中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 人类小细胞肺癌细胞转染野生型p53基因发生的凋亡

    吴克,全家妩

    为了探索p5 3抑癌基因在临床应用中的潜在价值 ,以带有突变型p5 3基因的人类小细胞肺癌细胞株 (LTEP P)为研究对象 ,开发了一种新型的基因转染方法。将构建有野生型p5 3基因cDNA的质粒与阳离子脂质体和转铁蛋白结合成三元复合物 ,再用于LIEP P细胞的基因转染。通过显微观察、吖啶橙荧光染色、琼脂糖凝胶电泳和切口末端标记试验 ,证实细胞发生了凋亡。表明在体外实验中 ,该三元复合物可有效地转染肿瘤细胞 ,而野生型p5 3基因能够诱导肿瘤细胞发生凋亡。

    1999年02期 65-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 117k]
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  • HIV-1Gag p24的高效表达

    李体远,金宁一,王玉红,王宏伟,方厚华,安汝国,殷震

    将编码人免疫缺陷病毒I型 (HIV 1)核心蛋白p2 4的基因序列克隆到原核表达载体pET2 8(b)中 ,并转化不同的受体菌后 ,用IPTG诱导表达。SDS PAGE分析表明 ,受体菌BL2 1(DE3)plysS表达量最高 ,表达的重组p2 4蛋白占菌体总蛋白的 46 %。目的蛋白可与抗HIV 1p2 4单克隆抗体发生特异性反应。

    1999年02期 69-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
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  • 轮状病毒DNA疫苗的制备及其抗体应答

    周旭,李益民,侯玲,白植生

    将轮状病毒G1型Wa株的Vp7基因克隆到真核表达载体pCDNA3 1(+)中 ,经Sepharose CL4B柱层析 ,获得纯化的质粒 ,通过肌肉注射和皮下注射 ,免疫BALB c及F1小鼠后 ,产生了抗轮状病毒Wa抗体。其中F1小鼠的抗体应答高于BALB c小鼠。肌肉注射优于皮下注射。

    1999年02期 72-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 26k]
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  • 表达人粒细胞集落刺激因子大肠杆菌的优化

    马骊,方向东,高基民,王小宁

    通过对hG CSF重组基因表达效率和工程菌遗传稳定性的比较 ,建立的一种全新的双质粒双重诱导的原核高效表达体系。构建了pGP1 2 pJGW1 hGCSF DH5α工程菌 ,经 42℃热诱导 ,hG CSF的表达率达 2 7%以上 ,经典质粒遗传稳定性实验 (140代 )证实 ,具有良好的遗传稳定性。

    1999年02期 75-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k]
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  • 丙型肝炎病毒非结构区NS5基因片段的克隆和表达

    张本越,严家新,朱家鸿

    从抗 HCV和HCVRNA均为阳性的病人血清中 ,采用RT PCR技术扩增得到HCVNS5基因片段。用含此基因片段的重组质粒pET 2 8a转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后可高效表达NS5蛋白。该蛋白可用固定化金属离子螯合层析法 (IMAC)纯化。经Westernblot和ELISA检测结果表明 ,纯化的NS5蛋白可与丙型肝炎患者血清发生特异反应 ,在HCV感染的诊断中可能具有良好的应用前景。

    1999年02期 78-81页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
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  • 不同酶标试剂盒及不同方法检测甲肝总抗体比较

    周德久,龙润乡,马波,谭顺革,曹逸云,董德祥

    1999年02期 81页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k]
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  • 甲型肝炎减毒活疫苗新疫苗候选株的选育

    刘景晔,黄金凤,谢宝生,刘晶,张喜珍,梁本,郑辉,刘令九,王鹏富

    以甲肝减毒株的早代毒种 (L A 1) /P9,在 35℃条件下培养 ,采用人胚肺二倍体细胞 (2BS株 )连续减毒传代 ,克隆纯化 ,选育出新的疫苗候选株。该毒株经外源因子检查合格。较现行生产用毒株病毒增殖周期缩短 10d以上 ,病毒滴度可提高 1 0LogTCID5 0 ml以上 ,经恒河猴试验表明安全性与现行毒株差异无显著意义 ,而且免疫原性更好。

    1999年02期 82-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 22k]
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  • 人巨细胞病毒ISCOMs对小鼠细胞免疫应答的调节作用

    黄文杰,刘志红,周锡鹏,卜凤荣,黄祥瑞,马立人

    应用人巨细胞病毒被膜蛋白制备实验型免疫刺激复活物 (ISCOMs)疫苗能诱发细胞免疫反应。对小鼠 1次接种ISCOMs未能诱生明显细胞毒性T细胞 (Tc)及自然杀伤细胞 (NK)细胞活性增加 ,但能使L3T4及其与LyT2的比值增加。第 2次免疫后小鼠Tc及NK细胞活性明显增加。提示该疫苗有可能在预防人巨细胞病毒 (HC MV)原发感染中发挥作用。

    1999年02期 84-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 31k]
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  • 新生牛脑低分子提取物对神经突起生长的作用

    罗斌,洪嘉玲,武栋成

    以鸡胚背根神经节无血清培养及大鼠子鼠脑神经细胞无血清培养作为模型 ,检测以新生小牛脑为原料制备的低分子脑提取物对神经细胞突起生长的作用。结果表明 :(1)低分子脑提取物可促进鸡胚背根神经节神经突起的生长 ,加入低分子脑提取物 48h后 ,神经节周围长出突起 ,随着时间的推移 ,神经突起生长得长而密 ,相互交织在一起。 (2 )借助图像分析仪 ,以大鼠子鼠脑神经细胞神经突起平均数及神经突起平均长度为指标 ,观察到低分子脑提取物能促进神经细胞神经突起生长。低分子脑提取物经HPLC分析 ,在 2 80nm部分可分为 5个组分 ,究竟是哪一组分或哪几组分起促神经突起生长作用 ,尚需进一步研究。

    1999年02期 87-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 72k]
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  • 应用RT-PCR法验证甲肝疫苗有效期

    洪艳,陈勇,罗永能,杨连华

    1999年02期 90页 [查看摘要][在线阅读][下载 10k]
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  • 表达含凝血酶识别位点的rhGM-CSF融合蛋白工程菌的选定及其酶切后目的蛋白的纯化

    张学述,简志愚,刘裕,谢茂超,黄林,肖洁,周秀彬,栗克喜

    比较 4株表达含凝血酶识别位点的rhGM CSF融合蛋白工程菌的特性 ,选定用于开发的工菌株 ,其表达产物相对分子质量为 2 6 0 0 0 ,N端 110 0 0为MS2 ,C端 15 0 0 0为rhGM CSF ,较易用凝血酶消化释放出目的蛋白。用阴离子交换、疏水和凝胶过滤层析 ,或后二者结合进行可得到适宜人体应用的纯品 ,活性达到 10 7IU mg蛋白。

    1999年02期 91-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 36k]
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  • 应用固定化金属亲和层析纯化His6融合甲状旁腺激素相关蛋白

    钭理强,周小明,刘红兵,安乃莉,姚立红,郭应禄,张智清

    应用原核细胞高效表达载体在大肠杆菌表达了N端带 6个组氨酸的重组人PTHrP。利用其对金属鳌合层析介质的亲合性 ,采用含盐咪唑梯度洗脱 ,一步纯化即可得到纯度大于 90 %且具有生物学活性的重组PTHrP ,并进一步制备了抗PTHrP单克隆抗体。应用His6纯化标签的固定化金属亲和层析 (IMAC) ,极大地方便了目的蛋白的纯化 ,为进一步研究PTHrP的生物学特性及其在临床诊断治疗中的应用奠定了基础。

    1999年02期 94-97页 [查看摘要][在线阅读][下载 63k]
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  • 腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭贫血动物模型的建立

    王威,王箐舟,陈雪岩,程雅琴,云志宏,侯继锋,沈琦,周勇,卢连玉

    给大鼠口服含 0 .75 %腺嘌呤饲料 7周 ,造成大鼠慢性肾功能衰竭 ,并引起较严重的贫血 ,为进行重组人红细胞生成素 (rHuEPO)对慢性肾衰所致贫血的药效研究提供了稳定的实验动物模型。

    1999年02期 98-99页 [查看摘要][在线阅读][下载 36k]
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  • 长白白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶的纯化及质量检测

    杨帆,许航,郭慧云,曹海石,刘兰英

    长白白眉蝮蛇原毒经DEAE Sepharose FF ,CM Sepharose FF和G Sepharose CL 6B层析后 ,制得长白白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶精品。该产品经质量检测完全符合卫生部颁发的质量标准 ,该工艺适合于大规模纯化长白白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶。

    1999年02期 100-102页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • 第3代丙肝试剂国家参考品的研制及初步应用

    祁自柏,周诚,扬振,张庶民,谷金莲,李河民

    筛选全国 14个省、市、自治区的 2 5 0 0 0多份血样 ,取其中 2 6 4份用国产 14种抗HCVEIA试剂 ,国外 2种第 3代抗HCVEIA试剂复检 ,用RIBAHCV 3.0和PCR试剂确证。经两轮会同标定 ,国外两个实验室复核 ,确定40份阳性、40份阴性样品组成第 3代丙肝试剂国家参考品。 40份阴性样品中包括国内外几十种试剂曾经出现过非特异假阳性反应的阴性样品以及其S C值较高的阴性样品。 40份阳性样品中 ,6 5 %为弱阳性样品 ,有的样品含有全谱的抗HCV抗体 ,有的样品含有某几种抗HCV抗体 ,有的样品以抗HCV某种蛋白抗体成分为主 ,还有的样品只含有某种特定的抗HCV蛋白抗体。该参考品已通过专家鉴定并经卫生部批准使用。经改进后达到第 3代参考品标准的国产试剂的临床考核说明 ,该参考品促进了国产试剂质量的提高 ,并达到国际先进水平。

    1999年02期 103-105页 [查看摘要][在线阅读][下载 27k]
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  • 对10厂家低pH静脉注射用人血丙种球蛋白病毒灭活工艺的验证

    周铁群,邱平,王剑锋,李长贵,韩秀娟

    以水泡性口炎病毒 (VSV)为指示病毒 ,对 10厂家的人血静脉注射用丙种球蛋白 (IVIG)生产中的低pH病毒灭活工艺进行了验证 ,结果表明该方法是一种安全、有效且简便易行的病毒灭活方法 ,但仍存在局限性。同时 ,对病毒灭活验证实验中的一些问题进行了探讨。

    1999年02期 106-108页 [查看摘要][在线阅读][下载 29k]
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  • 应用XTT法检测白细胞介素-6的生物学活性

    汪革非,邸丽莹,袁志宏,刘庆海,杨秀,肖青,魏洪杰,华勐志,李俊植

    应用XTT比色分析法检测IL - 6的活性 ,并与MTT法和3H掺入法进行了比较 ,结果XTT法较之上述两法简便易行 ,结果稳定 ,重复性好。

    1999年02期 109-110页 [查看摘要][在线阅读][下载 20k]
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  • 凝血因子制品中Tween-80残留量测定方法的研究

    沈琦,陈继亭,刘大英

    用比色法测定凝血因子类制品中Tween 80残留量。结果表明该方法重复性好。对FVIII、PCC和Fg 3种凝血因子制品中的Tween 80残留量重复测定 8次 ,结果分别为 7.3± 0 .986 μg ml(X±SD) ,CV =13.5 % ;35 .2± 2 .92 2 μg ml(X±SD) ,CV =8.3% ;2 1.6± 1.473μg ml(X±SD) ,CV % =6 .8。回收率 98%以上。

    1999年02期 111-113页 [查看摘要][在线阅读][下载 27k]
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  • 洗涤红细胞去人巨细胞病毒的效果

    郭津津,杨卓璐,张秀俊,刘庆

    1999年02期 113页 [查看摘要][在线阅读][下载 10k]
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  • 一种测定生物制品中硫柳汞含量的新方法

    栗克喜,黄凤琼,李燕,罗丽,王玉芹,刘振

    用V2 O5 HNO3 H2 SO4催化消化冷原子吸收测汞仪测定法测定生物制品中硫柳汞含量具有测定结果精确 ,易重复 ,且简便 ,快速。用硫柳汞标准作标准曲线 ,线性回归方程为Y =1.2 796X - 6 .6 0 45ⅹ 10 - 4 ,相关系数r为 0 .9999。用该方法作 30批次样品内标回收率试验 ,平均回收率为 99.8%± 2 .8% ,变异系数CV为 2 .0 %。该方法是目前测定生物制品中硫柳汞含量较理想的方法 ,建议推广使用。

    1999年02期 114-116页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k]
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  • 用[3.3]法质反应平行线分析计算百日咳菌苗效力单位

    沈红杰,肖锡岭,郑晓丽,吴玫

    用微机QRP法和W W法计算 2 49批百日咳菌苗的效力 ,结果二者在总体上差异无显著意义。 2 0 9批配对数据分析表明 ,二者合格的符合率为 81.34 % ,不合格的符合率为 14.83% ,总符合率为 96 .17% ,不符合率占3.83%。在这 3.83%中 ,皆为用W W法。用W W法计算在合格边缘而用QRP法计算合格的制品 ,因此 ,微机QRP法计算的合格率显著高于W W法。用W W法不能计算的占 2 .81% ,用QRP法则很易完成 ,差异也有显著意义。QRP法计算的直线性平行性检验不成立的为 13.2 5 % ,5批经过复试 ,此 2种检验皆获通过。

    1999年02期 115-116页 [查看摘要][在线阅读][下载 18k]
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  • 牛磺酸棉酚的抗生育作用

    唐秋实,李丽梅,刘淑文,郭中辉

    为达到并保持棉酚抗生育性能 ,降低棉酚毒副作用 ,合成了牛磺酸棉酚。经动物试验发现 ,牛磺酸棉酚仍然保持了棉酚抗生育活性 ,而且作用部位及效果与棉酚基本一致 ,其毒性远远低于棉酚。

    1999年02期 117-118页 [查看摘要][在线阅读][下载 14k]
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  • 茶色素与重组人肿瘤坏死因子合用的抗肿瘤作用

    李东复,太京华,于建勋,陈永胜,杨丽

    应用四甲基偶氮唑盐 (MTT)光比色法 ,测定了茶色素及其与重组人肿瘤坏死因子合用对原发性肝癌细胞的细胞毒作用。结果表明 ,茶色素单用对肝癌细胞H740 2细胞无细胞毒作用 ,抑制作用不明显 ;rTNF单用对H740 2细胞的最大抑制率为 35 .1% ,两者合用对H740 2细胞的最大抑制率达 47.2 % ,茶色素能明显增强rTNF对H740 2细胞的细胞毒性作用。

    1999年02期 119-120页 [查看摘要][在线阅读][下载 18k]
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  • 23价肺炎球菌多糖疫苗安全性及免疫原性现场考察

    石继春,郭淑英,李凤祥,袁曾麟

    对 140名 5 5~ 70岁老人肌肉注射 2 3价肺炎球菌多糖疫苗 ,剂量为 5 75 μg 0 .5ml。于注射后观察反应 ,并于接种前及接种后 1个月分别采血 ,用ELISA改良法检测 2 3种抗体水平。疫苗接种后全身反应轻微 ,接种 6~ 8h和 2 4h内分别有 2 8人 (2 0 .0 0 % )和 38人 (2 7.14% )发生不同程度局部红肿 ,分别有 5 8人 (41.42 % )和 41人 (2 9.2 8% )局部疼痛。 48h后 ,上述局部反应明显减轻 ,72h后全部症状消失。检测 10 0名被接种者抗体滴度 ,均有良好的免疫应答 ,总抗体的几何平均滴度 (GMT)增加 2 .4倍 ,除 3型外 ,各型免前免后滴度差异均有非常显著意义 ,表明疫苗免疫原性较好。

    1999年02期 121-123页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • 治疗性疫苗的研究进展

    温顺妮,桂希恩

    1999年02期 124-126页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
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  • 酸性成纤维细胞生长因子的应用

    姜颖,于永利

    1999年02期 127-128页 [查看摘要][在线阅读][下载 25k]
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  • 风疹病毒在Vero细胞的病变观察

    王子柱,王丽霞,王淑珍,胡春红,李淑云

    1999年02期 129页 [查看摘要][在线阅读][下载 56k]
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  • 单采血浆机采集原料血浆游离Hb含量调查分析

    夏凉,陈世奇,冉茂香,白静

    1999年02期 130页 [查看摘要][在线阅读][下载 10k]
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