中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • HCV聚合酶在大肠杆菌中表达产物的纯化及结构研究

    杨振,蒋建东,祁自柏,陈鸿珊,张华远,李河民

    目的 构建HCV聚合酶基因重组原核表达质粒 ,研究高效表达聚合酶蛋白的最适条件、表达产物的纯化方法以及最佳变性和复性条件 ,同时分析其二级结构 ,为建立细胞外HCV聚合酶复制模型及筛选药物创造条件。方法 采用高保真PfuDNA聚合酶进行反转录及套式PCR扩增 ,从我国HCVRNA阳性病人血清中扩增出HCVNS5bRNA聚合酶全长基因序列 ,构建原核表达载体。在多个载体中选取pET 30a作为表达载体 ,选择诱导表达条件。利用Ni2 + 金属离子螯和亲和层析将其纯化。同时对该酶蛋白的变性和复性条件进行研究 ,对其相关的分子生物学参数和二级结构进行分析。结果 测序及读码框架分析结果表明 ,按照上述技术路线得到了相关HCVNS5bRNA聚合酶全基因序列。在最佳表达条件下 ,诱导表达融合蛋白 (相对分子质量 6 5 0 0 0 ) ,其最高表达量为18 9% ,纯度大于 92 83% ,Westernblot法检测 ,能与HCVNS5b单抗反应 ,证明其为NS5b蛋白。对其二级结构的分析表明 ,已获得了活性基团完整的HCV聚合酶。结论 HCV聚合酶的高效表达和纯化 ,为建立细胞外HCV聚合酶复制模型及筛选药物奠定基础。

    2004年06期 337-340页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k]
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  • 葡萄球菌肠毒素B基因真核表达系统的构建及目的蛋白的鉴定

    孙爱华,毛亚飞,严杰

    目的 克隆葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因 ,构建其真核表达系统并表达目的蛋白。方法 采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌FRIS6B株中扩增全长SEB ,目的片段T A克隆后测序。重组质粒pUCm T SEB经酶切获得的pUCm T SEB基因片段与真核表达载体pPIC9K连接。将重组真核载体pPIC9K SEB转化入P .pastorisGS115株 ,经PCR筛选并鉴定pPIC9K SEB P .pastorisGS115。在 0 5 % (v v)甲醇诱导下 ,采用SDS PAGE检测重组SEB(rSEB)的表达 ,并对rSEB的N端氨基酸序列和诱导人脐静脉内皮EVC 30 4细胞分泌IL 1α和TNFα的作用进行了检测。结果 所克隆的SEB基因核苷酸及氨基酸序列的同源性分别高达 98 84 %~ 10 0 %和 10 0 %。表达的SEB在SDS PAGE图谱的位置与预期相符。rSEB氨基末端氨基酸序列与预期完全相符。rSEB与SEB商品有相似的促人脐静脉内皮细胞EVC 30 4分泌IL 1α和TNFα的活性。结论 已成功地构建了SEB的真核表达系统 ,为进一步分析SEB分子中毒性相关活性位点、定位突变获得减毒或无毒的突变体奠定了基础。

    2004年06期 341-343+379页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k]
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  • 幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的基因克隆与表达

    林珊珊,杨致邦,吴利先,刘淼

    目的 克隆、表达幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白基因napA ,为研究幽门螺杆菌致病机理提供材料。方法 用PCR从幽门螺杆菌DNA中扩增出目的基因napA ,定向插入原核表达载体pQE30中 ,测序分析确认后 ,转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,表达蛋白以NI2 + NTA柱进行纯化。结果 PCR扩增出 4 35bp目的基因片段napA ,克隆入pQE30质粒。工程菌诱导后SDS -PAGE显示新生表达蛋白带 ,相对分子质量为 170 0 0 ,与预期一致 ,约占菌体总蛋白的 38% ,经Ni2 + NTA柱纯化后可获得纯度为 95 5 %重组蛋白。Westernblot显示重组蛋白具有良好的抗原性。结论 克隆napA基因成功 ,并在大肠杆菌DH5α中高效表达。

    2004年06期 344-347页 [查看摘要][在线阅读][下载 58k]
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  • 产气荚膜梭菌β_2毒素基因的克隆及定点突变

    王玉炯,许崇波,蒋玉文,邓光存,曾瑾,马春燕

    目的 克隆产气荚膜梭菌 β2 毒素基因 ,并选择可能影响其生物活性的氨基酸的相关碱基位点进行定点突变 ,构建β2 毒素基因的突变体。方法 利用PCR从C型产气荚膜梭菌基因组DNA中 ,扩增出约 0 7kb的基因 ,将其克隆至pGEM T载体上。经GOLDKEY软件分析抗原表位 ,PCR定点突变技术进行 2 34位半胱氨酸→苷氨酸的定点突变。结果 β2 毒素基因核苷酸序列与报道的一致 ,其突变基因 6 99位核苷酸由T→G。结论 已成功克隆了 β2 毒素基因 ,并准确实施了预期定点突变。

    2004年06期 348-350页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
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  • 大鼠Endostatin在乳酸乳球菌中的克隆与表达大鼠Endostatin在乳酸乳球菌中的克隆与表达

    李充璧,闫宝山,李晓晨,孙克菲,王春香,周明海

    目的 在乳酸乳球菌中克隆与表达大鼠endostatin。方法 采用RNA分离试剂盒从大鼠肾脏组织中提取总RNA ,用RT PCR方法扩增其endostatin基因 ,将该基因克隆进pUC19质粒中 ,转化大肠杆菌DH5a ,提取质粒 ,分离基因 ,酶切后与含有乳酸乳球菌启动子nisin的pLA14 1质粒连接 ,经电击转化 ,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ90 0 0中 ,转化子在含有氯霉素的GM17培养基上培养。用nisin诱导endostatin表达 ,SDS PAGE和Westernblot鉴定表达产物。结果 表达产物相对分子质量约为 14 0 0 0 ,表达量约为 10mg L。结论 在乳酸乳球菌中可以表达出正确的大鼠endostatin重组蛋白 ,为下一步进行重组蛋白的活性检测以及临床实验提供了依据。

    2004年06期 351-353页 [查看摘要][在线阅读][下载 47k]
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  • 大肠杆菌重组人成骨蛋白-1的非诱导表达特性

    刘红,潘红春,蔡绍皙,杨红涛,朱列文

    目的 研究大肠杆菌重组人成骨蛋白 1的非诱导表达特性。方法 通过水质、起始pH、接种量、葡萄糖添加量、甘油添加量、装液量、转速等实验研究不同营养条件和培养条件对OP 1非诱导表达的影响。通过传代实验 ,考察该系统OP 1表达的稳定性。结果 水质对OP 1的表达没有明显影响 ,2 %~ 4 %的接种量有利于OP 1的表达 ,起始pH以 6 0为宜。葡萄糖对OP 1的表达有较大影响 ,2 %~ 4 %的葡萄糖添加量可以获得较高表达。甘油的添加能明显促进OP 1的表达 ,最适添加量为 0 3% ,较对照提高表达 81 7%。该表达系统对溶氧的需求不大 ,装液量和转速分别以 12 5~ 15 0ml和 15 0r min为宜。在优化条件下 ,最适表达时间为 2 4~ 2 6h ,OP 1的表达量可达到菌体蛋白的 4 0 %。优化的营养条件和培养条件对本系统OP 1的表达和质粒的稳定有利 ,10次传代可保持 90 %表达。结论 建立了非诱导表达的摇瓶发酵工艺 ,对其非诱导表达特性有了较为深入的了解 ,为进一步放大研究奠定了基础。

    2004年06期 354-357页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
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  • H_5N_1亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆及分子进化分析

    王振国,金宁一,马鸣潇,金扩世,张洪勇,尹革芬

    目的 克隆H5N1 亚型禽流感病毒HA基因并进行分子进化分析。方法 应用RT PCR方法 ,以 2株H5N1 亚型禽流感病毒RNA为模板 ,扩增了HA全基因cDNA。将HAcDNA基因克隆于pUCm T载体 ,并对其进行了测序。结果 所克隆的HA基因全长为 1731bp ,共编码 5 6 8个氨基酸。将该毒株与其它 10株H5亚型禽流感病毒HA基因序列核苷酸及氨基酸进行比较 ,其核苷酸同源性在 80 5 %~ 99 2 %之间 ,氨基酸序列同源性在 89 4 %~98 6 %之间。高致病性毒株HA基因裂解位点存在多个碱性氨基酸插入。结论 为禽流感基因工程疫苗的研制奠定了基础 ,同时通过分子进化分析也揭示了各毒株间的亲缘关系。

    2004年06期 358-360页 [查看摘要][在线阅读][下载 65k]
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  • 应用等位基因特异性扩增法快速检测结核分支杆菌对利福平的耐药性

    范小勇,徐帆洪,胡忠义,赵春女,李忠明,郭盛淇

    目的 建立一套等位基因特异性扩增 (ASA)的检测体系 ,用于结核分支杆菌对利福平耐药性的快速检测。方法 根据结核分支杆菌野生型基因设计ASA特异性引物 ,ASAPCR扩增 39株结核杆菌利福平耐药株的rpoB基因 ,经琼脂糖凝胶电泳检测 ,进而推断利福平的耐药性 ;同时进行DNA序列测定以验证ASA法的检测结果 ,并分析上海地区结核杆菌rpoB基因的突变特点。结果 在 39株利福平耐药株中共检出 36株 ,敏感性为92 3% ;与DNA测序结果的符合率为 87.2 % ,并鉴定了 11种不同类型的 4 1种突变形式 ,其中包括 9种点突变和 2种基因缺失。结论 用等位基因特异性扩增法分析结核分支杆菌的rpoB基因突变具有较高的特异性与敏感性。该法快速、简便、可靠 ,可应用于临床利福平耐药性的检测。

    2004年06期 361-364页 [查看摘要][在线阅读][下载 59k]
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  • 截断型人可溶性CD40L的表达与纯化

    易学瑞,孟凌华,邵光,袁有成,李斌,杨联萍,孔祥平

    目的 表达相对分子质量 180 0 0的截断型人可溶性CD4 0L。方法 针对人CD4 0L(Glu10 8 Leu2 6 1)设计引物 ,以全长人CD4 0L为模板 ,扩增目的基因 ,经pGEM T中间载体进一步连接到pQE 4 0载体 ,构建pQE sCD4 0L表达载体。转化E .coliM15后经IPTG诱导表达 ,分离、洗涤包涵体 ,并利用Ni NTA亲和层析纯化目的蛋白 ,经复性后检测对骨髓瘤细胞SP2 0细胞株的抑制作用。结果 克隆的目的基因为 4 80bp ,经测序与文献报道一致 ,所构建的菌株 (M15 pQE sCD4 0L)经诱导表达目的蛋白量为 2 6 7% ,相对分子质量为 180 0 0 ,纯化后蛋白纯度为96 5 % ,对SP2 0细胞有生长抑制作用。结论 原核表达的截断型人可溶性CD4 0L具有抑制肿瘤细胞生长作用。

    2004年06期 365-368页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k]
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  • 人血浆蛋白C的纯化与鉴定

    沈永才,孙文种,吕茂民,章金刚,倪道明,裴雪涛

    目的 建立人血浆蛋白C的纯化与鉴定方法。方法 利用DEAE SephadexA 5 0代替氯化钡 ,对血浆进行预处理 ,再经DEAE SepharoseFF离子交换和肝素 SepharoseCL 6B亲和层析进行分离纯化 ,用活化的部分凝血活酶时间 (APTT)测定组分活性 ,非还原型SDS PAGE测定其相对分子质量 ,Westernblot鉴定其特异性。结果获得相对分子质量为 6 2 0 0 0的蛋白条带 ,此条带可与人蛋白C单克隆抗体发生特异性反应。结论 已成功地从血浆中分离到蛋白C ,为其规模化生产奠定了基础。

    2004年06期 369-371页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k]
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  • Vero细胞蛋白过敏原性研究

    田博,靳萍,黄浩,丁志芬

    目的 研究Vero细胞蛋白的过敏原性。方法 取不同剂量Vero细胞宿主细胞蛋白和裂解蛋白致敏豚鼠 ,隔日 1次 ,共 3次 ,每组 3只 ,以牛血清及生理盐水分别为阳性及阴性对照 ,末次致敏后 2 1d攻击 ,并观察攻击后的反应。结果 攻击后 30min ,10 0ng 只以上剂量组均出现过敏反应 ,且反应强度与剂量呈正相关。 2 4h各剂量组过敏反应的恢复情况各不相同。结论 Vero细胞宿主细胞蛋白及裂解蛋白均可以引起过敏反应 ,裂解蛋白的反应强度高于宿主细胞蛋白。

    2004年06期 372-373页 [查看摘要][在线阅读][下载 24k]
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  • 重组人纽兰格林生物学活性检测方法及质控标准

    袁力勇,饶春明,郭莹,李响,刘长暖,张翊,王军志

    目的 研究重组人纽兰格林生物学活性检测方法 ,并制定其质量控制标准。方法 采用激酶受体活化的酶联免疫吸附试验 (KIRA ELISA) ,通过优化细胞浓度、样品稀释梯度、药物刺激时间及细胞裂解方法等建立定量测定重组人纽兰格林体外生物学活性的方法 ,同时建立了一套完整可行的质量控制标准。结果 重组人纽兰格林刺激MCF 7细胞表面ErbB2 ErbB3分子磷酸化的反应存在量 效关系 ,相关系数大于 0 98,原液的平均比活性为 85 10U mg± 115 0U mg。并对原液设立肽图、纯度等检测项目 ,对成品设立热原质试验、鉴别试验等检测项目。结论 KIRA ELISA可用于定量检测重组人纽兰格林的体外生物学活性 ,结果准确可靠 ,重复性好 ;建立的方法和标准可以有效控制重组人纽兰格林制品的质量。

    2004年06期 374-376页 [查看摘要][在线阅读][下载 42k]
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  • 新生鼠提取液对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响

    李井涛,薛洪伟,曲绍春,于小风,睢大员

    目的 探讨新生鼠提取液 (NRE)对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响。方法 大鼠皮下注射0 1%肾上腺素 0 2ml后放冰水中浸泡 5min复制急性血瘀模型 ,应用NRE进行治疗 (NRE 2 0和 4 0ml kg每天灌胃给药 1次 ,连续 7d) ,测定大鼠血液流变学各参数变化。结果 急性血瘀模型大鼠全血黏度、血浆黏度、血浆纤维蛋白原浓度、血沉、红细胞聚集指数及红细胞刚性指数均明显降低 ,红细胞电泳时间及红细胞压积则无明显影响。结论 NRE可明显改善急性血瘀模型大鼠血液流变学 ,对于防止动脉硬化的发展及并发症的发生均有益处。

    2004年06期 377-379页 [查看摘要][在线阅读][下载 31k]
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  • 用微载体系统培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液

    王树君,代长海,张莹,王进,李宇辉,胡晓明,李光谱,于洪涛

    目的 采用生物反应器微载体培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液。方法 用 5L生物反应器培养Vero细胞 ,培养至 4d时接种CTN株狂犬病毒 ,在培养全程对细胞生长所消耗的营养物质及代谢产物进行监测及分析。结果 培养 4d后细胞浓度可达 1 2× 10 7cells ml,培养 3周后的病毒液经ELISA检测A值可达 0 2 1~1 0 6。病毒滴度达 10 - 6 0 ~ 10 - 8 0 LogLD50 ml。病毒液可连续收获 5次。结论 用微载体系统培养Vero细胞可生产高滴度的狂犬病毒液。

    2004年06期 380-382页 [查看摘要][在线阅读][下载 33k]
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  • 流感病毒灭活疫苗新型佐剂——壳聚糖增强免疫作用研究

    常海艳,陈建军,方芳,陈则

    目的 检测壳聚糖作为流感病毒灭活疫苗佐剂的效果。方法 将壳聚糖与疫苗混合经腹腔免疫BALB c小鼠 ,间隔 3周 ,免疫 2次。免疫后取血清 ,检测血清中所产生的IgG、IgG1、IgG2a等抗体水平 ,同时 ,取小鼠鼻洗液检测IgA抗体 ;加强免疫后 1周 ,用致死性 (40LD50 )流感病毒A PR 8 34(H1N1)攻击小鼠 ,观察小鼠的体重变化和保护作用。结果 壳聚糖作佐剂能显著增强血清抗体含量 ,并提高小鼠抗病毒攻击的能力。结论 壳聚糖作为流感病毒灭活疫苗的新型佐剂 ,可以增强疫苗的抗体反应。

    2004年06期 383-384+395页 [查看摘要][在线阅读][下载 29k]
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  • 6省市28株钩体菌株血清学检定及2个新型菌株的发现

    秦进才,辛晓芳,薄淑英

    目的 为了解洪涝灾害对钩端螺旋体 (钩体 )病流行菌型的影响 ,在我国钩体病流行比较严重的省市地区进行菌株分离观察。方法 采用经典的显微镜凝集试验和交叉凝集素吸收试验进行血清学分类比较。结果  6省市的 2 8株钩体菌株分属 7个血清群 9个血清型 ,其中发现 2个新的血清型 ,暂定为贺岩型和沅江型 ,代表菌分别为L2 31株和沅江 2 7株。结论 对流行区的 2 8株钩体菌株进行了血清学分类 ,为钩体病的诊断提供了新的依据。

    2004年06期 385-387页 [查看摘要][在线阅读][下载 33k]
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  • 肺炎球菌溶血素提取及其免疫学效果观察

    刘梅影,王建华

    目的 提取 2 3F型肺炎球菌溶血素 (PLY) ,并对其免疫原性、抗原性及保护效果进行初步观察。方法 通过离子交换层析、疏水共价层析和排阻层析 ,从 2 3F型肺炎球菌中提取PLY ,以 2 0 μg的PLY免疫小鼠 (0、14及 2 1d) ,末次免疫后 14d用 2 3F、9V和 2型肺炎球菌从鼻腔粘膜攻击 ,观察保护效果。结果 成功获得PLY ,并能诱导小鼠产生较高水平的相应抗体 ;试验组小鼠存活率显著高于对照组小鼠。结论 PLY具有良好的免疫原性 ,对小鼠具有特异保护作用和交叉保护作用。

    2004年06期 388-390页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k]
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  • 重组人白细胞介素-4融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达的影响因素

    许艳,万敏,程岩,张培因,吴秀丽,王燕媚,王丽颖

    目的 提高人重组白细胞介素 4 (rhIL 4 )在大肠杆菌中的表达量。方法 研究rhIL 4的体外诱导条件 ,包括诱导时间、IPTG浓度、诱导温度、菌体密度对表达量的影响。结果 最佳表达条件是诱导时间为 4h ,诱导温度为 4 2℃ ,A6 0 0 为 0 7~ 1 0 ,而IPTG的浓度对表达量无显著影响。结论 诱导时间、诱导温度和菌体密度的优化能提高外源基因在大肠杆菌中的表达产量。

    2004年06期 391-392页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k]
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  • 第5批百日咳疫苗效力国家标准品的建立

    侯启明,张庶民,田博,梁雅文,张路民,项美娟,黄佐林,肖詹荣,付春晖,郑晓丽,刘志强,孟丽,李松,金于兰,冯洁,朱丽萍,宋继萍

    目的 建立第 5批百日咳疫苗效力国家标准品。方法 选用百日咳菌株 (编号 5 80 0 4 ) ,采用B G培养基固体培养 ,将培养的百日咳菌液经脱毒灭活后分装冻干。以WHO的效力标准品 # 3和中国效力标准品 # 4为标准进行协作标定。结果 该标准品经 7个实验室协作标定 6 3次 ,最终合并效价为 14IU ml(95 %CI=13 10 9~15 32 0 )。结论 第 5批百日咳疫苗效力标准品各项指标均符合要求 ,可以作为新的国家百日咳效力标准品使用 ,效价拟定为 14IU ml。

    2004年06期 393-395页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • SARS特异性免疫球蛋白的制备及相关指标的检定

    白坚石,王威,杨鹏云,郝杰,陈继庭

    目的 分析人SARS特异性免疫球蛋白的抗体效价和S D病毒灭活残留物含量。方法 采用ELISA和蚀斑实验 ,检测SARS康复患者血浆及免疫球蛋白制品的SARS病毒IgG抗体和中和抗体效价 ;以HPLC和气相色谱检测制品中TritonX 10 0和TNBP残留量。结果 由多人份SARS康复患者混合血浆制备的静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白样品IgG抗体和中和抗体效价提高 5倍以上 ;TritonX 10 0和TNBP残留量均低于规定值。结论 经S D病毒灭活的静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白符合现行规程要求。

    2004年06期 396-397页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k]
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  • 抗SARS-CoV鸡卵黄免疫球蛋白的制备

    聂荣庆,胡国柱,张进,吴东风,杨华英,文珠,段淑敏,张智清

    目的 制备抗SARS CoVIgY ,以期用于预防SARS CoV感染和阻止SARS传播。方法 用灭活的SARS CoV免疫产蛋母鸡 ,水稀释法提取IgY ,SDS PAGE检测IgY纯度 ,ELISA检测IgY抗SARS CoV的特异性和效价 ,中和试验检测中和效价。结果 灭活SARS CoV能诱导产蛋母鸡产生抗SARS CoVIgY。IgY纯度达 4 1 6 %。ELISA效价达 1∶2 0 4 8 mg蛋白 ,中和效价达 1∶5 12。结论 灭活的SARS CoV免疫产蛋母鸡能够产生高效价的特异性抗SARS CoVIgY ,并能中和SARS CoV病毒。

    2004年06期 398-399页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • SARS冠状病毒空斑技术的建立和应用

    安祺,董关木,刘文雪,杨立宏,孔艳

    目的 建立SARS病毒空斑形成试验 ,用于病毒滴定和中和抗体检测。方法 用Vero E6细胞接种6孔塑料细胞培养板 ,加两层含琼脂糖培养基 ,以中性红为染色剂建立空斑试验 ,以能减少 5 0 %的空斑为标准 ,测定抗SARS中和抗体。结果 应用空斑试验能稳定清晰地形成SARS病毒特异性空斑 ,可用于病毒滴定、抗SARS病毒抗体的测定和疫苗效力的检定。结论 为正确滴定病毒、检测中和抗体、评价疫苗的有效性提供了依据

    2004年06期 400-402页 [查看摘要][在线阅读][下载 28k]
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  • 抗金黄色葡萄球菌IgY的功能性试验

    陈均华,杨丽风

    目的 观察抗金黄色葡萄球菌IgY的生物学效应及稳定性。方法 将金黄色葡萄球菌稀释至适宜浓度 ,用微量凝集法测定IgY抗体的生物学效应及稳定性。结果 抗体IgY(10mg ml)溶液能明显抑制金黄色葡萄球菌生长 ,且能使感染性病灶症状消失 ,治愈病灶局部未检出葡萄球菌。抗体IgY在 2 5℃、37℃条件下活性稳定 ;巴氏消毒 6 4℃条件下 15min活性下降 4 0 % ,15min以后迅速下降 ;70℃作用 15min活性下降 70 % ;在pH4 0~ 7 9环境中活性改变不显著。结论 抗金黄色葡萄球菌IgY具有很好的生物学效应和高度稳定性。

    2004年06期 403-404页 [查看摘要][在线阅读][下载 16k]
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  • 采用可溶性噻唑盐WST-8检测细胞病变

    何春艳,周琳婷,陈延,赵春女,徐帆洪

    目的 建立一种简便和客观的检测细胞病变的方法。方法 活细胞代谢过程中 ,可溶性噻唑盐WST 8在电子载体 1 MethoxyPMS存在时被还原形成的可溶性甲染料 ,通过读取A4 50 6 30 间接检测活细胞的个数 ,可用于细胞病变的检测。将WST 8法用于rhIFN α1b效价的检测 ,并与结晶紫法和常规镜检相比较。结果 相关性研究表明在一定细胞浓度范围内 (2 0 0~ 5 5 0 0 0细胞 孔 )Wish活细胞个数与A4 50 6 30 值呈线性相关 ,相关系数为 0 998。WST 8法检测rhIFN α1b的效价结果与结晶紫法和常规镜检结果基本一致 ,相关系数分别为 0 911(P <0 0 0 1)和0 94 5 (P <0 0 1)。结论 WST 8法适用于以微量细胞病变法为基础的溶细胞型病毒滴度检测及抗肿瘤或抗病毒药物效果的检测

    2004年06期 405-407页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的稳定性

    朱为,毕慧,黄帼英,金铭

    目的 观察A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的稳定性。方法 疫苗放不同温度和不同时间后 ,用乙醇沉淀法测定A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的游离多糖含量 ,SepharoseCL 4B凝胶层析法测定分子大小。结果液体疫苗放置 2~ 8℃ 9个月 ,游离多糖含量为 30 %以上 ;4℃放置 18个月 ,Kd <0 2的多糖回收率 <6 0 %。冻干疫苗放置 2 5℃和 37℃ 12个月 ,或放置 2~ 8℃ 18个月 ,游离多糖含量均不高于 2 5 % ,Kd <0 2的多糖回收率 >6 0 %。结论 冻干A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗具有良好的稳定性。

    2004年06期 408-409页 [查看摘要][在线阅读][下载 31k]
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  • 不同采食方式对昆明小鼠寿命的影响

    刘殿峰,刘秀霞,张静旭,杨淑萍,刘淑霞

    目的 观察不同采食方式对昆明小鼠寿命的影响。方法 在昆明小鼠繁殖群中 ,随机抽取 180只2 1日龄雌雄各半小鼠 ,根据不同采食方式分成 3个组 ,观察其寿命长短。结果 正常采食组平均寿命 (5 82 5 0±177 73)d ,限食采食组平均寿命 (730 2 5± 16 7 39)d ,自由采食组平均寿命 (5 4 8 75± 14 8 6 6 )d。总体平均 (6 2 0 0 0±16 4 5 9)d。自由采食组与正常采食组差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,限食采食组比自由采食组和正常采食组寿命长 ,且差异有显著意义 (P <0 0 0 1)。雄性鼠比雌性鼠寿命长 ,且差异有显著意义 (P <0 0 0 1)。结论 采食方式明显影响昆明小鼠的寿命

    2004年06期 410-411页 [查看摘要][在线阅读][下载 20k]
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  • 森林脑炎纯化疫苗实验室检定及人体Ⅰ期临床观察

    宋宗明,董关木,洪成龙,安祺,刘双军,赵洪丽,惠连,韩亮

    目的 进行森林脑炎纯化疫苗实验室检定、人体反应及血清学效果观察。方法 按 2 0 0 0年版《中国生物制品规程》要求对森林脑炎纯化疫苗进行全面的实验室检定 ,并按国家药品监督管理局临床研究批件的要求进行Ⅰ期临床观察。结果 疫苗经异常毒性试验、热原质试验、致敏性试验及有害物质检查均合格 ;并具有很好的免疫原性 ,小白鼠的免疫保护指数大于 5 0× 10 5。 2 0名志愿者接种疫苗后无一例出现局部反应和全身反应 ,且血清中和抗体全部阳转。结论 森林脑炎纯化疫苗安全性可靠 ,可继续进行Ⅱ Ⅲ期临床观察。

    2004年06期 412-413页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k]
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  • 干扰素鼻腔给药系统的研究进展

    郭桥,陈爽,盛军

    干扰素鼻腔给药系统是目前研究的热点。干扰素作为细胞因子被用来治疗 30多种疾病 ,其鼻腔内给药可预防和治疗呼吸道病毒感染 ,如病毒性感冒和病毒性肺炎等。鼻腔局部给药使干扰素通过和鼻粘膜上的相应受体结合而得到良好的吸收 ,具有吸收迅速、完全 ,能避免肝脏首过效应等优点 ,扩大了干扰素的应用范围 ,减少毒副作用的发生。

    2004年06期 414-416页 [查看摘要][在线阅读][下载 32k]
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