中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 关于HCV不同区段抗原的反应性研究

    张庶民,胡本忠,庄辉,祁自柏,李河民,张华远

    目的 探讨各种丙型肝炎病毒 (HCV)抗原在诊断中的作用及其与HCVRNA的关系。方法 利用HCV不同区段抗原抗 -HCV酶联免疫试验 (EIA)和逆转录聚合酶链反应法 (RT PCR) ,对不同临床型HCV患者进行检测。结果 各组患者均以抗 NS3和抗 C阳性率最高。但均有一定比例患者抗 NS4和抗 NS5阳性。与各单个片段抗 HCV阳性率相比 ,抗 HCV总抗体阳性率最高。结论 NS3和C抗原在检测抗 HCV中起很重要作用 ,但NS4和NS5抗原在抗 HCVEIA中的作用也不容忽视。联合应用不同区段HCV抗原将大大提高抗 HCVEIA试剂的灵敏度。

    2000年04期 193-195页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • 人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区1-3环cDNA的表达、纯化及鉴定

    马骊,王小宁,张智清,周小明,曾革非,陈爱君

    目的 研究人血管内皮生长因子受体FLT 1胞外区 1 3环cDNA在酵母菌中的表达、纯化及生物学活性。方法 将编码 316个氨基酸残基的人FLT 1胞外区 1 3环cDNA插入到含AOX1启动子和d分泌信号肽序列的Pichiapastoris酵母载体中 ,构建了重组表达质粒pPICqk/FLT l(1~ 3) ,转化酵母宿主菌GS115 ,筛选His+ Mut表型转化子 ,经摇瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。结果 经SDS -PAGE显示 ,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中 ,诱导 4天的表达量达到培养上清总蛋白的 6 0 % ,径Westernblot检测抗原性及特异性良好 ,经CM SepharoseFF阳离子交换层析和Sephacryls 10 0分子筛层析 ,纯度达 90 %以上 ;经生物活性检测具有结合hVEGF16 5的能力和hVEGF16 5促进HUVEC的增殖功能。结论 人血管内皮生长因子受体FLT 1胞外区 1~ 3环cDNA在酵母菌中表达成功。

    2000年04期 196-200页 [查看摘要][在线阅读][下载 88k]
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  • 白细胞介素2(~(125)Ser)在昆虫细胞中的高效表达

    曾献武,胡晓方,王黔川,杜颖,葛永红

    目的 高效表达白细胞介素 2 (12 5Ser)。方法 采用新型Bac -to -Bac杆状病毒表达系统 ,以PCR技术扩增了人白细胞介素 2 (12 5Ser)的基因片段 ,将其克隆到转座载体 ,经转座作用将白细胞介素 2 (12 5Ser)基因插入杆状病毒穿梭载体 ,在昆虫细胞中表达。结果 通过免疫印迹实验及CTLL - 2细胞 /MTT法检测 ,表达产物具有人白细胞介素 2的免疫学及生物学活性。经SDS -PAGE电泳 ,薄层扫描分折 ,表达量达到了 2 3.47%。结论 白细胞介素 2 (12 5Ser)在昆虫细胞中获得了高效表达。

    2000年04期 201-203页 [查看摘要][在线阅读][下载 60k]
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  • 抗人GPA~N单克隆抗体的制备及鉴定

    毛建平,董燕,刘斌,孙志贤

    目的 制备抗GPA单克隆抗体以建立“GPA体细胞突变分析法”。方法 用O ,N型人红细胞 ,以及纯化人GPAN 免疫BALB/c小鼠 ,经杂交瘤技术制备 ,用细胞凝集、间接免疫荧光筛选 ,用ELISA、Westernblot、酶处理红细胞的间接免疫荧光标记鉴定。结果 获得抗GPAN 单克隆抗体 6A8杂交瘤细胞系。其单抗属lgG3亚类 ,λ型轻链 ,识别和结合GPAN 氨基端 1~ 8位决定位点 ,对糖链依赖。流式细胞分选结果显示 6A8特异结合二甲亚胺固定的人MN和N型红细胞。结论 对分析由于基因突变和糖基化变异所致N ,MN红细胞GPAN 突变有理论研究和应用价值。

    2000年04期 204-207页 [查看摘要][在线阅读][下载 77k]
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  • 流行性乙型脑炎减毒活疫苗对国内外不同野毒株的免疫性

    贾丽丽,俞永新,TheodereF.Tsai,王志伟,岳广智,郑铮

    目的 研究乙型脑炎减毒活疫苗对国内外不同野毒株的免疫原性。方法 用小鼠保护力试验和空斑减少中和试验检测该疫苗对国内外不同野毒株攻击的保护作用及其免疫血清的中和能力。结果 小鼠免疫 1针后均能抵抗国内 11株和国外 11株乙脑病毒的攻击 ,保护率均可达 90 %以上 ;人体免疫血清对台湾 1株和国外 9株病毒均有明显的中和作用。结论 SA14 142株乙脑活疫苗具有广谱的免疫原性。

    2000年04期 208-210页 [查看摘要][在线阅读][下载 33k]
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  • 精制抗江浙蝮蛇毒血清与韩国三种蝮蛇毒的交叉中和作用

    朱威,刘卫清,马颖杰

    目的 考察本所精制抗江浙蝮蛇毒血清能否中和三种韩国蝮蛇毒及其中和能力。方法 用免疫双扩散法鉴定抗江浙蝮蛇毒血清与三种韩国蝮蛇毒交叉反应。并根据动物实验结果计算出每毫升抗血清中和三种韩国蝮蛇毒的致死毒及出血毒的量。结果 中国精制抗江浙蝮蛇毒血清 1.0ml可分别中和韩国黑眉蝮蛇毒、短尾蛇毒和乌苏里蝮蛇毒液态原毒的致死毒 1、3.9和 2 .5mg ;同时可分别中和上述 3种蛇毒蛋白 0 .8、3.15和 2 0mg中和出血毒。结论 中国精制抗江浙蝮蛇毒血清具有中和上述三种韩国蝮科蛇毒的作用。

    2000年04期 211-214页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k]
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  • 狂犬病毒CTN1株在Vero细胞上的最适感染量

    蒋茨蕾,梁名践,窦志勇,刘济众,潘丽静

    2000年04期 214页 [查看摘要][在线阅读][下载 10k]
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  • 载脂蛋白A1和B检测试剂的研制

    王仁莉,杨一明,钟平

    目的 研制载脂蛋白A1和B检测试剂。方法 采用硫酸葡聚糖沉淀、超速离心、层析等方法。结果 分离的载脂蛋白A1(ApoA1)和B (ApoB) ,经检定证实其为单一成分 ,用它们为抗原 ,免疫绵羊 ,获得ApoA1和ApoB抗血清 ,检定结果与德国Bochinger公司产品一致。用这两种抗血清配制的浊度检测试剂与德国Diasys公司的同类试剂盒进行对照 ,相关良好。结论 所研制的载脂蛋白A1和B检测试剂达到了国外同类产品的质量水平。

    2000年04期 215-217页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k]
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  • 人心肌肌钙蛋白Ⅰ的分离纯化

    魏景艳,付平平,宋昂

    目的 制备抗人cTnⅠ单克隆抗体 ,以便进一步制备AMI诊断制剂。方法 用兔骨骼肌Tnc(sTnC)制备TnC Sepharose 4B亲和柱 ,直接从心肌组织中分离提纯人cTnⅠ。结果 所提纯的cTnⅠ经SDS PAGE分析已达电泳纯 ,其相对分子质量和氨基酸组成与文献报道相符。结论 为建立AMI早期诊断试剂奠定了基础。

    2000年04期 218-220页 [查看摘要][在线阅读][下载 37k]
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  • Lys-纤溶酶原的制备及其活力稳定性

    陈维金,孙宏,关锋,张洪超,陈立新,赵立哲,曲爱军,左泉,李武平,刘淑英,梁放,刘兰英

    目的 制备Lys 纤溶酶原并观察其稳定性。方法 人血浆组分Ⅲ经Lys Sepharore 4B和SephadaxG 2 0 0柱层析纯化。结果 得到分子质量为 90 0 0 0的天然纤维蛋白溶酶原 (G/u Hpg) ,经透析得到N 末端为赖氨酸的纤溶酶原 (Lys HPg) ,其活力较Glu HPg更稳定。结论 为合成酰化纤溶酶原—链激酶复合物 (APSAC)奠定基础。

    2000年04期 221-223页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k]
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  • 聚乳酸/聚乙醇酸可生物降解微球的制备及其对RNP的佐剂作用

    苏焱,王继麟,薛红刚,朱家鸿

    目的 制备包裹狂犬病毒核衣壳 (RNP)的PLA/PLG可生物降解微球 ,并观察其对RNP的佐剂作用。方法 以蛋白载量、包裹率、微球形态及粒径分布作为评价微球质量的指标 ,通过变换制备条件 ,获取质量较好的微球 ;观察三种不同聚合物材料制成的RNP微球在体外 37℃条件下的水解和释放 ;比较不同微球免疫效果。结果 PLA/PLG微球作为RNP载体 ,单剂接种诱生实验动物的抗NP抗体与AL(OH) 3 佐剂两次接种的滴度接近 ,但明显好于不加佐剂的对照组。结论 PLA/PLG微球对RNP具有良好的佐剂作用。

    2000年04期 224-228页 [查看摘要][在线阅读][下载 82k]
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  • 法莫替丁联合思密达治疗消化性溃疡38例

    韩立卓,连兵,耿光三

    2000年04期 228页 [查看摘要][在线阅读][下载 12k]
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  • 干扰素用于重组乙肝疫苗的佐剂作用

    罗璇,魏自力,陈万革,蔡岩,刘大维,韩立卓

    目的 为了提高乙肝疫苗的免疫原性。方法 在重组乙肝疫苗中加入不同单位的干扰素构成复合佐剂 ,通过小鼠腹腔和肌肉两种免疫途径 ,对疫苗的体液免疫和细胞免疫进行了检测。结果 干扰素作为复合铝佐剂 ,无论是对体液免疫还是细胞免疫 ,效果均较对照明显提高。结论 不同亚型的IFN作为乙肝疫苗佐剂 ,均可提高疫苗的免疫原性。

    2000年04期 229-231页 [查看摘要][在线阅读][下载 26k]
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  • 谱红细胞库的建立与应用

    王广结,翟晓萍,王钢,张俊玲,张耀广,尚锦青,王莉萍,丁齐虹,高瑞珍,车淑红

    目的 通过对献血员和血站职工等群体普查ABO、Rh、MNSs、Duffy等 12个血型系统抗原 ,建立谱红细胞库和谱红细胞反应格局 ,用于临床鉴定特异性抗体。方法 选用盐水、菠萝酶和间接抗人球蛋白法。结果 筛出 9组O型Rh血型遣传式 (R1R1、R2 R2 、R1R2 、R1RZ、R2 RZ、R1r、R2 r、rr、rr′)和 2 9种抗原 (D、C、E、c、e、Cw、M、N、S、s、P1、Lea、Leb、Fya、Fyb、K、k、KPa、Kpb、Kpc、JSa、JSb、Dia、Xga、Lua、Lub、JKa、JKb、Jra)。结论 精选出 15个O型红细胞组成谱细胞格局 ,有 2 0种抗原鉴定抗体概率符合P <0 .0 5的要求。目的 通过对献血员和血站职工等群体普查ABO、Rh、MNSs、Duffy等 12个血型系统抗原 ,建立谱红细胞库和谱红细胞反应格局 ,用于临床鉴定特异性抗体。方法 选用盐水、菠萝酶和间接抗人球蛋白法。结果 筛出 9组O型Rh血型遣传式 (R1R1、R2 R2 、R1R2 、R1RZ、R2 RZ、R1r、R2 r、rr、rr′)和 2 9种抗原 (D、C、E、c、e、Cw、M、N、S、s、P1、Lea、Leb、Fya、Fyb、K、k、KPa、Kpb、Kpc、JSa、JSb、Dia、Xga、Lua、Lub、JKa、JKb、Jra)。结论 精选出 15个O型红细胞组成谱细胞格局 ,有 2 0种抗原鉴定抗体概率符合P <0 .0 5的要求。

    2000年04期 232-233+253页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k]
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  • 长效干扰素质控方法的研究

    刘长暖,刘兰,张翊,饶春明,王军志

    目的 研究和确定新型长效干扰素制品质量控制方法。方法 采用Wish细胞 VSV病毒系统测定干扰素的生物活性 ,采用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱法测定相对分子质量 ,采用毛细管等电聚焦法测定样品的等电点 ,应用胰蛋白酶消化法测定肽图。结果 确定了长效干扰素制品的质控方法 ,应用该方法测定 3批长效干扰素比活性为 10 6IU/mg蛋白 ,相对分子质量为 6 30 5 7,等电点为 5 .6。结论 建立的质控方法可以有效地控制长效干扰素的制品质量。

    2000年04期 234-236页 [查看摘要][在线阅读][下载 32k]
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  • 重组链激酶(rSK)国家标准品的研制

    张翊,丁有学,饶春明,王军志

    目的 建立效价测定用重组链激酶国家标准品。方法 以NIBSC的国际标准品为标准 ,采用体外溶圈法 ,按WHO要求组织了 3家实验室 ,对该批rSK国家标准品 (批号 96 0 70 1)的效价进行协作标定。结果 经统计学分析 ,均数为 495IU/支 ,95 %可信区间为 45 7~ 5 35IU/支 ,单次测定的 95 %标准值范围为 30 1~ 70 6IU/支。该批国家标准品效价确定为 5 0 0IU/支。 4种不同温度存放 2 9个月的样品 ,效价稳定。结论 该批rSK效价稳定 ,可作为国家标准品。

    2000年04期 237-238页 [查看摘要][在线阅读][下载 28k]
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  • 3L转瓶生产流行性腮腺炎疫苗适宜条件的选择

    周谦,韩雅儒,朱立,沙凤环,祁欣,杨桦,刘立新

    目的 选择应用 3L转瓶培养流行性腮腺炎病毒的适宜条件。方法 观察不同细胞浓度 ,不同病毒接种量 ,不同收液方式和不同收液量对病毒滴度的影响 ,并按适宜的生产条件连续生产 6批半成品疫苗。结果  6批疫苗滴度均在 6 13LogCCID50 /ml以上 ,配制成联合疫苗的流腮病毒滴度均 10 0 %合格。结论 为研制联合疫苗创造了条件。

    2000年04期 239-240页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k]
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  • 小牛胸腺素的动物实验及临床应用

    熊仁平,周元国,刘苹,侯淦泉

    目的 提取胸腺素并检测药物指标 ,观察其临床应用和动物实验效果 ,探讨胸腺素对哮喘豚鼠肺组织Gα表达的影响。方法 采用酸碱沉淀加离心法制备胸腺素 ,经多肽定量、活性鉴定、细菌培养、毒性试验和热原实验 ,临床疗效观察 ,并以卵蛋白雾化吸入致敏法复制哮喘模型 ,Westernblot分析法测定哮喘豚鼠肺组织Gα水平。结果 所制胸腺素符合中国药典标准。临床疗效确切 ,经治疗后 ,哮喘豚鼠肺组织Giα、Gqα水平显著降低 (P <0 0 5 ) ,Gsα无显著变化。结论 采用酸碱沉淀加离心法可制备胸腺素 ,其治疗哮喘动物的机理可能是通过改变肺组织Gα水平来达到。

    2000年04期 241-244页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
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  • 实验小鼠的净化及监测

    刘淑霞,刘殿峰,杨淑萍,刘秀霞,马丹,王仁辉,刘占军,高洪喜,薄文学,崔丙春

    目的 为获得清洁级健康实验小鼠。方法 采用剖腹产净化 ,并结合屏障系统饲养管理 ,连续 10年进行微生物学和寄生虫学的监测。结果 净化后的小鼠严格按照清洁级标准饲养管理 ,能够保证小鼠健康生长 ,均可达到国家二级实验小鼠的水平。结论 普通级实验小鼠经剖腹产净化 ,完善饲养管理条件 ,为达到实验动物的标准化奠定了基础。

    2000年04期 245-246页 [查看摘要][在线阅读][下载 16k]
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  • 大剂量免疫球蛋白治疗再生障碍性贫血的疗效

    李薇,高素君,宋艳秋,郑春荣,姚程,姜振宇,杨岩,袁长吉,刘子玲,王春燕,崔克义,李舜华,王冠军,易永林

    目的 评价静脉输注大剂量免疫球蛋白 (HDIg)治疗再生障碍性贫血的疗效。方法 球蛋白治疗组为 70例 ,其中重型再障 (SAA) 30例 ,慢性再障 (CAA) 4 0例。对照组 73例 ,其中重型再障 31例 ,慢性再障 42例。应用大剂量免疫球蛋白 (HDIg) 1g/kg·次 ,每月一次 ,同时应用康力龙、左旋咪唑、再障生血片。对照组仅用后三种药物。结果 球蛋白治疗组SAA 30例 ,基本治愈 3例 ,缓解 5例 ,明显进步 6例 ,有效率 47% ,CAA 40例 :基本治愈6例 ,缓解 12例 ,明显进步 14例 ,有效率 80 %。血象上升时间 ,血小板平均 15天左右 ,白细胞及红细胞平均 5 0天左右。对照组SAA31例 ,仅 3例明显进步 ,有效率 10 % ;CAA 42例 ,基本治愈 1例 ,缓解 5例 ,明显进步 16例 ,有效率5 2 % ;血象上升时间平均 80天左右。结论 大剂量免疫球蛋白联合雄激素治疗再障疗效明显优于对照组 ;球蛋白治疗CAA组疗效优于SAA组 ,且多次应用球蛋白疗效显著提高。

    2000年04期 247-248页 [查看摘要][在线阅读][下载 15k]
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  • A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗免疫效果观察

    郭雪,朱宝兰,杨天英,陈锐,吴传华,刘全银,李凤祥,杜宗利,李亚楠,袁曾麟,汪燕,武玉

    目的 观察法国A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗对 7~ 14岁儿童接种后的安全性、免疫原性和免疫持久性。方法 观察组 6 0人 ,接种剂量为 10 0 μg/ 0 .5ml/人 ,对照组 30人接种维生素B1;免疫前、免疫后 1月、1年、2年和 3年分别收集血液标本 ,用ELISA方法进行抗体水平检测。结果 疫苗接种后人体反应轻微 ,6 0人中仅 2人(3.3% )出现中度发烧 ,有 3人 (5 % )出现局部红晕 ,48h后反应全部消失。免疫后 1个月 ,A群和C群抗体 4倍增长率分别为 94.4%和 96 .3% ;免疫后 1年、2年和 3年 ,A群和C群抗体 4倍增长率均为 10 0 %。结论 该疫苗较安全 ,免疫原性较强 ,且更具免疫持久性。

    2000年04期 249-250页 [查看摘要][在线阅读][下载 24k]
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  • 生物芯片技术及其应用

    白东亭

    2000年04期 251-253页 [查看摘要][在线阅读][下载 32k]
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  • 乙型肝炎病毒持续性感染防治策略的研究进展

    杨希谦,李建远,张永福

    2000年04期 254-255页 [查看摘要][在线阅读][下载 23k]
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