中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 《中国生物制品学杂志》第三届编辑委员会委员名单

    <正>主 编 章以浩副主编 向建之 林崇哲 盛 君编 委(按姓氏笔划为序)

    2002年02期 2页 [查看摘要][在线阅读][下载 27k]
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  • 系列鼠抗CD分子单克隆抗体轻、重链可变区基因的克隆和序列分析

    张爱华,闭兰,王志友,张囡,左建民,赵良,沈韬,周玉柏,孙可芳,金玉玲,陈敬,史良如

    目的 获取系列鼠抗人CD分子单抗的轻链及重链可变区基因并进行克隆和测序。方法 采用RT-PCR技术,从WuT4、WUT3、WuTac、WuLCA、WuT9杂交瘤细胞总RNA中分别扩增出轻链和重链可变区基因,进行克隆并作核苷酸序列分析。结果 以上几种抗体的轻重链可变区的 PCR产物大小均为 400bp左右,成功构建了pMD18-T-VL和 pMD18-T-VH克隆载体,经限制性酶切分析,其大小与预期结果相符,并按ABI PRLSM BigDye系统测序。结论 经与Kabat、Blast抗体基因同源数据库比较,所获基因片段均为抗体基因。

    2002年02期 65-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 685k]
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  • 幽门螺杆菌热休克蛋白60基因的克隆及序列分析

    白杨,张亚历,王继德,李淑琴,张兆山

    目的 获取人幽门螺杆菌热休克蛋白60基因(Hsp60),并将它克隆到质粒 pET-22b(+)中进行核苷酸序列分析。方法 利用 PCR技术扩增 Hsp60,并将其定向插入 pET-22b(+)载体中,通过 DNA序列分析仪进行核苷酸分析。结果DNA序列分析表明,所克隆的Hsp60基因序列与GeneBank公布的一致。结论 获得了序列正确的Hsp60基因,为其重组表达及相关研究奠定了基础。

    2002年02期 69-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 569k]
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  • 应用毕赤酵母表达中国株HIV-1核心蛋白Gag

    江文正,金宁一,王宏伟,金洪涛,张应玖,王海燕

    目的 构建含HIV-1Gag全长基因的重组酵母表达质粒pPICGAG,并在毕赤酵母中进行表达。方法用Not I和XhoI将含HIV-1 Gag全长基因的质粒pKSGAG双酶切后,克隆到酵母表达载体pPIC9中,构建了重组表达质粒 pPICGAG。pPICGAG用 SacI线性化后,电转化毕赤酵母 GS115,PCR鉴定阳性酵母转化子,并分别将PCR阳性的酵母转化子在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果 酵母转化子的整合率为72.7%。SDS-PAGE结果显示表达蛋白的相对分子质量为55000左右,与预计计算的值相同。Western blot结果显示表达蛋白能与单克隆抗体发生特异性反应。结论 在毕赤酵母中成功地表达了HIV-1核心蛋白Gag,且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性。

    2002年02期 72-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 1678k]
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  • 在大肠杆菌K99(中国QH株)菌毛形成亚单位基因(fanC)的克隆和测序中发现IS1 插入序列

    陈溥言,杜念兴,赵国屏,成志恒,邓芳,杨胜利,刘永庆

    目的 构建大肠杆菌K99菌毛表达载体。方法 通过逐级亚克隆的方法克隆k99菌毛形成亚单位基因(fanC),并进行序列测定和fanC亚单位的抗原决定簇模拟,以确定突变部位。结果 克隆了包括K99菌毛形成亚单位基因(fanC)和部分fanD基因在内的一段基因,该基因与国外报道相比明显偏大。序列测定表明:在fanC尾部多出 24bp,在fanC与 fanD,的结合部有一 800bp左右的新基因。经与基因库中大肠杆菌基因作同源性比较发现,该新基因为768bp的插入序列IS1。其他基因为K99自身fonC与fanD片段之间的过渡基因。IS1的插入未改变fanD,基因的阅读框架,只是使fanD片段末端增加了 8个氨基酸。fanC亚单位的抗原决定簇模拟结果显示,K99 fanC片段具有一个非常突出的亲水区域,根据经验它应是抗原决定簇所在的部位。结论 首次发现大肠杆菌K99基因中含有插入序列IS1。

    2002年02期 75-78+86页 [查看摘要][在线阅读][下载 1013k]
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  • 重组人干扰素γ的分子结构及其生物活性

    童葵塘,金梅,钱春宏,张智清

    目的 了解重组人干扰素γ的分子结构及其生物活性。方法 采用细胞病变抑制法,以日本干扰素γ参考品为标准,计算国际单位。以4种不同方法检测相对分子质量。结果 比活性≥3.0×107 IU/mg蛋白,相对分子质量低于理论值16900。氨基酸分析结果只有129个氨基酸,少于应有数目。N端氨基酸序列分析结果,15-19个氨基酸与理论序列相符。结论 重组人干扰素γ C末端氨基酸有缺失,但不影响其生物活性。

    2002年02期 79-80页 [查看摘要][在线阅读][下载 142k]
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  • 四株狂犬病街毒的免疫学特性

    吴杰,徐葛林,郑新雄,吴泰才,朱家鸿

    目的 研究国内分离的4株狂犬病街毒的免疫学特性。方法 采用免疫力试验及中和试验进行抗原性及免疫原性检测。结果4株街毒抗原性存在一定差异,应用aG株疫苗免疫小鼠能保护4株街毒的攻击。结论aG疫苗与4株街毒具有良好的交叉免疫性。

    2002年02期 81-82页 [查看摘要][在线阅读][下载 118k]
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  • 在无血清培养基中代谢副产物对杂交瘤细胞生长代谢的影响:Ⅱ.氨的作用

    张立,金亦辉,张元兴

    目的 在无血清培养基中,研究氨对杂交瘤细胞生长代谢的影响。方法 在培养基中添加不同浓度的氨,考察细胞生长和代谢及单抗生成的变化。结果 添加0.8mmol/L)的氨时就对细胞生长和代谢有影响,当氨浓度达4mmol/L时,对细胞的生长代谢有明显的抑制,当培养基中氨浓度高于6mmol/L时,细胞生长停止,代谢受到严重影响。氨的添加降低了培养上清中的单抗浓度,但提高了单抗的比生产速率。结论 氨对细胞生长和代谢有较大的影响,对单抗浓度的影响主要由细胞密度降低造成,单抗的比生产速率增加。

    2002年02期 83-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 236k]
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  • 肾综合征出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗纯化方法的研究

    韩亮,王琪,冉姝,赵丽红,惠连,王晓宏,回良杰,赵健,马军,郝富勇,王伟,姜惠贤

    目的 建立简便、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法。方法 采用超滤浓缩、醋酸锌沉淀和柱层析(亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析)等方法,对出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗进行提纯对比试验。结果 用超滤浓缩和Sepharose 4FF凝胶柱层析或用醋酸锌沉淀和凝胶柱层析,纯化的疫苗均可达到质量标准,而用 cellufine sulfate gel亲和层析和离子交换层析均不理想。结论 建立了经济、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法。

    2002年02期 87-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 222k]
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  • 牛神经生长因子的研制

    林刚,徐诗嘉,杨帮玲,林娜,宋颖

    目的 寻找新的制备神经生长因子的材料和方法。方法 利用牛精液为原料,进行两次阳离子交换层析。结果 获得了纯的牛神经生长因子,相对分子质量为30000,比活性为400000BU/mg,FPLC检测结果为一个峰,电泳检测纯度大于95%。结论 可以从牛精液中制备神经生长因子。

    2002年02期 91-92+121页 [查看摘要][在线阅读][下载 655k]
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  • 大肠杆菌L- 天冬酰胺酶的分离纯化及其特性

    刘红,潘红春,钟世荣

    目的 建立简单有效的L- 天冬酰胺酶分离纯化工艺,研究L-天冬酰胺酶的特性。方法 采用冷丙酮破壁处理,经稀碱液抽提、离子交换层析和亲和层析进行纯化。通过温度试验、pH试验、SDS-PAGE图谱、紫外吸收光谱等研究酶的特性。结果 建立了简单高效的纯化工艺,可使L-天冬酰胺酶的纯度达94.4%,比活为520u/mg蛋白,总收率为65.7%。L-天冬酰胺酶的相对分子质量分别为143900和166700,均为有抗癌活性的EC-2组分,在270nm有最大吸收。最适作用温度为40-50℃,最适作用州为8.0-9.0在40℃以下能保持稳定。结论建立了大肠杆菌L-天冬酰胺酶的分离纯化工艺,并研究了L-天冬酰胺酶的酶学特性。

    2002年02期 93-96页 [查看摘要][在线阅读][下载 823k]
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  • 全国第一届现代免疫诊断技术学术研讨会征文通知

    <正>免疫诊断技术是现代临床检验和生命科学研究的重要手段之一,为加强国内外研究经验的交流和促进我国免疫诊断技术的发展,由中华医学会微生物学和免疫学分会与中华预防医学会生物制品分会主办召开全国第一届现代免疫诊断技术学术研讨会,大会将邀请国内外知名专家作大会专题报告。同时欢迎各大专院校、研究单位、医院、血站、卫生防疫及检疫单位、食品工业及化妆品业、环保及兽医药部门等的专家和技术人员踊跃投稿参会,会议将对论文择优在中华微生物学和免疫学杂志(增刊)发表并按规定纳入学会继续教育计划。现将有关事宜通知如下:

    2002年02期 96页 [查看摘要][在线阅读][下载 77k]
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  • 聚乙二醇修饰牛血红蛋白制备红细胞代用品的初步研究

    白坚石,卜凤荣,李松,胡远东

    目的 探讨mPEG名选择性修饰异源血红蛋白,制备红细胞代用品的可能性。方法 使用mPEG 修饰牛血红蛋白,分析其对牛血红蛋白理化性质的影响。结果 平均偶联程度达到30%,导致牛血红蛋白的电泳迁移率,吸收光谱、粘度和胶体渗透压改变。结论 尽管还有很多问题需要解决,mPEG修饰牛血红蛋白制备红细胞代用品具有深入研究的价值。

    2002年02期 97-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 1595k]
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  • 关于举办全国生物医学统计学培训班的通知

    <正>中华医学会杂志社、中国生物统计学会和军事医学科学院情报研究所,将联合举办统计学培训班。特邀请军事医学科学院医学统计学教研室主任胡良平教授主讲,同时欢迎报名参加培训班的人员参与研讨,即将自己在工作中遇到的统计学问题做成PowerPoint幻灯片,以便现场解决,学以致用。

    2002年02期 100页 [查看摘要][在线阅读][下载 80k]
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  • 预防O139霍乱B亚单位/全菌体口服疫苗的研究

    刘传暄,马清钧,张艳红,方宏清,于秀琴,李生迪,张萍,陈志宏,王秉瑞,袁佩娜,贾丽君,董思国,陈天游

    目的 研制预防O139霍乱的B亚单位/全菌体口服疫苗。方法 应用重组霍乱毒素B亚单位及福尔马林灭活的O139霍乱弧菌全菌体,构建成B亚单位/全菌体疫苗,并进行安全性及免疫原性检测。结果 经连续3天大剂量灌喂小鼠后,未见体重下降、发病或死亡现象。全部小鼠均健康活存。以腹腔或口服免疫小鼠后,均能产生外周血或肠道局部高滴度的特异抗体。免疫小鼠对O139活菌攻击有良好的保护作用。结论B亚单位/全菌体口服疫苗在小鼠试验中安全性及免疫原性良好。

    2002年02期 101-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 978k]
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  • 应用实时荧光定量PCR检测机采献血者HCV

    张伯伟,邢培清,岳维海

    <正>《中国输血技术操作规程》规定,献血者必须进行酶联免疫(ELA)方法HBsAg、抗- HCV、抗- HIV检测。而抗- HCV检测的窗口期为70天,就目前的检测方法不可避免地要出现漏检。采用PCR方法检测病毒核酸,可将窗口期缩短到13天。常用PCR方法操作复杂,且不能进行定量检测。我们采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,省去了电泳照相分析等一系列过程,同时采用先进的分析软件进行分析,提高了检测结果的准确性。

    2002年02期 104页 [查看摘要][在线阅读][下载 63k]
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  • 应用U937细胞泡沫化模型检测人血高密度脂蛋白生物学功能

    侯继锋,程雅琴

    目的 准确检测人血高密度脂蛋白(HDL)的生物学功能。方法 采用U937细胞泡沫化模型,检测HDL逆向转运细胞内胆固醇(Ch)的生理功能。用 Brad Ford方法检测蛋白质(Pro)含量,Ch试剂盒检测细胞内 Ch含量,并比较不同剂量HDL转移出细胞内Ch的量。结果 在一定的HDL浓度范围内相关性好(r≥0.98),重复性高(CV=6.l%),回收率为91.8%-110.5%。结论 该方法能更直观地反映HDL转运胆固醇的功能。且具有使用人源细胞、操作简便和易于推广应用的特点。

    2002年02期 105-106页 [查看摘要][在线阅读][下载 135k]
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  • 发酵温度对重组工程菌生长密度和干扰素表达的影响

    王树君,郭德本,陈维佳,代长海

    目的 观察发酵温度对重组人干扰素α2a。(IFNα2a)工程菌PBV888/DH5α。生长密度和表达的影响。方法 采用NBS-40L发酵罐,在发酵过程中调整培养温度,检测工程菌的生长密度和IFN表达量。结果 经35℃培养至对数期,降温至30℃继续培养2-3h后升温至42℃进行诱导培养,连续实验3批次,平均生长密度A值为35.0,菌体湿重47g/L,IFN表达量为28×106IU/ml。结论 确立了工程菌生长和IFN表达的最适培养温度。

    2002年02期 107-108页 [查看摘要][在线阅读][下载 138k]
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  • 国内第一部有关疫苗学研究进展的专著──《当代新疫苗》出版发行

    <正>由李忠明任主编,张延龄、徐德启、杨晓明任副主编的《当代新疫苗》一书,已于2001年11月,由高等教育出版社出版发行。作为《当代科学前沿论丛》系列丛书之一,该书由34位国内外的专家学者结合自己在长期从事新疫苗研究和开发过程中积累的丰富知识和经验编写而成,并经19位国内疫苗研制方面的专家、教授、院士审阅,是国内第一部有关疫苗学研究进展的专著。

    2002年02期 108页 [查看摘要][在线阅读][下载 76k]
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  • 应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白

    李长贵,周铁群,王剑锋,邱平

    目的 应用ELISA 竞争(cELISA)法检测残余牛血清白蛋白(ESA)。方法 以BSA免疫家兔,获得高滴度的抗BSA血清;以BSA包被酶标板作为固相抗原,以梯度稀释的BSA为游离抗原,二者竞争结合抗体,以游离抗原浓度对数作为横坐标,相应吸收值为纵坐标作标准曲线,由对应样品的吸收值,可以求得样品中BSA含量。结果 当检测200、50、20和5ng/ml样品时,其试验内变异系数分别为4.5%、7.8%、5.8%和 14%,试验间变异系数分别为3.4%、8.8%、3.3%和30%。本试验还证明人血清白蛋白与牛血清白蛋白的交叉反应较低。结论cELISA可初步用于疫苗中残余BSA含量的检测。

    2002年02期 109-110页 [查看摘要][在线阅读][下载 128k]
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  • 戊型肝炎病毒感染的恒河猴急性期粪便中病毒的分离与鉴定

    卜晓萍,沈荣,蒋琳,翟雷,沈心亮

    目的 研究准确、快捷、敏感的成型肝炎病毒的分离及鉴定方法。方法 采用蔗糖密度梯度离心法从感染成型肝炎病毒的恒河猴急性期粪便中分离病毒,采用免疫电镜吸附法和ELISA相结合方法进行鉴定。结果 检出率高,重复性好。结论 为戊肝病毒组织培养及进一步研究奠定基础。

    2002年02期 111-112页 [查看摘要][在线阅读][下载 745k]
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  • 疫苗动力学模型的拟合方法

    罗凤基,董春明,迮文远

    <正>在疫苗动力学研究中,常需用数年随访观察的实测数据拟合出一个最适模型,以概括全部实测数据的信息,并预测在随访时间外的抗体水平及其变化趋势。本文所介绍的是如何根据实测数据,用最小二乘法拟合出最适的疫苗动力学模型。

    2002年02期 113-115页 [查看摘要][在线阅读][下载 184k]
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  • 接种麻疹疫苗引发重症多形性红斑1例

    郭业海

    <正>1.发病与诊治史某,男,23月龄,莱芜市城区某村人。1998年12月23日下午间时,于左上臂三角肌皮下接种麻疹疫苗0.2ml。当晚22时,口周皮肤出现米粒大小红色斑丘疹,略有水肿,自觉瘙痒,经常搔抓。村卫生室给予柴胡、扑尔敏、氟轻松等药物治疗效果不佳,皮疹逐渐增大、增多。遂于12月27日就诊于驻泰安某部医院。查体发现小儿一般情况尚可,全身皮肤

    2002年02期 115页 [查看摘要][在线阅读][下载 75k]
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  • 甲型和乙型肝炎疫苗计划免疫管理模式及实施效果

    陈宏平,潘会明,贺会清,张忠林,饶蕾

    目的 为了有效控制甲型和乙型肝炎病毒的感染和发病,提高下一代人群免疫力。方法 根据甲型肝炎和乙型肝炎的流行病学及免疫学特征,结合我市人群免疫状况,制订了一套切实可行的甲型和乙型肝炎疫苗计划免疫管理模式,对接种对象、免疫程序、接种剂量与方法、运转方式、疫苗供应、统计与报表等内容进行了科学、系统地要求,并通过全市计划免疫网络组织实施。结果 通过管理模式的实施,疫苗接种建卡(簿)率达到99.52%,建证率达到98.34%;甲型肝炎疫苗接种率达到96.25%,乙型肝炎疫苗三针全程接种率达到98.30%。实施前后对比,甲型肝炎发病率从289.68/十万下降到21.35/十万,下降了92.63%;乙型肝炎发病率从200.37/十万下降到 70.94/十万,下降了64.60%;血清中抗-HAV阳性率由 33.80%上升到 91.57%,抗-HBs阳性率由 42.72%上升到88.76%;从1998-2000年,我市幼儿园、学校等儿童聚集单位未出现甲型和乙型肝炎的暴发疫情。结论 收到了明显的社会效益,也进一步促进和扩大了我市计划免疫与疾病控制工作。

    2002年02期 116-118页 [查看摘要][在线阅读][下载 217k]
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  • 蛋白质亚单位疫苗的前沿设计

    瞿爱东

    <正>疫苗的产生对人类健康的保障起着重大作用。从历史的角度而言,疫苗应用先于对免疫系统本身认识,并帮助人们对该系统进行深人的了解。随着科学的发展,特别是医学生物学、分子生物学以及用上述方法对人类较相近动物一小鼠的动物模型研究

    2002年02期 119-121页 [查看摘要][在线阅读][下载 261k]
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  • 3R理论的形成、发展及在生命科学研究中的应用

    贺争鸣,李冠民,邢瑞昌

    <正>一、3R理论的形成及发展3R是Reduction(减少)、Replacement(替代)和Refinement(优化)的简称。

    2002年02期 122-124页 [查看摘要][在线阅读][下载 295k]
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  • 开发天然药物 促进人类健康

    刘晓宇,江波

    <正>2001年 12月 11日,中国正式加入世界贸易组织(WTO) 这是中国经济发展中的重大转折点。但我们必须清楚地认识到,加入WTO后,我国的医药产业将面临严峻的考验。目前,国内的化学药品多

    2002年02期 125-128页 [查看摘要][在线阅读][下载 363k]
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