中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 甲型肝炎病毒(H2株)快速适应变异株全基因序列分析

    胡凝珠,施海晶,胡云章,瞿素,邵聪文,刘国栋

    目的 探索甲型肝炎病毒(H2株)细胞适应的分于机制。方法 将甲型肝炎减毒活疫苗毒株(HAV H2K7)在人胚肺二倍体细胞KMB17上快速连续传代增强适应(14d),检测连续传代后抗原滴度和感染性滴度,测定 第18代(HAV H2K7P18)全基因组序列。结果 适应至第18代抗原滴度达1:512,感染性滴度为7.5LogCCID50/ml。 整个基因组出现了10个核苷酸突变,变异卒为0.13%,变异较大区域位于5’末端非编码区(5’UTP),有3个核苷酸 变异。编码区7个交变,2个是无义突变,5个有义突变导致5个氨基酸变化,分别位于 VP2 A-S;2C,Q-P;3A,R- C;3C,T-A和3D,V-G。结论 HAV H2K74因组5’UTR、2C区、3A区、3C区和3D区变异协同作用促进在 KMB17 细胞上快速增强适应。

    2001年04期 193-196页 [查看摘要][在线阅读][下载 226k]
    [下载次数:76 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:12 ]
  • 甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)不同间隔时间加强免疫的效果

    庄昉成,忻亚娟,钱汶,毛子安,姜器,於平,李丽,柴少爱

    2001年04期 196页 [查看摘要][在线阅读][下载 52k]
    [下载次数:29 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:4 ]
  • 绿色荧光蛋白和白介素-2在卡介菌中的共表达

    曾星,梅玉屏,杨明,黄羽,谭敏

    目的 构建能复合表达绿色荧光蛋白和白介素-2重组卡介菌(rBCG0GFP-IL-2)。方法 采用基因 工程技术构建pDmGFP-IL-2重组穿梭质粒,用电穿孔法将重组质粒pDMGFP-IL-2转化大肠杆菌和卡介菌中,采用限制酶 切,荧光显微锐下观察及PCR方法鉴定 pDmGFP-IL-2和 rBCG-GFP-IL-2。结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示 pDmGFP-11.2质 粒的限制酶切条带,PCR法检测重组BCG菌株可见明显IL-2片段扩增条带约0.3kb,rBCG-GFP-IL-2液体培养菌液在长 波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光,小鼠皮下接种rBCG-GFP-IL-2.1周后,取组织冰冻切片在荧光显微镜下可见 绿色荧光。结论 成功构建了重组质粒pDmGFP-IL-2和共表达绿色荧光蛋白和白介素-2重组BCG(rBCG-GFP-IL-2)。

    2001年04期 197-199页 [查看摘要][在线阅读][下载 837k]
    [下载次数:78 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:4 ]
  • 血栓调节蛋白核心片段的基因克隆、表达及鉴定

    张淑敏,王学谦,李增刚,董峥,闫丽娜,安士萍

    目的 获得血栓调节蛋白及其核心片段,以便研制临床诊断治疗制品。方法 应用PCR获得血栓 调节蛋白EGF4~6的基因片段,构建克隆载体EGF4-6/PY和表达载体EGF4-6/PBV220),表达血栓调节蛋白EGF4-6。结果 原核细胞表达量约占菌体可溶性蛋白的12%,经KPTT试剂盘检测具有生物学活性。结论 为进一步 研究临床诊断治疗制剂创造了条件。

    2001年04期 200-203页 [查看摘要][在线阅读][下载 860k]
    [下载次数:36 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ]
  • 新型精制三价流行性感冒灭活疫苗在长春生物制品研究所投产新闻发布会在京举行

    王立成

    2001年04期 203页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k]
    [下载次数:10 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:7 ]
  • 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒核蛋白合成基因的表达及应用

    应贤平,郁庆明,吴腾捷,李朝选,程鹏飞,宋虹,赵春女,吴文鹃,陈延,郭盛淇,仲伟鉴,肖萍,郑勇英

    目的 用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)或其他方法重组蛋白抗原, 用于LCMV感染的诊断。方法 采用Prosis软S件对LCMV核蛋白(Np)全长氨基酸序列进行亲疏水性分析,合成LC- MV sRNA第1816-2178位核苷酸序列编码的Np第380~500位氨基酸基因,克隆在His-tag pET-28a融合表达,表 达产物经固定化金属配体亲和层析纯化,建立ELISA检测试剂。结果 表达产物主要以包涵体形式存在,表达量 达20%以上。表达产物经Ni-NTA-Agarose纯化后纯度达到90%以上。经检测93份人血清.有6份病毒抗体阳 性,阳性率为6.5%(6/93),与全病毒抗原检测结果7.5%(7/93)相近。结论 用合成基因表达产物取代LCMV抗原 检测病毒抗体,不仅可以消除病毒传播可能,而且特异性强。为LCMV感染诊断及生物材料质量控制提供有效方 法。

    2001年04期 204-207页 [查看摘要][在线阅读][下载 1061k]
    [下载次数:86 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:5 ]
  • 流行性乙型脑炎病毒减毒株at222的生物学特性

    李玉华,胁田隆,保井孝太郎

    目的 分析乙型脑炎病毒减毒株at222生物学特性,并与亲代野生强毒株AT21进行比较。方法 at222株和 AT31株在伊蚊细胞C6/36上繁殖,培养上清用作病毒液,在Vero细胞上以病毒蚀斑法测定病毒滴度,以 小鼠脑内感染法测定其神经毒力。结果at222株在蚊细胞上生长缀慢,但仍可达到与其亲代强毒株相似的滴度, 即l08PFU/ml。在Vero细胞上形成蚀斑比其亲代野生强毒株AT31明显小,脑内感染小鼠不致死,而ADI株却表现 出了极强的神经毒力。结论 对乙型脑炎病毒减毒株出at222的生物学特性进行了全面分析,为研究和开发乙型脑炎 疫苗提供理论依据。

    2001年04期 208-209页 [查看摘要][在线阅读][下载 359k]
    [下载次数:46 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:12 ]
  • 聚乙二醇活性酯对干扰素α_(2b)化学修饰的初步研究

    刘丽军,赵丽纯,朱迅,石晓丽,刘丹,张岩,张雪梅,盛军

    目的 探讨聚乙二醇活性酯(mPEG-ssMW 5000和MW 20000)修饰重组人干扰素α2b(rhIFN α2b)的 最佳反应条件。方法 在不同反应条件下,用聚乙二醇活性酯修饰rhIFNα2b,采用VSV-Wish细胞病变抑制法测定 修饰后rhIFNα2b的生物学活性。结果 随着 PEG对rhIFNα2b摩尔比的增加或修饰反应时间的延长,rhIFNα2b的修怖产 物相对分子质量和不均一性增加,且随着rhIFNα2b修饰度的提高,其生物学活性逐渐降低。结论 初步确立了PEG 修饰rhIFNα2b的反应条件,反应印尔比与聚乙二醇活性酯的相对分子质量是影响反应的关键因素。

    2001年04期 210-212页 [查看摘要][在线阅读][下载 497k]
    [下载次数:122 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:14 ] |[阅读次数:9 ]
  • Vero、CHO和杂交瘤细胞在生物反应器中的生长和代谢

    孙明波,张丽旌,廖国阳,李国良,姜述德

    目的 研究Vero、CHO和杂交瘤细胞在生物反应器中的生长和代谢。方法 应用搅拌式生物反应 器,培养了Vero、CHO和鼠杂交瘤7H3细胞,对营养物质及代谢产物进行定量分析.测定各个培养中发酵相关参数。 结果 培养过程中葡萄糖和谷氨酰胺的摄取与培养液中两者的浓度正相关。控制营养物质的加入可提高细胞产 量。结论Vero、CHO和7H3细胞在生物反应器培养中有相同的生长和代谢模式。

    2001年04期 213-216页 [查看摘要][在线阅读][下载 216k]
    [下载次数:331 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:12 ]
  • 葡萄糖、丁酸钠和乳酸对重组CHO细胞表达EPO糖基化的影响

    吴明强,孙祥明,张元兴

    目的 研究葡萄糟、丁酸钠和乳酸对CHO细胞表达的重组人红细胞生成素(EPO)糖基化的影响。 方法 将重组CHO细胞在添加一定浓度的葡萄糖、丁酸钠和乳酸的培养基中培养,从收获上清中分离纯化EPO,定 量测定其唾液酸含量和分析其糖基化位点占有率。结果 在实验范围内,葡萄槽对糟基化影一较小;丁酸钠明显 降低了唾液酸含量,但使N-连接寡糖的位点占有卒略有增加;L-乳酸的作用相反,高浓度的乳酸增加了唾液酸 含量,N-连接寡糖的位点占有率略有降低。结论 丁酸钠和乳酸对重组CHO细胞表达的人EPO的糖基化有明显 影响,葡萄糖的作用较小。

    2001年04期 217-220页 [查看摘要][在线阅读][下载 934k]
    [下载次数:311 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:10 ]
  • LHRH-PE40注射剂对体外培养人肿瘤细胞系的细胞毒作用

    吴广谋,朱平,李俊植,张国利,李树民,何畅

    目的 观紊LHRH-PE40注射剂对体外培养的人肿瘤细胞的细胞毒作用。方法 用MTT检恻 LHRH-PE40对体外培养的人肿瘤细胞的细胞毒作用,找出敏感肿瘤细胞系。结果LHRH-PE40对体外培养的多 种人肿庙细胞具有细胞毒作用,细胞对药物的敏感程度依次为:smmuu7721(人肝癌)<HEPG2(人肝癌)<HCT-8(人结肠癌)<MCF-7(人乳腺癌)<A549(人肺腺癌)<MGC-803(人胃癌)。结论 为动物体内的药效学研究和临 床用药提供依据。

    2001年04期 221-222页 [查看摘要][在线阅读][下载 99k]
    [下载次数:60 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:13 ]
  • 重组人血小板生成素参考品的研制

    沈琦,王威,刘大英

    目的 制备重组人血小板生成素参考品,为rhTPO的体外生物学活性测定提供相对标准。方法 采用TPO依赖细胞株进行rhTPO体外生物学活性测定。结果 效价测定9次。SD=0.1579.CV=14.1%,平均效价 为l1000U/支,其他项目均达到国家标准品要求。参考品置-25℃保存6个月后稳定性良好。结论 作为参考品可 用于rhTPO体外生物学活性控制。

    2001年04期 223-224页 [查看摘要][在线阅读][下载 116k]
    [下载次数:33 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:9 ]
  • 重组人粒细胞集落刺激因子活性测定标准品的研制

    饶春明,赵阳,张翊,丁有学,郭莹,王军志

    目的 建立效价检测用的重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)国家标准品。方法 标准品按 WHO有关要求进行制备、分装、冻干、检测,用G-CSF国际标准品为标准进行协作标定。结果 冻干重组人G- CSF标准品经检测,外观、无菌实验合格,水分为0.90%,加速热稳定实验表明其生物学活性在-20、4和25℃条件 下20个月保持稳定。该标准品经4家实验室协作标定共32次测定,加权平均效价为 5.15×106IU/支;几何平均效 价为 4.91×106IU/支。实验均数的95%可信区间为4.64×106~5.20×106IU/支,单次实验的95%参考值范围为 3.45×106~6.47×106IU/支,平均可信限卒为5.46%。结论 该批重组人G-CSF国家标准品各项指标均符合要 求,可作为国家标准品使用,效价定为5.0×106IU/支,编号为98/01。

    2001年04期 225-227页 [查看摘要][在线阅读][下载 156k]
    [下载次数:128 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:13 ]
  • 家兔肌钙蛋白的分离纯化

    魏景艳,罗贵民,马兴刚,宋昂,严玉清,张莉,郑连秀

    目的 分离提纯肌钙蛋白I(TnI)以便制备心肌梗塞诊断试剂。方法 采用离子交换、分子筛、疏水 层析相结合的方法分离纯化兔骨骼肌肌钙蛋白C(sTnC).制备TnG-Sepharose4B亲和层析柱。结果 所提纯的sT- nC,经SDS-PAGE分析已达到电泳纯,经UV-250扫描显示出特异性吸收曲线,证明其含有较多的苯丙氨酸,而不含 色氨酸,进一步证明其纯度。结论 为提纯TnI创造了条件。

    2001年04期 228-230页 [查看摘要][在线阅读][下载 447k]
    [下载次数:53 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ]
  • 低浓度单克隆抗体的分离纯化

    王亚坤,张立,龚岷,张元兴

    目的 从杂交瘤细胞的培养上清中纯化低浓度单克隆抗体。方法 采用离子交换层析与凝胶过 滤相结合进行分离纯化。结果 纯化的IgG抗体纯度>90%,总回收率为34%。结论 除了杂蛋白的等电点与目 的蛋白相近的情况外,这种方法可应用于低浓度蛋白的分离纯化。

    2001年04期 231-233页 [查看摘要][在线阅读][下载 452k]
    [下载次数:189 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:9 ]
  • 狂犬病病毒基因疫苗和精制疫苗诱导小鼠产生的免疫应答

    于洪涛,荣爱红,李淑兰

    目的 比较重组疫苗与精制疫苗诱导小鼠的免疫应答,为研制新型狂犬病疫苗奠定基础。方法 应 用含狂犬病病毒(RV)糖蛋白基因的重组质粒pcDNA3-RGP(重组疫苗)和槽制灭活狂大病病毒(精制疫苗)分别免疫小 鼠后检测细胞免疫和体液免疫水平。结果 重组疫苗3次免疫与精制疫苗1次免疫的体液免疫水平相当,重组疫苗 2次免疫与槽制疫苗l次免疫的细胞免疫水平相当,重组疫苗与精制疫苗免疫小鼠的保护率分别为30%和84.6%。 结论 重组疫苗诱导小鼠产生的免疫应答水平低于精制疫苗。

    2001年04期 234-237页 [查看摘要][在线阅读][下载 922k]
    [下载次数:66 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:11 ]
  • 干扰素口含片剂的研制

    王轶文,周丽红,崔颖杰,姚为民,朴东日

    2001年04期 237页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k]
    [下载次数:48 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:4 ]
  • 人胎盘组织液HPLC指纹图分析

    程雅琴,杨鹏云

    目的 建立人胎盘组织液制品批间一致性的质量控制方法。方法 采用HPLC指纹图方法,观察 同一生产单位不同生产批之间,以及不同生产单位之间人胎盘组织液制品HPLC主要色谱峰的变化。结果 同一 生产单位不同批的人胎盘组织液指纹图谱基本一致;不同生产单位的人胎盘组织液的指纹图谱有差异。结论 HPLC指纹图方法可以作为常规质量拄制指标,用于控制胎盘组织液制品批间一致性。

    2001年04期 238-240页 [查看摘要][在线阅读][下载 115k]
    [下载次数:93 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:8 ]
  • 肺炎球菌荚膜多糖的稳定性

    栗克喜,冯晓虎,谈宁芝,袁忠,谢姗姗,毛秀珍,蔡勤,刘波,杨耀

    目的 了解23个型的肺炎球菌荚膜多糖的稳定性。方法 分别用Sepharose2B或4B凝胶柱测定 相对分子质量及其分布(Kd)。结果 用蓝色葡聚糖2000和氧化钠作标准测定外水体积Vo(152.56或154.04min)和 内水体积Vt(432.23或444.07min),均有良好的分离效果。于2~8℃保存的所有型别的多糖均符合规程要求,除1、 2、4、8、12F、14、18C和23F型多糖因基础相对分子质量较大有轻微降解外,其他均未发现有明显降解;于室温保存的 多糖除1、2、8、12F、14和18C型有轻微降解外,其他型多糖降解程度均较大;于37℃保存的多糖除1、2、8、12F和14 型有轻微降解外,其他型则有更大程度的降解。结论 高温不利于多糖的保存。23个型别的液态多糖于2~8℃保 存1年均稳定。

    2001年04期 241-242页 [查看摘要][在线阅读][下载 109k]
    [下载次数:215 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:9 ]
  • 多元醇和糖类对菠萝蛋白酶热稳定性的影响

    李兴,林哲甫

    目的 寻找能提高菠萝蛋白酶热稳定性的物质。方法 当温度恒定时,菠萝蛋白酶的热失活过程 遵循一级蜕变规律:d[E]/dt =-Kd·t,失活半寿期是常数,可以用作衡量菠萝蛋白酶热稳定性的指标。结果 某些 多羟基、多羧基化合物能明显延长菠萝蛋白酶在较高温度下的半寿期。结论 这些物质的稳定化作用可能是由于 影响了溶剂结构和疏水相互作用,从而维护了酶分子活性的三维构象。

    2001年04期 243-244页 [查看摘要][在线阅读][下载 105k]
    [下载次数:694 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:24 ] |[阅读次数:5 ]
  • 应用RP-HPLC法测定疫苗中2-苯氧乙醇的含量

    马霄,赵建荣,田霖,雷殿良

    目的 建立一种检测2-苯氧乙醇含量的方法。方法 采用反相高效液相层析(RP-HPLC)方法。 结果 检测结果准确、稳定,线性关系好,重复性高。结论 可用于疫苗中2-苯氧乙醇含量检测。

    2001年04期 245-246页 [查看摘要][在线阅读][下载 79k]
    [下载次数:124 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:10 ]
  • 应用磺基水杨酸法测定蛋白含量

    张耀廷,郭岩,辛暨华,周莉微,曾卫,郑晓丽

    目的 建立既能排除硫柳汞的干扰,又可微量测蛋白质含量的方法。方法 采用碘基水杨酸沉淀 比浊法测定生物制品中的蛋白质含量。结果 以人血白蛋白为标准,其标准曲线的回归方程为y=252.69x- l.0013,相关系数r=0.9998。对两种制品用该法进行方法学检验,重复性试验SD分别为0.7406和0.4096,CV分别 为4.63%和2.11%。回收率分别为95.03%和105.73%。结论 该法快速简捷,结果准确,具有可行性。

    2001年04期 247-248页 [查看摘要][在线阅读][下载 97k]
    [下载次数:390 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:13 ] |[阅读次数:5 ]
  • 应用无血清培养中试的三批WuT3单抗的质量分析

    邹昌勇,冷武军,杜厚明,詹骞,邱义安,孙可芳,赵亚杰,赵良

    2001年04期 248页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k]
    [下载次数:26 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:12 ]
  • 重组人干扰素α1b滴鼻治疗呼吸道病毒感染的疗效

    郑伟,董云梅,张伟,苏振新,靳雪兰

    目的 观察重组人干扰素α1b滴鼻治疗呼吸道病毒感染的疗效。方法 将60例呼吸道病毒感染 的患儿随机分为2组,治疗组在常规治疗基础上,加用重组人干扰素(滴宁)滴鼻治疗;对照组在常规治疗基础上加 用病毒唑(加入葡萄糖液中静点),两组均观察3天。结果 发热、咳嗽、流涕、睡眠不安、肺部体征等症状消失时 间,观察组均优于对照组。结论 重组人干扰素α1b治疗呼吸道病毒感染疗效显著。

    2001年04期 249页 [查看摘要][在线阅读][下载 67k]
    [下载次数:35 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:5 ]
  • 血浆纤维结合蛋白修复皮肤创伤的临床应用

    徐焱,徐爽,苏陵

    目的 观察血浆纤维结合蛋白修复皮肤创伤的临床效果。方法60例皮肤创伤患者随机分成两 组,Fn观察组和红汞对照组,创面做常规清洗后,分别涂Fn制剂及红汞。结果 Fn观察组用药次数少,平均20次 左右,平均停止渗出时间为9.5h,平均愈合时间为5d,一期愈合率为90%,无一例感染,而且止痛效果较好。结论 Fn制剂修复皮肤创伤临床疗效优于红汞。

    2001年04期 250-251页 [查看摘要][在线阅读][下载 114k]
    [下载次数:45 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:4 ]
  • 保证输血与血液制品安全性的综合措施

    徐德启,史维国

    2001年04期 252-253页 [查看摘要][在线阅读][下载 149k]
    [下载次数:60 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:4 ]
  • 浅谈下一代制造系统

    郑晓丽,隋宝真,吉海滨,付百年

    2001年04期 254-255页 [查看摘要][在线阅读][下载 154k]
    [下载次数:18 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:5 ]
  • 《中国生物制品学杂志》2001年第14卷总目录

    2001年04期 256-257页 [查看摘要][在线阅读][下载 100k]
    [下载次数:6 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ]
  • 下载本期数据