供可靠的依据,也为特异地诊断和预防钩体病奠定基础。

    2006年05期 537-540页 [查看摘要][在线阅读][下载 139K]
    [下载次数:84 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:24 ]
  • 中国国际生物制药研讨会征文通知

    2006年05期 540页 [查看摘要][在线阅读][下载 40K]
    [下载次数:7 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:19 ]
  • 呼吸道合胞病毒蛋白的研究进展

    李光;井申荣;

    本文对呼吸道合胞病毒基因组编码的病毒蛋白,包括膜蛋白、核蛋白、融合蛋白、基质蛋白及非结构蛋白的结构和功能的研究进展进行比较全面的综述。

    2006年05期 541-543+547页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
    [下载次数:233 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:11 ] |[阅读次数:22 ]
  • 乙型肝炎人免疫球蛋白的应用研究

    周海云;曾鸣;

    本文就乙型肝炎免疫球蛋白应用效果、作用机理及应用中存在的问题等作了全面综述。

    2006年05期 544-547页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K]
    [下载次数:254 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:23 ]
  • 关于体外诊断试剂质量研究的建议

    张丽;

    2006年05期 548-549页 [查看摘要][在线阅读][下载 48K]
    [下载次数:131 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:20 ]
  • 世界卫生组织乙型脑炎灭活疫苗质量控制与规程修订研讨会

    董关木;徐程林;

    2006年05期 550-551页 [查看摘要][在线阅读][下载 51K]
    [下载次数:45 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:26 ]
  • 大鼠口服核糖核酸的吸收与分布研究

    李恕;刘庆莹;李怀芬;牛惠生;

    2006年05期 552页 [查看摘要][在线阅读][下载 29K]
    [下载次数:61 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:21 ]
  • 下载本期数据