中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

  • 干扰素的不同亚型与临床应用

    侯云德;

    <正> 干扰素是一类重要的细胞素,它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、抗细胞分裂、免疫调节等多种生物学活性。经10多年临床应用研究表明,它是一种重要的抗病毒、抗肿瘤治疗药物。目前,有40多个国家使用干扰素制剂,治疗大约30多种疾病。一、干扰素的型别迄今所知,人、小鼠、牛、马等哺乳动物的干扰素均有α、β、γ、ω等四个型别。其中α型又有许多亚型,可分为两大家族。人干扰素的第I类家族(HuIFN—αI)相当于早期Nagata等和Goeddel等所记载的,有15~20个基因成员,其中大部分都有编码功能蛋白,

    1993年04期 145-148页 [查看摘要][在线阅读][下载 253K]
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  • 载脂蛋白B_(100)杂交瘤细胞株的建立及单抗免疫学特性的研究

    陈敬;江洪;舒帮良;

    采用密度梯度离心法从新鲜人血浆中快速分离提取高纯度的LDL,以此免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交技术建立了11株稳定分泌抗ApoB_(100)的杂交瘤细胞株,所分泌的11种单抗除L_2/169为IgG2b外,其余均为IgG_1。腹水抗体效价为10~(-5)~10~(-8)。应用ELISA间接法证明,11种单抗均与ApoB_(100)(本研究制备及Sigma产品)产生强阳性反应,部分单抗与VLDL产生反应,而均不与其它包括脂蛋白、载脂蛋白在内的血浆蛋白产生反应。应用免疫印迹法证明,各种McAb识别的靶抗原分子量为525KD。对其中4种McAb的抗原表位特异性也进行了研究,通过相加试验及双抗体竞争试验均证实,4种单抗可分为2组,各识别不同的抗原决定簇。

    1993年04期 149-153页 [查看摘要][在线阅读][下载 307K]
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  • 脑膜炎球菌多糖菌苗Kd值检定法的改进

    车玉洁;全爱顺;

    <正> 脑膜炎球菌多糖菌苗Kd值测定,先用Sepharose4B凝胶层析,用醋酸铵溶液洗脱,然后测定洗脱液中磷含量,再按公式计算出Kd值(下称原法)。该法操作繁杂,费时且耗费多量药品。作者在研究脑膜炎球菌多糖分光特性中发现脑膜炎球菌多糖的醋酸铵及生理盐水洗脱液,分别在紫外光区223nm及206nm处有特异吸收峰。应用不同倍数稀释的多糖在分光分析中OD_(223)、OD_(206)与多糖含量之间,都有很好的正

    1993年04期 153页 [查看摘要][在线阅读][下载 43K]
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  • 重组人白细胞介素1β的纯化及单抗制备

    杨天兵;

    利用NaCl梯度洗脱DEAE-Sepharose cL-6B柱层析纯化重组人白细胞介素1β(rhlL-1β)。rhlL-1β成分在100mmol/L NaCl浓度处被洗脱,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为一条带,分子量约17.5KD。以此产品作为抗原,可制备出具有良好特异性的抗IL-1β单克隆抗体。

    1993年04期 154-156页 [查看摘要][在线阅读][下载 202K]
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  • 德州地区健康人群肠道病毒带毒状况调查

    高志坚;桑德山;于德奎;康晶;刘云兰;王书明;刘德海;

    <正> 为了解我区健康人群脊髓灰质炎病毒及其它肠道病毒的带毒状况,科学地评价我区消灭脊髓灰质炎工作的进展,1991年8月我们采集了部分农村健康人群的大便标本,采用WHO规定的常规方法,进行了肠道病毒的分离与鉴定。结果在203份大便标本中,肠道病毒阳性72份,阳性率为35.47%。ECHO病毒为主要分离株(51株),其次为Coxackie病毒(3株)和肠道病毒70型(2株),另外16株为未定型病毒。未分离到脊髓灰质炎病毒。其中ECHO病毒包括ECHO_(20)19株、

    1993年04期 156页 [查看摘要][在线阅读][下载 40K]
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  • 抗HIV-1 rgp41的鼠源性单克隆抗体的制备及其应用

    宁杨;张碧茹;程明;

    用重组抗原rgp41免疫BALB/c小鼠,得到一株分泌单克隆抗体的细胞系(8D),其所分泌的单抗经免疫印迹法证明为抗gp41的特异性抗体。应用ELISA竞争抑制法,以该单抗检测了49份阳性血清,其敏感性达95%,同时检测了25份正常人血清,其特异性达100%。

    1993年04期 157-160页 [查看摘要][在线阅读][下载 348K]
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  • 应用组织胺球蛋白穴位注射治疗荨麻疹的临床疗效

    石佩莹;李德福;王东阳;

    <正> 观察的全部病例均系我所门诊病人。其中男8人,女12人,年龄最大者67岁,最小者28岁,患荨麻疹时间最长者12年,最短者1年。经皮肤划痕试验均呈阳性。有的病人发作时眼睑充血红肿,恶心呕吐,严重时并发哮喘,病人体表面有团状或连成片状的荨麻疹,有的呈紫红色丘疹,质地微硬,按之退色。好发部位为束腰带的地方及周围、胸部、腹部,四肢等。有的病人由于长期反复发作,个别部位已被搔破,形成斑斑片片的糜烂灶,并有炎性渗出,呈过敏性皮炎样改变。服用脱敏药物,如扑尔敏、息斯敏、静点10%葡萄糖、维生素C、葡萄糖酸钙、地塞米松等,症状缓解,疹形消退。但停药后很快又会复发。

    1993年04期 160页 [查看摘要][在线阅读][下载 43K]
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  • 应用篮式生物反应器和新型载体连续培养CHO-C_(28)细胞HBsAg的表达

    王妍;李志强;叶世德;

    应用篮式生物反器,以聚酯纤维为载体连续灌流培养乙肝重组CHO-C_(28)细胞,观察细胞生长和HBsAg的表达。结果灌流速度提高到每天3.5倍工作体积,收液中HBsAg的RPHA效价在维持期为1:256~1:1024。在细胞生长旺盛时,可提高转速使溶解氧(D.O.)控制在20%~30%。在收液中,由于细胞残渣少,既可避免灌流系统堵塞,又有利于提纯。

    1993年04期 161-163页 [查看摘要][在线阅读][下载 121K]
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  • 精制白喉标准毒素及精制锡克试验毒素的制备与检定

    肖锡岭;姜柏涛;代淑艳;李惠发;

    采用纯度为2000Lf/mgPN以上的精制白喉毒素,加到甘油明胶缓冲液中,制成约1000MLD/ml的精制白喉标准毒素。放置4℃保存10年,其MLD/Lf仅下降13.6%,证明稳定性良好;而原制白喉标准毒素在同样条件下MLD/Lf竟下降94.6%,稳定性很差,其放置的前3年,MLD/Lf呈急剧直线下降,后7年则呈缓慢下降。用精制白喉标准毒素共生产精制锡克试验毒素10批,经检定,MRD/ml和MLD/ml皆符合我国规程要求;结合力,7批符合英国药典规定,另3批经20%稀释亦能达到上述要求。原制锡克试验毒素的结合力一般为精制的2~5倍。

    1993年04期 164-166页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
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  • 应用PCR技术构建龋齿菌苗工程菌株

    曾繁启;赵小林;宋昌玲;姜崴;曹广强;宋淑芳;张嘉铭;

    <正> 变形链球菌(简称变链菌)是公认的主要致龋细菌。葡糖基转移酶(GTF)是变链菌致龋的主要因子,也是主要的保护性抗原。目前认为应用抗龋齿菌苗是控制龋齿的有效手段。为研制安全有效的基因工程龋齿菌苗,我们采用PCR技术,应用变链菌In-gbritt株(血清C型),提取染色体DNA,经EcoRl酶切后作为模板。参照文献,设计合成两个引物。在两个引物5'端,分别加入EcoRl和BamHl酶切位点。经变性、退火、延伸,反复进行30个循环,以1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,约有1.46kb的扩增产物带出现,与预期的变链菌GTF基因大小相符。经内切酶谱分析,酶切后片段的数量和大小均符合设计要求。将此产物和大肠杆菌pBV220载体DNA,分别用EcoRl和BamHl双酶切后连接,再转化到大肠杆菌

    1993年04期 166页 [查看摘要][在线阅读][下载 48K]
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  • 应用鸡卵细胞大量制备多克隆抗体

    尹红章;李秀华;王兵;宋爱京;哀曾麟;李德富;

    用三种不同来源的抗原(基因工程HBVe、HCV核心区抗原和GM—CSF)免疫鸡,观察血清及卵黄中特异性抗体的应答,结果经免疫的鸡对这3种抗原均有免疫应答,所产卵的卵黄中可测出大量的有活性的抗体。提示鸡源性抗体在生物制品开发应用方面有一定的前景。

    1993年04期 167-169页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K]
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  • 应用微载体Vero细胞制备流行性乙型脑炎灭活疫苗最适条件的研究

    庞成华;石慧颖;常振彦;陈景才;丁志芬;

    应用微载体培养Vero细胞研究制备流行性乙型脑炎(简称乙脑)灭活疫苗的最适条件,包括微载体的选择和细胞培养以及细胞日龄、细胞密度、毒种浓度、病毒维持液pH、种毒方式等。并按初步选择的最适条件试生产疫苗,其病毒滴度达log7.33~8.09pfu/ml,其效力(ID_(50))为0.000017~0.000063毫升,均高于现行地鼠肾细胞培养疫苗的水平。

    1993年04期 170-174页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K]
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  • 兔病毒性出血症诊断试剂盒的研制

    吴惠英;贺争呜;

    <正> 测兔瘟抗原或抗体均需人“O”型红血球,但有的基层单位缺少备用的新鲜人“O”型红血球,为此,作者将新鲜人“O”型红血球进行处理,未影响血凝素滴度,并保留在HA试验中的敏感性及特异性。处理方法是取1ml经洗净压积新鲜人“O”型红血球混悬于8ml生理盐水中,另取2ml 40%福尔马林溶液装在透析袋内,将袋放进血球混悬液中,在振荡器上缓和摇动4小时,振荡器放在室温,振荡过程中不加温。然后将透析袋用小针刺5~6个小孔;放回血球液中继续振荡过夜。将固定后的血球悬液经4层纱布过滤后,用生理盐水洗5~7次,配成20%混悬液放4℃保存备用。本试剂盒有1%和压积两种浓度的人“O型”红血球。兔瘟抗原、兔瘟阳性血清和阴性血清,25%白陶土混悬液,试验结果如下: 1.应用新鲜与固定的人“O”型红血球测试6批

    1993年04期 174页 [查看摘要][在线阅读][下载 39K]
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  • 应用光敏生物素探针检测Vero细胞乙脑疫苗中细胞残余DNA

    石慧颖;刘小琳;丁志芬;

    用国产光敏生物素,标记Veto细胞全DNA,通过与疫苗中同源DNA的狭缝杂交,检测Vero细胞乙脑疫苗中细胞残余DNA含量。检测灵敏度可达1pg。探针稳定长达一年。杂交反应特:异性高,结果重复性好。与同位素探针相比,生物素标记探针简便、经济、快速、稳定。由本法测得,Vero细胞乙脑粗制疫苗中,含DNA为200~400pg/0.5ml;超滤浓缩苗为4×10~4~6×10~6pg/0.5ml;通过柱层析和沉淀法提纯的疫苗则分别低于60pg/0.5ml和1pg/0.5ml。本法同样适用于传代细胞制备的其它生物制品中细胞残余DNA的检测。

    1993年04期 175-177页 [查看摘要][在线阅读][下载 193K]
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  • 应用生物素—亲和素间接免疫荧光法检测支原体

    过琴媛;卢锦汉;

    应用生物素-亲和素系统导入间接免疫荧光法,对不同株的支原体进行了初步检测。结果生物素-亲和素间接免疫荧光法(ABS—IFA)比普通间接免疫荧光法敏感度高百倍以上。在ABS—IFA方法中,阳性支原体部位苹果绿染色明亮、清晰,而背景浅且较干净。

    1993年04期 178-179页 [查看摘要][在线阅读][下载 90K]
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  • 抗人红细胞表面抗原glycophorin A杂交瘤细胞株的建立

    蒋先敏;于鲁东;程明;

    应用杂交瘤技术,用纯化人红细胞表面抗原glycophorin A“N”型免疫纯系BALB/c小鼠,用glycophorin A“M”型作为固相抗原,用EIA间接筛选出识别“M”、“N”血凝抗原以外的抗glycophorin A的抗体,进而利用Coombs原理,加入抗免疫球蛋白,筛选出非凝集型抗glycophorin A抗体,得到61株非凝集型抗glycophorin A杂交瘤,其中12株有限稀释法克隆4次后得到5株稳定分泌非凝集型抗体的杂交瘤并进行初步鉴定。单抗上清血凝效价可达1:20~50,腹水血凝效价为1:800~1:1 600。

    1993年04期 180-183页 [查看摘要][在线阅读][下载 186K]
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  • 甲型肝炎病毒血凝及血凝抑制试验的进一步研究

    韩剑秋;舒浩麒;刁武萍;姚辉宇;焦永真;庞菊川;刘蝶;

    <正> 龙甲_(25)株甲肝病毒(HAV)适应生长于2BS株人二倍体细胞,培养5周后收获病毒,经冻融一超声处理3次后,以等量氯仿抽提,在PH5.4~6.4的酸性条件下,于4℃~10℃时可使鹅红血球凝集,其血凝素滴度可达1:128。逐周观察组织培养中HAV的增殖动态,发现以ELISA法和血凝法检测HAV,增殖高峰均在培养第3周,以后开始下降,二法检测结果平行,提示HAV血凝试验有望用于HAV的检测。采集甲肝急性期血清30份,恢复期血清32份,非甲肝病人血清18份,以25%白陶土处理1次,再以鹅红血球吸附,选用8个单位HAV血凝素,按常

    1993年04期 183页 [查看摘要][在线阅读][下载 42K]
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  • 淋病SPA协同凝集快速诊断试剂的研究

    赵会先;王胜春;关显智;张绍伦;

    采用吸附解离法获得高度纯化的抗淋球菌血清,用以致敏金葡菌Cowan—Ⅰ株,制成诊断淋病用试剂。本试剂与多种其他细菌及多株淋球菌作协同凝集试验,证明具有高度的特异性和敏感性。可直接用于检测患者尿(阴)道分泌物中的淋球菌或其抗原成分,经110例急慢性淋病患者检材试用,阳性率达94.55%,显著优于培养法(61.82%)。

    1993年04期 184-187页 [查看摘要][在线阅读][下载 191K]
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  • 乙肝疫苗免疫后感染HBV者的抗体分析

    袁俭道;刘秀琴;

    <正> 我们在固定的人群中对乙肝疫苗免疫后,感染HBV者的抗体情况进行了长期系统的血清学检测和临床学观察。观察对象平均年龄10岁,性别均衡,经血清学检测HBV感染标记全部阴性并无肝炎史者151人。按0、1、2免疫程序常规接种乙肝疫苗10μg/次后,连续4年定期采血,分离血清,用SPRIA法和Ab-bott试剂盒检测HBsAg、抗HBc和抗HBs;用改良赖氏法检验SGPT,并由专职医务人员进行定期临床随访。在经过免疫的儿童群体中,在追踪观察的第2年,140人中检出HBV感染者4例。第2年,在101人中检出1例,累积感染率分别为2.86%和4.95%。在5例感染者中,乙肝疫苗接种后的第6个月,抗-HBs时点高峰值分别为6.1、3.7、7.3、7.8、

    1993年04期 187页 [查看摘要][在线阅读][下载 38K]
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  • 流行性乙型脑炎活疫苗大面积人体接种的安全性和血清学效果观察

    马文信;俞永新;王寿贵;周本立;马云洪;俸淑英;陈品全;郝去非;张国铭;郭玉鹏;

    用成都生物制品研究所生产的4批乙脑减毒活疫苗在云南省对58万1~15岁儿童进行大面积免疫观察,并对其中867名1~6岁儿童进行了体温测量和全身反应观察3周,仅17名儿童出现无规律性和体温中反应(37.6~38℃),但均未超过一天,亦未发生其它全身反应。局部反应轻微。其余接种对象均未发现疫苗引起的不良反应。接受1:5,1:10,1:50稀释疫苗的各组儿童中和抗体阳转率分别为85%(GMT 22.7,n=39),71%(GMT=31,n=35)和68%(GMT=14,n=34)。

    1993年04期 188-191页 [查看摘要][在线阅读][下载 153K]
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  • 脊髓灰质炎三价疫苗效价的监测

    高志坚;于德奎;李连海;桑德山;张云华;

    <正> 对脊髓灰质炎(简称脊灰)三价疫苗(TOPV)在冷链运转过程逐级进行效价监测,及时发现和改进冷链运转中存在的问题,对提高TOPV免疫成功率具有重要意义。为此,我们于1989~1992年每年7月份冷链运转时,按地→县→乡→村接种点逐级采集同一批号样品各10粒,放入冷藏包内,及时送省防疫站,按卫生部《计划免疫技术管理规程》规定的方法,进行效价测定,以效价≥5,63LogTCID_(50)/人份为合格。在4年中共抽查7个批号71份样品,合格65份,合格率为91.55%,其中1989年合格率较低,为

    1993年04期 191页 [查看摘要][在线阅读][下载 36K]
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  • ELISA法数据处理SBL软件介绍

    侯启明;扬小克;祖涛;

    <正> 1993年3月我们对3~5月龄婴儿接种不同类型的百日咳菌苗的血清学效果调查中,使用一种新型的计算机程序——SBL软件系统,对1000余份免前免后的血清样本中抗百日咳毒素(PT)和抗丝状血凝素(FHA),用ELISA法测得的数据进行统计处理,得到抗体酶标单位(Eu/ml)。此SBL软件是由美国FDA百日咳专业实验室赠送。WHO1986年在瑞典组织的无细胞百日咳菌苗现场效果调查中,使用该软件对其免疫效果进行评价,其结果已得到国际上的公认。现将SBL软件介绍如下。一、SBL软件 SBL软件用于对百日咳抗体用ELISA法测得的数据进行OD或LogOD方式计算。应用BASIC语言

    1993年04期 192页 [查看摘要][在线阅读][下载 60K]
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  • 大规模生产重组酵母乙肝疫苗工艺介绍

    汪恩浩;

    <正> 本文介绍国外利用重组DNA酵母工业化生产乙肝疫苗工艺,希望对引进、消化和改进国外技术有所启发。一、酵母表达HBsAg的特性电镜观察发现,重组酵母表达的HBsAg在未经化学处理的情况下自发地构成平均直径为22nm的球形颗粒。这些颗粒含有未糖基化的HBsAg多肽和主要由酵母特有的磷脂构成的脂基。其氨基酸的构成、羟基和氨基酸末端序列分析、质谱仪分析的肽谱等表明,重组酵母忠实地表达和生产了HBsAg。酵母生产的HBsAg在细胞内以颗粒形成存在,其中的亚单位通过非共价键不紧密地结合在一起。

    1993年04期 193-194页 [查看摘要][在线阅读][下载 519K]
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