中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 不同代次S191株麻疹病毒HA基因的序列分析

    戚明利,吴文鹃,陈志慧

    目的 考察麻疹S191疫苗株在长期传代过程中HA基因的变化 ,以确定用于生产的最佳代次。方法 对麻疹S191疫苗株鸡胚细胞系 (CEC) 2 0、30代病毒株及S191株羊膜系病毒株 (强毒 )HAM42的血凝蛋白 (HA)基因进行RT—PCR ,克隆到PUC质粒后进行测序。结果  2 0代和 30代疫苗的HA基因的 185 4个碱基序列中未出现核苷酸的变化 ,但二者与HAM42株相比有两个核苷酸的变化 ,分别在 15 17和 1799位 ,并导致 5 0 6位的Gly变为Asp ,6 0 0位的氨基酸由Glu变为Val。结论 麻疹病毒的减毒株与强毒株存在差异。而麻疹减毒株在鸡胚细胞的长期传代中 ,HA基因未出现明显变化 ,没有出现抗原漂移 ,30代毒株与 2 0代毒株是一致的

    2000年03期 129-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k]
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  • H2株甲肝病毒经KMB17细胞培养的毒力及核苷酸序列

    黄小琴,杨净思,周德久,白惠珠,曹逸云,董德祥

    目的 监测H2株甲肝病毒经人胚肺二倍体细胞KMB17培养的毒力 /减毒水平及核苷酸序列。方法H2株甲肝减毒活疫苗H2M2 0K7(K7)用KMB17细胞增殖 ,分别在 35℃和 37℃连续传代后 ,抽查不同代次病毒的普通狨猴接种反应和核苷酸片段序列。结果 H2 KMB17系统在 35℃培育 16代次过程中 ,病毒的抗原滴度和感染性滴度稳定 ,在 37℃的滴度明显低下 ,经 13代次仍未达亲本水平。K18(35℃ ,11代 )和K15 (37℃ ,8代 )病毒经普通狨猴接种反应证实为减毒性质。核苷酸两片段共 1897个碱基的序列分析显示 ,K18和K15与K7的同源性高达 99 3%~ 10 0 %。结论 K7疫苗病毒在KMB17细胞培养经 35℃和 37℃连续传代 ,无毒力回升和遗传稳定性改变

    2000年03期 133-135页 [查看摘要][在线阅读][下载 31k]
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  • 钩端螺旋体外膜蛋白基因重组载体构建及在卡介菌中的表达

    邱洪宇,鲍朗,晏菊芳,谢勇恩,徐恒,冯云,陈玮,张会东,张万江

    目的 研制一种高效广谱的新型钩体疫苗。方法 用PCR方法扩增致病性钩端螺旋体赖型 0 17株外膜蛋白OmpL1基因 ,将其克隆入大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒载体pMV2 6 1和pMV36 1中。结果 筛选到两个重组载体pBQ1和pBQ2 ,通过电穿孔导入卡介菌 ,重组体经诱导表达了相对分子质量约为 35 0 0 0的融合蛋白。结论 卡介菌能有效表达钩体抗原蛋白

    2000年03期 136-139页 [查看摘要][在线阅读][下载 84k]
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  • 幽门螺杆菌热休克蛋白A基因的克隆和表达

    姜力,赵宝华,朱冬冬,朱平,赵大鹏

    目的 扩增幽门杆菌热休克蛋白A 35 1bp的DNA片段 ,并将其克隆到pET - 2 8a(+ )质粒中高效表达。方法 用PCR方法扩增的片段经测序后 ,用GoldKey分析软件进行序列分析 ,应用pET - 2 8a(+ )系统在受体菌BL2 1(DE3)pLysS中表达热休克蛋白。结果 该序列表达的蛋白与已报道的热休克蛋白A序列相似。重组菌株用IPTG诱导后 ,经SDS PAGE和薄层扫描分析 ,表达的外源蛋白的相对分子质量为 180 0 0 ,以包涵体的形式存在 ,表达产物占菌体总蛋白的 6 4%。结论 HspA是最有可能做为H .p疫苗中的候选抗原成分

    2000年03期 140-143页 [查看摘要][在线阅读][下载 64k]
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  • 丙型肝炎病毒E2抗原基因的克隆、表达及纯化

    鲁晓知,郑琳,严家新,朱家鸿

    目的 为了获得大量重组HCVE2蛋白 ,以研究E2抗体潜在的保护作用。方法 利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出 931bp的E2基因片段 ,经EcoRI和Sall双酶切后连接到pET 2 8a表达载体上 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株 ,得到重组质粒PET -E2 ,工程菌经IPTG诱导培养 ,明显表达出HCVE2蛋白 ,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化 ,用ELISA方法检测生物学活性。结果 表达产物主要以包涵体形式存在 ,表达量达菌体蛋白的 18%以上 ,目的蛋白具有良好的反应原性。结论 HCVE2基因的克隆与表达为进一步开展HCVE2蛋白和疫苗研究奠定了基础

    2000年03期 144-146+150页 [查看摘要][在线阅读][下载 52k]
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  • 幽门螺杆菌全菌抗原对母鸡的免疫原性

    许杨,熊勇华,魏华,钟青萍,陈红兵,孙红斌

    目的 研究幽门螺杆菌 (Hp)全菌抗原的免疫原性及Anti Hp IgY的预防和治疗作用。方法 用超声Hp波粉碎的Hp抗原免疫产蛋母鸡 ,通过IHA和ELISA间接法检测母鸡的免疫应答。用SDS PAGE分析Hp全菌抗原 ,并用抗Hp IgY做免疫印迹。结果 母鸡免疫成功率为 10 0 %。初免 45d后 ,抗Hp IgYIHA效价为 1∶10 2 4,ELISA效价超过 1∶45 0 0 0。Hp抗原的SDS PAGE显示有 2 6条蛋白染色带 ,其中主带有 10条 ,免疫印迹表明Hp的超声粉碎物特异性抗原蛋白带相对分子质量为 70 0 0 0、6 6 0 0 0、42 0 0 0、3430 0、2 95 0 0、2 70 0、185 0 0。结论 本研究为工业化制备抗Hp IgY奠定了基础

    2000年03期 147-150页 [查看摘要][在线阅读][下载 59k]
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  • “人流血”中早孕因子的分离、纯化及鉴定

    张冬云,王家骥,林丽白,张莉

    目的 分离、纯化并鉴定“人流血”中的早孕因子。方法 采用DEAE纤维素离子交换层析 ,S Sepharosefastflow离子交换层析 ,ConA SepharoseCl 4B亲和层析 ,Heparin SepharoseCl 6B亲和层析等方法进行纯化。用花结抑制实验检测出其活性。以SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其肽图。以等电聚焦电泳法检测其等电点。结果 从人流血中分离出EPF活性样物质 ,其蛋白含量为 0 .375mg/ml,SDS PAGE见 1条均匀带 ,其相对分子质量为2 6 5 0 0 ,等电点为 6 .87。结论 本研究提取的早孕因子性质与国内外报道的从妊娠初期孕妇血清中提取的基本一致

    2000年03期 151-153页 [查看摘要][在线阅读][下载 37k]
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  • 23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗的研制

    杨耀,栗克喜,宋绍忠,张云,江山,黄镇,谢全海,兰芳,黄健,毕俊红,邓雪莲,李凤祥,袁曾麟,郭淑英,石继春,何莉

    目的 研制 2 3价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗。方法 采用 1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、2 0、2 2F、2 3F和 33F等 2 3型肺炎链球菌进行大罐培养和荚膜多糖的纯化 ,制备出 2 3价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗。结果 经检定其主要质量指标均符合欧洲药典 (1997年版 )要求。结论 已建立起较为成熟的培养及纯化工艺 ,具备了规模化的生产条件

    2000年03期 154-156页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k]
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  • MTX-抗体偶联物对单核-巨噬细胞的封闭和杀伤作用

    王晓芳,姜振宇,张志清,姚程,陈维金,聂荣国

    目的 观察静脉注射用免疫球蛋白与免疫抑制剂偶联物对单核—巨噬细胞的杀伤作用 ,为其临床治疗ITP奠定实验基础。方法 分别用间接和直接交联法将IVIG与MTX制备成偶联物 ,用间接免疫荧光法检测偶联物Fc段结合活性 ,以Fc受体阳性的小鼠巨噬细胞和人单核细胞白血病细胞株U937为靶细胞 ,用MTT法测定偶联物的杀伤活性。结果 偶联物对巨噬细胞的杀伤作用明显大于游离MTX ;偶联物对Fc受体阳性细胞的杀伤作用明显大于Fc受体阴性细胞。间接偶联物IVIG HSA MTX杀伤作用明显高于直接偶联物IVIG MTX。结论 MTX抗体偶联物在体外对单核—巨噬细胞显示了相对特异的杀伤活性

    2000年03期 157-160页 [查看摘要][在线阅读][下载 42k]
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  • 小剂量静注免疫球蛋白对肾病综合征感染的预防

    窦志艳,王俊怡,刘艳平

    2000年03期 160页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k]
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  • 人源型可溶性胶原的研制

    孟佳帆,王霞红,戎志毅,陈树英,王素珍,朱威

    目的 寻找人面部或体表软组织病变或缺损造成凹陷的填充和修复材料。方法 从胎盘中提纯可溶化性胶原 ,并经动物实验进行观察。结果 在动物皮内可较长期存在而不改变形态 ,且未检出相应抗体 ,也未引起过敏反应 ,组织形态学观察未见明显异常。结论 此胶原制剂是一种安全、有效的生物填充材料

    2000年03期 161-162页 [查看摘要][在线阅读][下载 17k]
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  • 分泌型重组人生长激素工程菌的高密度发酵

    李武平,王志武,朱丽娜,张雪梅,刘丽军,刘柱,盛君,郝淑美,孙宏,向泽敏

    目的 研究葡萄糖剂补加策略 ,以获得大肠杆菌的高密度发酵和人生长激素 (HGH)的高表达。方法 采用批式发酵和补料批式发酵方式 ,葡萄糖的补加采用逐渐增加的方式 ,包括pH、DO和浓度控制。结果 获得HGH的表达量为 30 0mg/L ,光密度达到 12 4(A60 0 )。结论 在大肠杆菌中表达异源蛋白时 ,葡萄糖的补加方式是关键因素 ,补料批式发酵要优于批式发酵

    2000年03期 163-165页 [查看摘要][在线阅读][下载 28k]
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  • 人用精制Vero细胞狂犬病疫苗的稳定性

    钱浩,于伟,鲁宏,窦志勇

    2000年03期 165页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k]
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  • 检测M、N血型抗原的双位点一步ELISA方法的建立

    鲍蕾,张健,段薇,郑剑玲,张秀梅

    目的 建立一种特异性强、灵敏度高的检测MN抗原的新方法。方法 应用抗M、抗N及抗血型糖蛋白A单克隆抗体 ,建立双位点一步ELISA法。结果 检测M、N抗原的最适pH值分别为 6 0及 7 5。适宜的反应温度为 2 0 30℃。利用表面活性剂l o n octyl β D glucopyranoside(OBG)浸泡血痕 ,可明显提高ELISA法检测陈旧血痕中N抗原的灵敏度 ,检测微量液体血和新鲜血痕的灵敏度分别为 0 .0 3μg血液和 0 .0 1~0 .0 5 μg干血。 结论 该法特异性强、灵敏度高 ,为法医血清学MN分型检验提供了一种新方法

    2000年03期 166-168页 [查看摘要][在线阅读][下载 32k]
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  • 美兰光化学法对红细胞膜的影响

    陆萍,凌冰,莫琴,黄宇闻,钱开诚,秦德安

    目的 观察美兰光化学法灭活红细胞制品中病毒对红细胞膜的影响。方法 在离体条件下 ,观察光化学处理后单线态分子氧对红细胞膜结构及组分的影响。结果 经光照灭活病毒后 ,红细胞膜脂质流动性 ,膜蛋白组分及含量与对照红细胞相比差异无显著意义 ,而膜脂过氧化酶含量与对照红细胞相比差异有显著意义。结论 光化学处理对人红细胞膜具有一定的损伤

    2000年03期 169-172页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k]
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  • MTT法测金葡液对成骨样细胞OS-732生长的影响

    骆鹏,吕慧贤,王立兰

    2000年03期 172页 [查看摘要][在线阅读][下载 10k]
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  • 不同品系SPF鸡胚细胞对S191株麻疹病毒的适应性和敏感性比较

    张信,魏树源,张波,付格

    目的 了解我国现有SPF鸡蛋对我国S191株麻疹病毒的可利用性。方法 比较S191株麻疹病毒 ,在我国 3个SPF种蛋供应厂商的 5个品系、6种SPF鸡蛋成纤维细胞上的细胞生长、病变特征和病毒效价方面的差异。结果 LOHMAN F、LOHMAN M、SPAFAS品系SPF鸡蛋的细胞生长发育形态和细胞病变较好 ,其中以SPAFAS为最佳 ;病毒效价 ,SPAFAS和LOHMAN M系在大于 5 .0 0LogCCID50 /ml的高滴度区间的样本数分别达 70 %和 71.96 % ,其中LOHMAN M系的样本都在 4.38LogCCID50 /ml以上的较高水平。结论 我国SPF鸡蛋的SPAFAS和LOHMAN M品系均适宜于S191株麻疹病毒的培养及麻疹疫苗生产

    2000年03期 173-175页 [查看摘要][在线阅读][下载 29k]
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  • 冻干乙脑减毒活疫苗保护剂的筛选

    贾丽丽,张微,岳广智,何建中,陈晓艺,俞永新

    目的 筛选冻干乙脑活疫苗的保护剂。方法 通过优化组合筛选出A、C、D、E、F 5种保护剂配方 ,其中A为现行生产配方作为对照与其他配方进行比较。结果 使用A保护剂的疫苗在 37℃放置 7d和 2 1d ,病毒滴度分别下降 0 .98和 1.6 6LogPFU/ml;使用D、E保护剂的疫苗热稳定性最好 ,在 37℃放置 7d滴度分别下降 0 .19和 0 .0 7LogPFU/ml,2 1d分别下降 0 .42和 0 .39logPFU/ml。结论 D、E保护剂配方为最佳候选配方

    2000年03期 176-177页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k]
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  • 伤寒Vi多糖原液及疫苗的稳定性

    孙玉杰,唐巧英

    目的 观察伤寒Vi多糖原液及其疫苗的稳定性。方法 将多糖原液和疫苗分别放不同温度下 ,并于不同时间取样测KD≤ 0 .2 5时多糖的回收率。结果 原液放 - 2 0℃以下保存 6年后 ,多糖回收率与放置前基本相同 ,均 >5 0 % ;疫苗放 2~ 8℃保存 47个月多糖回收率与放置前基本相同 ,均 >5 0 % ;疫苗放 37℃ ,可保存 40天。结论 伤寒Vi多糖原液和疫苗均具有良好的稳定性

    2000年03期 178-179页 [查看摘要][在线阅读][下载 17k]
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  • 应用蚀斑法滴定17D黄热疫苗效力

    李淑云,黄浩,刘瑜瑄,星海,高静,唐巧英

    目的 用蚀斑法代替小鼠法滴定黄热疫苗效力。方法 用Vero细胞蚀班法与小鼠法同时滴定 14批黄热疫苗。结果 两种方法滴定结果差异无显著意义 (t=1.14,P >0 .0 5 ) ,二法呈正相关 (r =0 .5 2 89,PFU与LD50 的比率为5 .75 ,在WHO推荐的 3~ 30之间[1] )。判定结果时间由原来的 2 1d缩短为 6d。结论 蚀斑法具有快速、经济、操作简单、重复性好诸多优点 ,可以代替小鼠法

    2000年03期 180-182页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
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  • 致敏豚鼠接种卡介苗后的临床反应及病理变化

    王志,于爱东,王春鹏,杨彤,孙衍庆,王加强,刘兵,王焱旻

    目的 观察致敏豚鼠接种卡介苗后临床反应及病理变化。方法 冻干BCG接种经BCG致敏的和未经BCG致敏的正常豚鼠 ,观察接种后的反应及肝、脾、肺和肠系膜淋巴结的病理变化。结果 未致敏豚鼠局部未出现迟发型变态反应及全身反应 ,致敏豚鼠局部出现迟发型变态反应及坏死 ;两组豚鼠接种后均出现上皮样细胞肉芽肿病理改变。结论 两组豚鼠接种后虽临床反应不同 ,但病理改变无差异

    2000年03期 183-184页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k]
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  • 国产rhGM-CSFⅡ期临床疗效观察

    刘淑玲,王妍,迟春萍,李建平,刘冬梅,张秀霞,金铎,张春莉,吉海滨,杨桂云,宋三泰,江泽飞,刘传芳,张家驹,范魁生,周明臣

    目的 观察国产rhGM CSF对 5 5例肿瘤患者化疗所致WBE和ANE减少的防治作用及副反应。方法 采用多中心、单盲配对、自身交叉对照的方法。结果 rhGM CSF对肿瘤化疗所致的骨髓抑制、白细胞及粒细胞降低均有治疗及预防作用 ,副反应轻微 ,患者均可耐受。结论 rhGM CSF是肿瘤患者化疗后的一种有价值的辅助治疗药物

    2000年03期 185-187页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • 夫妻血型不合的孕妇和未孕妇血清中抗A(B)抗体检测

    张耀广,田凤梅

    2000年03期 187页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k]
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  • 钩端螺旋体疫苗大面积接种的流行病学效果

    严有望

    目的 评价钩端螺旋体疫苗大面积人群免疫的流行病学效果。方法 采用队列研究方法对重点疫区乡镇钩体流行年份钩体疫苗的保护率和效果指数进行分析。结果 钩体疫苗的保护率为 85 34%~ 10 0 % ,效果指数为 6 82~ 36 5 9。结论 现行的钩体疫苗具有较好的流行病学效果

    2000年03期 188-189页 [查看摘要][在线阅读][下载 17k]
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  • 蛇毒的研究及应用进展

    王锡锋,曹宜生,陈焕勇

    2000年03期 190-191页 [查看摘要][在线阅读][下载 23k]
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  • 幽门螺杆菌口服疫苗的研究进展

    于长青,邹全明

    2000年03期 192-193页 [查看摘要][在线阅读][下载 23k]
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