中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 乙型肝炎病毒S基因变异株的研究

    王佑春,林京香,张华远,杨军,李河民

    目的 对7份HBsAg诊断试剂检测结果不一致的样品进行确证并分析其原因。方法采用套式 PCR法对7份样品进行DNA扩增,并将阳性产物克隆到pGEM-Teasy载体上,然后进行测序并对其序列进行分析。 结果 7份样品中6份为HBV DNA阳性,其中5份与Aboott和Orthro HBsAg试剂无反应或反应较弱,而且其a决定 簇的氨基酸均在134位发生改变,由F变为 A;1份与 Abbott和Orthro HBsAg试剂反应较强,其a决定簇的氨基酸也 在134位发生改变,但由F变为S。结论 国内外首次报道HBsAg a决定簇134位由 F变为 A后,其抗原性明显降 低,不易被HBsAg试剂检出;而134位由对变为 S后,其抗原性无明显改变。

    2000年02期 65-67页 [查看摘要][在线阅读][下载 178k]
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  • 人血管内皮细胞生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化

    周小明,曾革非,钭理强,安乃莉,姚立红,陈爱君,张智清

    目的 为了获得大量重组人血管内皮细胞生长因子( Human Vascular EndothelialGrowth Factor, hVEGF),以研究其在心血管和药学领域具有的潜在药用价值。方法 用PCR方法扩增目的基因hVEGF165,连接到 pET-3a载体上,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,建立可高效表达的pET-3a/hEVGF165重组质粒,经IPTG诱导表达, Western blot检测表达产物的抗原性,通过 Mono Q阴离子层析和FPLG Superose12分子筛柱层析,进行初步纯化,用 MTT法检测其生物学活性。结果  pET-3a/hEVGF表达产物经纯化后,其纯度可达到90%以上,表达的rhEVGF165能 呈剂量依赖性地促进人静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖。结论组建了天然形式hEVGF165的大肠杆菌菌株,并摸索 出一套纯化工艺,为大规模生产重组hEVGF165奠定了基础。

    2000年02期 68-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 412k]
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  • 不同月龄婴儿接种腮腺炎疫苗的免疫效果比较

    徐福根,许二萍,黄诚孝,陈康凯,黄利明,杨洛贤,闻洪根,干伟群,张群勇,王来根,范力强

    2000年02期 71页 [查看摘要][在线阅读][下载 63k]
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  • 人肝细胞生长因子杂交瘤细胞株的建立

    韩伟国,杨伟珠,钱宇平,吕伟中,张利能,查锡良

    目的 建立能分泌人肝细胞生长因子(hHGF)的杂交瘤细胞株。方法 从4~5月龄的人胎肝中分 离贮脂细胞,与次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型人肝癌细胞株(SMMC-7721)融合成杂交瘤细胞,用 超滤膜对培养上清液初步分离,并用H3-TdR掺入法测定各组分中hHGF的生物活性。结果 培养上清液中相对分 子质量 10 000~ 30 000的组分hHGF活性显著增高,对小鼠肝细胞增殖有明显的促进作用,并存在量效依赖关系,而 相对分子质量小于10 000或大于 30 000的组分与对照相比 hHGF活性无明显改变。结论 hHGF杂交瘤细胞的建 立可作为获得hHGF的一条新途径。

    2000年02期 72-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 190k]
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  • 血液制品病毒灭活罐的改进

    曲成国

    2000年02期 74页 [查看摘要][在线阅读][下载 67k]
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  • 人热休克蛋白73的基因重组、表达和纯化

    杨虎川,杨耀琴,陈斌,陶惠红,朴文姬

    目的 用基因重组的方法表达人热休克蛋白73,并纯化表达产物,用于进一步分析。方法 用人 热休克类似蛋白HSP73基因构建原核细胞表达载体pETHSP73,在大肠杆菌BL21中用半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用 电泳法和 ATP亲和层析法提取 HSP73。经SDS-PAGE、用3 a3抗体 Western blot作 ECL检测。结果人 HSP73基因 构建的载体pETHSP73能很好地在大肠杆菌表达出相对分子质量为73 000的蛋白。两种蛋白提取方法均能有效提纯表达的蛋白,该蛋白具有人HSP73抗原特性。所得蛋白质氨基酸测定和N端测序的结果与有关的报道一致。结 论 HSP73基因重组、表达和纯化方法的建立,为研究HSP73的结构、功能与临床应用提供了必要条件。

    2000年02期 75-78页 [查看摘要][在线阅读][下载 416k]
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  • 应用“克隆法”筛选流行性腮腺炎疫苗毒种

    陈恬,刘瑛,周蓉,苏波,单光辉

    2000年02期 78页 [查看摘要][在线阅读][下载 66k]
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  • 鸡卵黄抗体(IgY)的诱导

    范龙彬,杨曜中,俞建瑛,宋聿文,欧伶

    目的 获得鸡卵黄抗体(Igy),并研究该抗体在鸡的黄液中表达的进程。方法 用吗啡—牛血清蛋白 结合物为模型抗原对30周龄产蛋鸡进行免疫诱导,用ELISA间接法测定不同时间的抗体滴度。结果全程免疫过 程中白蛋白抗体最高滴度为1:12800,吗啡抗体最高滴度为 1:1600,经 5次免疫后(42周龄)抗体滴度不再升高。结论 为使目的抗体在鸡卵黄液中持续而高质量诱导奠定基础。

    2000年02期 79-81页 [查看摘要][在线阅读][下载 175k]
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  • 人用精制Vero细胞狂犬病疫苗的研制

    黄仕和,桑爱军,乐威,何春晖,许四宏,宋奇威,李东,夏智,曾繁珍

    目的 应用Vero细胞研制人用精制狂犬病疫苗。方法应用Vero细胞经转瓶或生物反应器培养制备人用精制江大病疫苗。结果各项质控指标均符合WHO和中国生物制品规程标准,经I期临床观察疫苗是安全的。结论用Vero细胞生产的狂犬病疫苗产量大,效价高,不良反应少,且能进行工业化生产。

    2000年02期 82-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 165k]
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  • 戊肝病毒(HEV)IgG抗体酶联免疫试剂盒的质量分析

    毛群颖,王佑春,张华远,廖胜东,林京香,于洋,兰海云

    2000年02期 84页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k]
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  • 重组干扰素a_(1b)的抗病毒活性及其临床作用

    童葵塘

    目的 了解重组干扰素a1b的抗病毒活性及其临床效果。方法应用小牛肾传代细胞(MDBK)与 人羊膜传代细胞(WISH)测定重组干扰素a1b的抗病毒活性;应用40ug的剂量连续注射3个月观察治疗乙型肝炎的 临床效果。结果在MDBK细胞中测定的活性比在WISH细胞中高11.3倍;40ug/d重组干扰a1b。治疗乙型肝炎有 效,不良反应轻微。结论 建议以重量(ug)表示重组干扰素的剂量。

    2000年02期 85-88页 [查看摘要][在线阅读][下载 219k]
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  • 缓释微球乙型肝炎疫苗的初步研究

    吴晓蓉,贾文祥,邝玉,张再蓉,任娅,刘莉,朱雯,李孝红,邓先模

    目的 研制缓释微球乙型肝炎疫苗。方法 用聚-DL-乳酸-聚乙二醇共聚物(PELA)为材料,包裹乙 型肝炎表面抗原(HBsAg),制成缓释微球疫苗。微球的粒径均小于5um,平均粒径为2.17um,抗原包裹量为1.25%, 包裹率为60-80%。用 SDS-PAGE检测抗原,以微球疫苗免疫 BALB/c。小鼠。结果 HBsAg的结构包裹前后是一致 的,小鼠经皮下注射单剂微球疫苗后,在第 14w,小鼠血清 IgG滴度可达到铝佐剂疫苗相当的水平,且维持较高的滴 度。结论采用生物可降解的缓释微球作为乙肝疫苗载体系统具有潜在的优势。

    2000年02期 89-91页 [查看摘要][在线阅读][下载 280k]
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  • 冻干麻疹-风疹二联活疫苗的研制

    王子柱,王淑珍,李淑云,杜桂枝,牛洪生,王丽霞,刘渝瑄,赵铠

    目的 制备冻干麻疹-风疹二联活疫苗,以利于 CVI工作的开展。方法 用麻疹沪191疫苗株和 风疹BBDⅡ疫苗株,中量配制冻干麻疹-风疹二联活疫苗,进行全面检定及稳定性试验。结果 两种抗原经自检及 国家检定均达到单价活疫苗的质量要求,在37℃、22℃和4~8℃放置不同时间稳定性良好。结论 本研究结果与 国内外报道一致。

    2000年02期 92-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 144k]
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  • 小鼠口腔和胃途径对精制α型人白细胞干扰素的吸收实验

    周如娇,饶海林,吴永林,邓杰,何凯,钱汶光

    目的 观察小白鼠经口腔和胃服用精制α型人白细胞干扰素的吸收情况。方法小鼠经口腔和 胃服用干扰素后,分别用微量细胞病变抑制法和ELISA检测小鼠血清中的干扰素活性。结果 含服干扰素的小鼠 血清用两种方法均可检出干扰素活性,且可被α型干扰素抗体完全中和;经胃服用干扰素的小鼠血清中未检出干 扰素。结论 含服是干扰素吸收的重要途径。

    2000年02期 95-96页 [查看摘要][在线阅读][下载 120k]
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  • 麻疹-乙脑二联活疫苗脑内注射小白鼠的安全性及神经组织病理变化

    姚亚夫,李声友,卢德芬,张月新,周卫,吴玉权,张桌光,陈晓兰,陈受霓,王寿贵

    目的 了解麻疹-乙脑二联活疫苗注射小白鼠脑内的安全性及神经组织病理变化。方法 小白鼠 脑内注射二联活疫苗后,观察体征反应和组织病理变化。结果注射后5~9d有个别小鼠发病,11~14d恢复正 常。脑组织病理检查时有轻微病变,7d较明显,21d基本消退;病变以神经细胞变性及炎性细胞浸润为主,病变 分值在V-1,个别达V-2级。上述结果与同批单价乙脑活苗相同,而同批单价麻疹活苗和冻干保护剂却无体征反 应,也无组织病理损伤。结论二联苗注射小白鼠脑内后的体征反应和脑组织病理变化系乙脑14-2株病毒所致。

    2000年02期 97-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 374k]
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  • 冻干重组rhGM-CSF的稳定性

    王妍,张秀霞,隋宝真,金铎,迟春萍,李秀芝

    目的 观察冻干重组rhGM-CSF的稳定性。方法采用XTT法,TF-1细胞为依赖细胞株,对重组人 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)进行了稳定性观察。结果重组rhGM-CSF在37℃保存3个月,22℃5个 月,4℃48个月生物学活性未降低。结论 重组rhGM-CSF稳定性好。

    2000年02期 101-102页 [查看摘要][在线阅读][下载 163k]
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  • 口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸的稳定性

    白巍,李华,林凌,杨婷

    目的 考察口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸保存在不同温度不同时间毒力的稳定性。方法 将糖丸分别放-20、2~8、18~22和37℃,并于保存1、1.5、2年;1~6个月;1~6周;1、2、5、7天进行滴度测定。结果 糖丸 放-20℃2年,2~8℃6个月,18~22℃3周,37℃2天,其毒力滴度仍能达到>5.70LogTCID50/dose的合格标准。结论口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸稳定性良好。

    2000年02期 103-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 91k]
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  • rHuEPO体内生物学活性检测方法比较

    王箐舟,程雅琴,周勇,王威

    目的 比较网织红细胞法与多血症小鼠法检测rHuFPO体内生物学活性。方法 对量效线性范 围、相关系数(r值)、方法重复性和可信限率(FL%)进行比较。结果 网织红细胞法比多血症小鼠法操作更简便,重复性更好(CV分别为8.90%和23.18%),线性范围更宽(1.8~8.OIU),线性关系更好,可信限率更低(分别为26.59%和38.58%)。结论 网织红细胞法可以取代多血症小鼠法作为常规的rHuEPO的质控手段。

    2000年02期 105-107页 [查看摘要][在线阅读][下载 144k]
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  • 人用精制Vero细胞狂犬病疫苗的临床观察

    鲁宏,窦志勇,钱浩,王宏伟,于伟

    2000年02期 107页 [查看摘要][在线阅读][下载 60k]
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  • 麻疹-流行性腮腺炎-风疹联合疫苗中病毒滴定方法的改进

    李淑云,刘瑜瑄,高静,王为,唐巧英,王子柱

    目的 为改进MMR(麻疹-腮腺炎-风疹)和MRu(麻疹-风疹)联合疫苗中麻疹病毒的滴定方法。方 法 在滴定MMR中麻疹病毒时,将中和腮腺炎、风疹病毒改为只中和腮腺炎病毒;在滴定MR中的麻疹病毒时,不 中和风疹病毒,直接滴定。结果 中和与不中和风疹病毒对滴定联合疫苗中的麻疹病毒滴度无明显影响。结论 简化了滴定方法,并解决了无合用的风疹抗体的困难。

    2000年02期 108-110页 [查看摘要][在线阅读][下载 186k]
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  • 国产冻干人凝血酶原复合物的质量分析

    沈琦,云志宏,刘大英

    目的 分析国产冻干人凝血酶原复合物的质量。方法 对国内7个血液制品生产单位1993年以 后原料血浆经HBsAg、HCV-Ab、HIV-Ab筛选和病毒灭活生产的39批PCC与1993年以前原料血浆未经HCV-Ab筛选 和病毒灭活生产的10批PCC进行质量比较。结果1993年以后生产的PCC,HCV-Ab阳性检出率明显低于1993年 以前生产的PCC,但中国的质量标准和国产的PCC质量与国际同类产品质量标准均有差距。结论 国产PCC的 FIX效价比国际标准低,而肝素含量比国际标准高。

    2000年02期 111-113页 [查看摘要][在线阅读][下载 122k]
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  • 应用层析技术提高低pH静脉注射丙种球蛋白制剂质量

    吴强,黄亚平,李南林,罗亮,刘颖,赖英,郭中平

    目的 进一步提高低pH静脉注射两种球蛋白制剂质量。方法采用一步DEAE-Sepharose FF柱 层析吸附。结果IgA残留量由吸附前的5.60±3.mg/g蛋白下降到1.16±0.38mg/g蛋白,清除率达(75.32± 19.19)%,总蛋白回收达(88.55±2.76)%,IgG纯度进一步提高。制剂中的ACA、PKA、白喉抗体、单体加二聚体比例等指标均符合规程要求。结论 DEAE-Sepharose柱层析吸附可提高IVIg质量。

    2000年02期 114-117页 [查看摘要][在线阅读][下载 318k]
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  • 第三批百日咳疫苗效力国家参考品的稳定性

    侯启明,梁雅文,张路民,秦进才

    2000年02期 117页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
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  • 应用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量

    李娟,张耀庭,曾伟,罗璇,廖长春

    目的 应用考马斯亮蓝法检测总蛋白含量。方法 应用考马斯亮蓝法与凯氏法和Lowry法同时 进行不同生物制品的总蛋含量检测。结果 考马斯亮蓝法操作简便,灵敏度高,重复性好,测定蛋白的线性范围为 5~25ug,r= 0.9995,n=5,平均回收率为101.3%。结论 考马斯亮蓝法是检测生物制品总蛋白含量的理想方法。

    2000年02期 118-120页 [查看摘要][在线阅读][下载 150k]
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  • 应用丙种球蛋白结合脾切除治疗难治性血小板减少性紫癜

    宋艳秋,刘忠民

    目的 评价静脉输注大剂量丙种球蛋白(IVIG)结合脾切除术治疗难治性血小板减少性紫癜的疗 效。方法 43例均为对糖皮质激素耐药、依赖、慎用的难治性ITP患者,术前给予丙种球蛋白400mg/kg·d,连用5 天,用药后10d内血小板升至50×109/L以上者实施脾切除术。个别病例血小板未达到此数值,术前1~2h 输机采 血小板1~2u,然后进行手术。结果应用IVIG后,34例(79%)血小板升至50×109/L以上,其余病例血小板亦有 不同程度上升。脾切除近期疗效(术后2个月~1年):43例均达临床缓解,其中13例复发,经用激素治疗后,12例 再次达到临床缓解,1例无效。临床缓解率97.7%。脾切除远期疗效(术后1年以上):观察1年以上有35例,均达 到临床缓解。其中基本治愈18例(51.4%),7例复发,6例经过激素治疗再次达到临床缓解,1例无效。临床缓解率 97.1%。结论 静脉输往大剂量丙种球蛋白是一个有效的术前提升血小板的治疗方法,而脾切除术可使大部分难治性ITP患者达到临床缓解。

    2000年02期 121-123页 [查看摘要][在线阅读][下载 169k]
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  • 流行性感冒灭活疫苗接种人体后的反应与免疫效果

    郭立君,王敏文,王立成,张可畏,王志刚,范宇红,李晓波,宋建军,张玉辉,黄永成,孙丽英,张福霞,李长平,吴兆光

    目的 观察流行性感冒灭活疫苗人体接种后的反应与免疫效果。方法 接种后进行一般反应观察,采用血球凝集抑制试验测定血清中3种抗体滴度。结果 接种后一般反应率为7.2%。H1N1、H3N2和B型抗体阳转率分别是84.36%、87.92%和92.80%。接种后的血清抗体GMT分别增长12.0、9.1和10.2倍。3种抗体的保护率分别为95.3%、92.4%和97.7%。结论 流行性感冒灭活疫苗是一种很安全的制品,人体接种后具有良好的耐受性和较高的免疫保护效果。

    2000年02期 124-125页 [查看摘要][在线阅读][下载 110k]
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  • BPI抗菌作用及其临床应用的展望

    柯岩,安云庆,杨贵贞

    2000年02期 126-128页 [查看摘要][在线阅读][下载 232k]
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  • 第九届世界公共卫生联盟国际大会会议通知

    2000年02期 128页 [查看摘要][在线阅读][下载 59k]
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  • 研制联合疫苗需要考虑的问题

    高恩明

    2000年02期 129-130页 [查看摘要][在线阅读][下载 155k]
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