中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

特约专稿·卫生健康事业发展70年巡礼

  • 新中国疫苗研制70年回顾

    杨晓明;

    新中国成立70年来,我国卫生健康事业硕果累累,成绩斐然,取得了令人瞩目的成就,疫苗在人类与传染病的斗争中发挥了不可替代的作用。本文对新中国成立后分离的疫苗菌毒株、疫苗种类、细胞基质、生产工艺、独创疫苗及在研疫苗进行回顾和综述。

    2019年11期 v.32 1177-1184页 [查看摘要][在线阅读][下载 237K]
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疫苗研究

  • 发热伴血小板减少综合征疫苗株免疫原性比较

    贾峥;李莉莉;戴新宪;陈蕾;王建梅;李玉华;

    目的比较重症发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)疫苗株AH12和JS2011-013毒株的免疫原性及其疫苗原液的免疫原性。方法用灭活前滴度相同的AH12和JS2011-013株病毒免疫BALB/c小鼠,设佐剂组(铝佐剂终浓度为1 mg/mL)及非佐剂组,比较相同免疫剂量下,14、28及42 d诱导产生的中和抗体效价;用含有相同Gn抗原量的AH12和JS2011-013株疫苗原液免疫小鼠,比较相同免疫剂量下,14、28及42 d诱导产生的中和抗体效价。结果 AH12和JS2011-013毒株以灭活前相同滴度或相同Gn抗原含量的条件下分别免疫小鼠,AH12毒株产生的抗体效价较高,免疫原性较强;佐剂的添加对于毒株免疫原性有增强作用。结论 AH12毒株的免疫原性强于JS2011-013毒株。

    2019年11期 v.32 1185-1188+1194页 [查看摘要][在线阅读][下载 207K]
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  • 冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)半成品SEC-HPLC左侧肩峰蛋白鉴定

    李春艳;张睿;赵博;闫帅;陈兴;丘实;王帆;孙宏亮;

    目的对冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)半成品SEC-HPLC左侧肩峰蛋白进行鉴定。方法将人血白蛋白(human serum albumin,HSA)和疫苗半成品分别进行SEC-HPLC分析,收集左侧肩峰后进行烷基化,并用胰酶酶解,产物进行nanoLC-MS/MS分析。结果 HSA SEC-HPLC左侧肩峰成功鉴定6个蛋白,包括1个HSA和5个非HSA蛋白;疫苗半成品SEC-HPLC左侧肩峰成功鉴定3个蛋白,包括1个HSA和2个非HSA蛋白,它们均在HSA SEC左侧肩峰中被鉴定。结论冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)半成品SEC-HPLC左侧肩峰蛋白来源于HSA。

    2019年11期 v.32 1189-1194页 [查看摘要][在线阅读][下载 334K]
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  • 口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗的稳定性

    刘悦越;赵岩;杜加亮;张韵祺;范行良;刘艳;于晴川;高加梅;国泰;

    目的考察口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗在不同温度和pH环境下的稳定性。方法将6批疫苗分别于2~8℃放置6个月、22~25℃放置7 d、37℃放置7 d、-20℃放置27、30、33个月,或反复冻融5次;将疫苗pH调至3. 0~10. 0。采用细胞培养半数感染量(cell culture infective dose 50%,CCID50)法检测病毒总滴度及分型滴度。结果口服二价脊髓灰质炎减毒活疫苗在2~8℃保存6个月,22~25℃保存5 d,37℃保存2 d,反复冻融5次,-20℃保存27个月,pH 3. 0~10. 0环境下,疫苗效力均符合质量标准。结论疫苗的保存温度及时间对其稳定性均有影响。

    2019年11期 v.32 1195-1200+1205页 [查看摘要][在线阅读][下载 382K]
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  • 我国黄热减毒活疫苗的均匀性分析

    王玲;刘明磊;房恩岳;刘晶晶;李玉华;

    目的分析我国黄热减毒活疫苗的均匀性。方法采用重量法测定同批疫苗的装量差异;空斑法测定同批号10支疫苗之间的病毒滴度差异;挑取20个病毒空斑,分析这20个空斑病毒亚克隆株的生长特点和空斑形态的一致性,并选取其中4个亚克隆株进行全基因组序列测定,比对分析不同亚克隆株的基因突变情况。结果同批黄热减毒活疫苗装量差异为-3. 4%~2. 83%;同批号10支疫苗的病毒滴度几何均数为5. 12 LgPFU/mL,SD为0. 16 LgPFU/mL,CV为3%;20个空斑病毒均在传代后第5天引起■的细胞病变;同一时间收获的20个空斑病毒的病毒滴度均大于7. 0 LgPFU/mL,CV为2%;20个空斑病毒亚克隆株所形成的空斑与疫苗空斑形态相似;2个空斑病毒未发生任何有义突变,1个空斑病毒发生了1个有义突变(NS5),1个空斑病毒发生了5个有义突变,其中4个位于非结构蛋白,1个位于C蛋白。结论无论是从装量差异、病毒滴度差异、疫苗不同空斑病毒亚克隆株表型和基因型的差异,我国黄热减毒疫苗均表现出了良好的均匀性。

    2019年11期 v.32 1201-1205页 [查看摘要][在线阅读][下载 231K]
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  • 重组人乳头瘤病毒33型L1病毒样颗粒的表达、纯化及免疫原性评价

    王文伟;蔡蓓蓓;仝光杰;王蓓;楼觉人;胡海涛;

    目的利用毕赤酵母表达人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)33型L1病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),评价其在小鼠体内的免疫原性。方法构建HPV33 L1表达质粒,电转化毕赤酵母,筛选高表达菌株,15 L发酵罐发酵,离子交换和凝胶体积排阻层析分离纯化HPV33 L1 VLPs,纯化后样品免疫小鼠,采用假病毒中和试验检测小鼠免疫后血清中和抗体滴度。结果质粒HPV33 L1-pPIC3. 5K经双酶切及测序鉴定证明构建成功;毕赤酵母表达产物经Western blot分析,可见相对分子质量约56 000的目的条带;透射电镜下可见直径约60 nm的病毒样颗粒;纯化后的HPV33 L1 VLPs纯度可达95%以上;0. 4和0. 04μg HPV33 L1 VLPs免疫后小鼠血清中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为3 200和566,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论利用毕赤酵母成功表达了HPV33 L1 VLPs,并具有良好的免疫原性。

    2019年11期 v.32 1206-1209+1221页 [查看摘要][在线阅读][下载 301K]
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基础研究

  • 胶原三股螺旋重叠蛋白1的理化性质和分子结构分析

    王萱;田九博;张丽娜;马培元;于保锋;

    目的分析胶原三股螺旋重叠蛋白1(collagen triple helix repeat containing 1,CTHRC1)的理化性质和分子结构,为进一步研究CTHRC1的分子功能及促癌机制提供参考。方法利用NCBI、ExPASy、SignalP、TMHMM、PSORTⅡ、SOPMA、Conserved Domain、SWISS-MODEL、STRING等软件对CTHRC1蛋白进行系统分析。结果 CTHRC1为一种碱性不稳定的亲水性蛋白,有信号肽,无跨膜区,定位于细胞外的可能性最大;CTHRC1二级结构的主要形式是无规卷曲,含有1个Collagen结构域,属于Collagen超家族;经GO和KEGG通路分析,CTHRC1相互作用蛋白主要包括FZD、DVL及ROR2。结论 CTHRC1可能参与Wnt、Hippo等信号通路,为进一步研究其分子作用机制提供了参考。

    2019年11期 v.32 1210-1215页 [查看摘要][在线阅读][下载 318K]
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  • 人呼吸道合胞病毒核蛋白、磷蛋白和M2-1蛋白的表达及鉴定

    韦钦钦;朱传凤;马超;傅生芳;高雪军;

    目的构建含有人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)核蛋白(nucleoprotein,N)、磷蛋白(phosphoprotein,P)和转录延长/终止抑制因子(transcription elongation/antitermination factor M2-1,M2-1)蛋白编码基因的表达载体,并转染BSR T7/5细胞,鉴定蛋白的表达。方法根据hRSV兰州株(LZ01/09)的N、P和M2-1基因序列设计3对特异性引物,以pcDNA-N、pcDNA-P和pcDNA-M2-1质粒为模板,PCR扩增N、P和M2-1基因片段,与pGEM-T载体连接,构建亚克隆载体;再通过体外酶切连接将内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)序列克隆至p RSV7载体T7启动子表达盒基因的上游,构建基本表达载体p7IK;通过酶切连接构建表达载体p7IK-N、p7IK-P和p7IK-M2-1,转染BSR T7/5细胞,采用Western blot法鉴定蛋白的表达。结果亚克隆载体、基本表达载体和表达载体经酶切及测序验证均构建正确;Western blot可检测到N、P和M2-1蛋白的特异性条带。结论成功构建了含有N、P和M2-1编码基因的表达载体,经BSR T7/5细胞鉴定3种蛋白成功表达,为进一步应用反向遗传学技术拯救RSV及研发RSV减毒活疫苗奠定了基础。

    2019年11期 v.32 1216-1221页 [查看摘要][在线阅读][下载 298K]
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  • 羟基酪醇对HEB和U251细胞增殖及凋亡的影响

    金元宝;刘萍;金刚;代建国;

    目的研究羟基酪醇对脑胶质细胞HEB和脑胶质瘤细胞U251增殖及凋亡的影响,及其对U251细胞凋亡影响的可能机制。方法采用MTT法检测羟基酪醇对HEB和U251细胞增殖的影响,电镜观察对细胞超微结构的影响,流式细胞术检测对细胞周期及细胞凋亡率的影响,Western blot法检测对Caspase-3和Bcl-2蛋白表达水平的影响。结果羟基酪醇能明显抑制HEB和U251细胞的增殖,其中对U251细胞抑制作用更明显,同一时间点最大抑制率所对应的羟基酪醇浓度均较HEB细胞低。1. 728和0. 820 mmol/L羟基酪醇分别作用HEB和U251细胞48 h后,细胞出现微绒毛减少、异染色质聚集、核固缩和核质比例降低等现象。0. 432、0. 864和1. 728 mmol/L羟基酪醇作用HEB细胞48 h时,细胞凋亡率分别为(43. 59±0. 13)%、(59. 72±0. 15)%和(83. 88±0. 05)%;0. 205、0. 410和0. 820 mmol/L羟基酪醇作用U251细胞48 h时,细胞凋亡率分别为(33. 95±0. 06)%、(29. 79±0. 12)%和(45. 12±0. 20)%,两种细胞均被明显阻滞在S期。HEB和U251细胞中Bcl-2蛋白表达量均随羟基酪醇浓度的升高而略有降低,而Caspase-3蛋白的表达量则均有上升趋势。结论羟基酪醇能明显抑制HEB和U251细胞增殖,并诱导其凋亡。在相同浓度羟基酪醇作用下,U251细胞更易被诱导凋亡,这将为羟基酪醇运用于脑胶质瘤的预防及治疗提供了理论依据。

    2019年11期 v.32 1222-1227页 [查看摘要][在线阅读][下载 395K]
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  • 金黄色葡萄球菌荚膜多糖型CP8菌小鼠全身感染模型的建立及评价

    袁玉兰;郭京蓉;林海涛;周继唯;张云涛;

    目的建立金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)荚膜多糖型CP8菌小鼠全身感染模型,并对模型进行免疫攻毒保护性评价。方法金葡菌荚膜多糖型CP8国际标准株49525经37℃培养24 h,用PBS缓冲液稀释成不同浓度菌液,分组经腹腔注射感染BALB/c小鼠,观察小鼠发病症状,统计生存率及体重变化,确定每只小鼠的致死剂量及亚致死剂量;采集不同感染时间的小鼠血液及心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏,进行细菌定植量检测及主要脏器病理学检查。用CP8多糖-蛋白偶联物(实验组)及氢氧化铝佐剂(对照组)对建立的小鼠模型进行3次免疫攻毒保护性实验,统计小鼠存活率。结果经腹腔感染途径建立的小鼠模型,每只致死剂量为3. 0×10~9 CFU,亚致死剂量为1. 5×10~9CFU。感染发病小鼠表现为翘毛弓背、耸肩及行动迟缓,生存率及体重随感染剂量增加明显下降,血液及心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏均有细菌定植,心脏、肾脏、肝脏主要脏器中可见明显细胞坏死和炎性细胞浸润。与对照组比较,实验组小鼠3次攻毒存活率差异均有统计学意义(P均<0. 01),对小鼠的保护率分别为55. 6%、50. 0%和57. 1%。结论成功建立金葡菌荚膜多糖型CP8菌小鼠全身感染模型,并可用于疫苗保护性评价,为进一步研究多抗原组分疫苗的有效性和安全性奠定了实验基础。

    2019年11期 v.32 1228-1233页 [查看摘要][在线阅读][下载 536K]
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  • 细胞凋亡易感蛋白在睾丸癌中的表达及其对NT-2细胞增殖的影响

    刘见妮;王鑫;张涵;郭浩然;关坤萍;

    目的探讨细胞凋亡易感蛋白(cellular apoptosis susceptibility protein,CAS)在睾丸生殖细胞肿瘤(testicular germ cell tumor,TGCT)中的表达及其对NT-2细胞增殖的影响。方法免疫组化法检测CAS在正常人睾丸细胞及各种睾丸癌细胞中表达及定位;经转染腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)沉默CAS质粒(AAV-shCAS质粒)敲减NT-2细胞中CAS后,CCK-8法检测NT-2细胞生长活力,Western blot法检测CAS对NT-2细胞凋亡信号分子表达水平的影响。结果 CAS在正常人睾丸组织中呈中等强度表达,在癌旁睾丸组织中呈中、高强度表达,其中仅1份组织样本呈阴性;CAS在精原细胞瘤和胚胎瘤中呈低、高表达,其中,胚胎瘤中有1份样本呈阴性。CAS在正常人睾丸组织和癌旁睾丸组织中,主要表达于精母细胞胞核;精原细胞瘤和胚胎瘤中,CAS主要表达于细胞质。敲减CAS表达的NT-2细胞生长活力显著下降(P <0. 001),CAS、p65、RelB、Bcl-XL、Bcl-2的表达水平显著降低(P均<0. 05),p53表达水平差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论正常人睾丸组织及TGCT中,CAS的表达位置不同;沉默NT-2细胞中CAS表达可通过抑制NF-κB/Bcl-2信号通路分子的表达从而抑制细胞增殖。

    2019年11期 v.32 1234-1238页 [查看摘要][在线阅读][下载 372K]
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  • KV500与叠氮钠作为溶血液防腐剂对糖化血红蛋白测定影响的比较

    涂莹;孙文浩;金于兰;

    目的比较KV500与叠氮钠作为溶血液中防腐剂对糖化血红蛋白测定的影响。方法用含不同浓度KV500(0. 1%、0. 05%、0. 01%)及叠氮钠的溶血液溶解相同样品,进行糖化血红蛋白测定,并对结果进行比较。将含0. 01%KV500的溶血液于2~8℃保存1个月(开瓶)及1年(不开瓶),用其溶解相同样品,进行糖化血红蛋白测定。将4组溶血液于2~8℃保存1个月(开瓶)及1年(不开瓶),采用纯化水微生物限度法检测KV500的抑菌效果。结果含不同浓度KV500与叠氮钠溶血液测定糖化血红蛋白结果差异无统计学意义(P> 0. 05)。随保存时间的延长,含0. 01%KV500溶血液测定糖化血红蛋白结果差异无统计学意义(P均> 0. 05)。含不同浓度KV500的溶血液于2~8℃保存1个月及1年后均具有良好抑菌效果,与叠氮钠效果相近。结论 KV500可替代叠氮钠作为溶血液的防腐剂,不影响糖化血红蛋白的测定。

    2019年11期 v.32 1239-1242+1246页 [查看摘要][在线阅读][下载 204K]
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治疗制剂

  • 重组人凝血因子Ⅸ在CHO细胞中的表达和纯化

    李德款;张航;聂艳桃;李成;梁洪;寇鹏;费保进;

    目的在CHO细胞中表达并纯化人凝血因子Ⅸ(human coagulation factorⅨ,hFⅨ)。方法将高表达hFⅨ的CHO细胞株在摇瓶中用无血清培养基进行批次培养和补料批次培养,收获补料批次培养上清,通过阴离子交换层析进行纯化,测定纯化产物的蛋白浓度及hFⅨ活性,并进行SDS-PAGE分析。结果批次和补料批次培养表达的hFⅨ活性分别高达0. 62和14. 45 IU/mL。纯化后的h FⅨ比活性高达157. 19 IU/mg。SDS-PAGE分析表明重组CHO工程细胞株能正确表达hFⅨ。结论成功在CHO细胞中表达并纯化了高比活性的重组hFⅨ蛋白,为进一步研制重组FⅨ药物奠定了基础。

    2019年11期 v.32 1243-1246页 [查看摘要][在线阅读][下载 197K]
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诊断制剂

  • 梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品的研制

    夏德菊;王薇;许四宏;周海卫;张春涛;

    目的建立梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品。方法通过对84份血浆的复核、确证,组建梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品,并将3份效价检测用参考品溯源至国际标准品,经5家实验室的协助标定,确定参考品的质量标准,并对参考品进行均匀性及稳定性评估。结果梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品由25份阴性及25份阳性样品组成,3份效价检测用参考品的效价定值分别为12、10和5 IU/mL。协助标定确证25份阴性参考品均为阴性,25份阳性参考品均为阳性,效价参考品的效价检测值均≤0. 625 IU/mL。参考品的均匀性及稳定性均符合要求。结论研制的参考品可作为梅毒非特异性抗体检测试剂的质量控制和评价使用。

    2019年11期 v.32 1247-1251+1256页 [查看摘要][在线阅读][下载 208K]
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临床研究

  • 治疗用卡介苗上市后的安全性监测

    周扬;严龙;屈戈;赵薇;王俊峰;李军;石小容;张磊;

    目的分析治疗用卡介苗(BCG for therapeutic use,t BCG)上市后不良反应(adverse drug reaction,ADR),监测其安全性。方法通过主动临床研究和被动自发报告途径收集2016~2017年期间使用t BCG进行膀胱癌灌注治疗患者的ADR信息,对ADR的类型、严重程度及转归情况进行分析。结果经t BCG灌注治疗后,主动临床研究和被动自发报告中ADR发生率分别为31. 9%和1. 6%。最常见的ADR为尿频、排尿困难、膀胱炎、发热等,均属于与灌注治疗方式和治疗机理相关的反应或损伤。多数反应为非严重ADR,转归情况较好。结论 t BCG上市后显示出良好的安全性,本研究为修订产品说明书的安全信息提供了依据。

    2019年11期 v.32 1252-1256页 [查看摘要][在线阅读][下载 184K]
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技术方法

  • 基于中和表位的GⅡ.4型重组诺如病毒VP1蛋白病毒样颗粒抗原含量检测方法的建立及验证

    唐芳;韩子泊;侯俊伟;杜丽芳;栗子谦;靳玉琴;雷泽华;李启明;

    目的建立基于中和表位的GⅡ. 4型重组诺如病毒(Norovirus,NoV)VP1蛋白病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)抗原含量检测方法,并进行验证,以用于重组NoV疫苗质量控制。方法应用ELISA和HBGA-VLP阻断试验筛选中和性单克隆抗体,并筛选配对抗体,分别作为包被抗体和检测抗体,建立GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP双抗夹心ELISA抗原定量检测方法。确定方法的线性检测范围,并对方法的专属性、准确性和精密性进行验证。结果27株GⅡ. 4 VLP特异性ELISA检测阳性的杂交瘤细胞克隆中,有12株GⅡ. 4型阻断抗体检测呈阳性,选择具有GⅡ. 4型阻断活性的特异性单抗2H7-C5和2E6-B3作为双抗夹心抗体对,用于建立GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP双抗夹心ELISA抗原定量检测方法。该方法的线性测定范围为15. 63~250 ng/mL,标准曲线R2均> 0. 98;准确性验证的加标回收率在72. 23%~134. 03%之间;重复性验证的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为7. 06%,中间精密性验证的RSD分别为8. 04%和9. 14%。结论建立了基于中和表位的GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP抗原含量检测方法,该方法专属性、准确性、精密性良好,可用于GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP定量检测,为GⅡ. 4抗原相关疫苗研发中质量控制和检定提供了技术支持。

    2019年11期 v.32 1257-1262页 [查看摘要][在线阅读][下载 218K]
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  • 聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液中游离聚乙二醇含量的测定

    陆春燕;许培;董世建;倪晓燕;储成风;李增礼;王荣海;

    目的建立测定聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)化重组人干扰素α2b(Peg-IFNα2b)注射液中游离PEG含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测方法,并进行方法的验证。方法以Sepax Bio-C18为固定相,流动相A为0. 1%三氟乙酸-水溶液,流动相B为0. 1%三氟乙酸-90%乙腈-10%水溶液,梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测不同浓度PEG对照品及Peg-IFNα2b注射液样品,建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法,并对方法进行专属性、线性范围、检测限及加样回收率验证。结果高效液相色谱显示,PEG对照品与混有PEG对照品的Peg-IFNα2b注射液色谱峰分离度良好,且无其他色谱峰干扰;PEG对照品在6. 25~100. 00μg/mL范围内线性良好,R2=0. 990 3;最低检测限约为1. 56μg/mL;低、中、高3个浓度的PEG对照品加样回收率分别为107. 51%、103. 52%和95. 99%。结论建立的方法简单、准确、快速,可用于测定Peg-IFNα2b注射液中游离PEG含量。

    2019年11期 v.32 1263-1266页 [查看摘要][在线阅读][下载 223K]
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  • 顶空-气相色谱法测定流感病毒裂解疫苗中游离甲醛的残留量

    冯雪;李帅;徐志强;曹宇;张雪楠;张红梅;司杨乐;郑欣;杨红育;

    目的建立流感病毒裂解疫苗中游离甲醛残留量的顶空-气相色谱测定法,并进行优化及验证。方法对顶空-气相色谱法中的顶空平衡温度(70、80、90、100、110、120℃)、顶空平衡时间(30、40、50 min)、色谱柱[HP-5(30 m×0. 320 mm,0. 25μm)、HP-FFAP(25 m×0. 320 mm,0. 50μm)、DB-1301(30 m×0. 320 mm,0. 25μm)、DB-23(30 m×0. 320 mm,0. 25μm)及DB-WAX(30 m×0. 250 mm,0. 25μm)]、分流比(10∶1、20∶1、30∶1、40∶1、50∶1)、不同进样模式(分流模式和脉冲分流模式)进行优化,同时验证方法的系统适用性、检测限、定量限、线性范围、重复性及准确性。采用优化方法检测0. 001μg/mL甲醛标准溶液及流感病毒裂解疫苗样品。结果最适检测条件为:顶空平衡温度为100℃,顶空平衡时间为30 min,采用DB-1301(30 m×0. 320 mm,0. 25μm)色谱柱分离,分流模式,分流比为20∶1。5次检测的理论板数不低于5 000,甲醛色谱峰与其相邻色谱峰的分离度均> 1. 5;检测限及定量限分别为0. 000 3和0. 001μg/mL;甲醛在0. 001~0. 04μg/mL浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,获得线性回归方程为y=561. 893 46 x-0. 044 414 2,r为0. 999 71;各批流感病毒裂解疫苗连续进样6次检测结果的RSD均<10. 0%;加标量0. 002 5及0. 005μg的检测回收率为78. 6%~98. 6%。0. 001μg/mL甲醛标准溶液及流感病毒裂解疫苗的检测结果分别为0. 001 297 30和0. 003 480 97μg/mL。结论建立的方法具有较高的灵敏性、准确性、重复性,有望应用于流感病毒裂解疫苗中游离甲醛残留量的测定。

    2019年11期 v.32 1267-1274页 [查看摘要][在线阅读][下载 420K]
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  • W135群脑膜炎球菌培养基优化

    吴元元;张生琰;周晖国;孙燕;徐世友;杨千苇;于飞飞;

    目的试验设计法优化W135群脑膜炎球菌培养基,以期提高荚膜多糖产量。方法配制流脑半综合培养基(1、2、3号)及改良TSB培养基,以W135群脑膜炎球菌为试验菌株,菌密度为响应值,采用全因子试验、最陡爬坡试验、中心组合设计及响应面分析试验对碳氮比进行优化,采用正交试验对硫酸镁、氯化钙、L-胱氨酸、氯化铵、谷氨酸钠、硫酸亚铁6种培养基添加成分进行筛选及优化。结果 1号流脑半综合培养基确定为基础培养基;葡萄糖及酸水解酪蛋白为影响菌密度的主效应因素,两者的最适浓度为7. 84和10. 04 g/L;培养基6种添加成分对W135群脑膜炎球菌生长影响作用大小依次为硫酸镁、L-胱氨酸、硫酸亚铁、氯化铵、氯化钙、谷氨酸钠。优化的1号流脑半综合培养基不仅成分更加简单,且提高了W135群脑膜炎球菌密度。结论优化的培养基增加了W135群脑膜炎球菌密度,为荚膜多糖产量的提高奠定了基础。

    2019年11期 v.32 1275-1280+1286页 [查看摘要][在线阅读][下载 300K]
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  • 前蛋白转化酶枯草溶菌素9单克隆抗体生物学活性荧光染料标记法的建立、优化及验证

    韩月然;陈妍;杜向瑞;吕品;刘博;李剑;

    目的建立并优化前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)单克隆抗体生物学活性的荧光染料标记检测法,并进行验证。方法对建立的荧光染料标记法的细胞铺板密度(1×10~5、5×10~5和1×10~6个/mL)、PCSK9蛋白浓度(5、20、40、80μg/mL)、荧光标记的低密度脂蛋白(low density lipoprotein labeled with 1,1′-dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate,Dil-LDL)浓度(10、16、20μg/mL)、单克隆抗体的浓度梯度(200、52、20、12、8、4、0. 8μg/mL,200、30、10、6、4、1、0. 2μg/mL,200、28、9、6、4、2、0. 2μg/mL)进行优化,并对优化方法的专属性、准确度、精密度、线性范围、耐用性进行验证。结果最适方法检测条件:铺板密度为5×10~5个/mL,PCSK9蛋白和Dil-LDL浓度分别为20和16μg/mL,单克隆抗体的浓度梯度为200、52、20、12、8、4、0. 8μg/mL。该方法可特异性检测PCSK9单克隆抗体;供试品检测回收率在70%~130%之间;供试品检测结果的相对标准偏差(RSD)均<10%;供试品效价在50%~150%之间时,检测值与理论值呈良好的线性关系,线性拟合方程为y=1. 002 x-0. 006 7,R~2=0. 997 8;耐用性检测活性均在70%~140%范围内。结论本实验建立的方法具有良好的专属性、准确度和精密度,可用于PCSK9单克隆抗体的生物学活性测定。

    2019年11期 v.32 1281-1286页 [查看摘要][在线阅读][下载 293K]
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综述

  • 流感疫苗在儿童中应用的研究进展

    孟子延;成立;张家友;杨晓明;

    流感是由流感病毒感染引起的呼吸道传染病,严重威胁人类的健康及发展,5岁以下儿童及65岁以上老年人是其易感人群,尤其在校学龄儿童在流感流行季具有较高的感染率,从而引发缺课及家长缺勤等社会负担。疫苗接种是预防流感发生的有效途径,目前,儿童主要使用的流感疫苗有流感病毒裂解疫苗、亚单位疫苗(仅含病毒HA和NA蛋白)、减毒活疫苗、含佐剂流感疫苗。本文主要对鸡胚基质流感疫苗、细胞基质流感疫苗、佐剂流感疫苗在儿童中的应用情况,以及处于临床试验中通用流感疫苗和复制缺陷型流感病毒疫苗的重大进展及其可能在儿童的应用前景作一综述。

    2019年11期 v.32 1287-1292+1297页 [查看摘要][在线阅读][下载 237K]
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  • 细胞基质流感疫苗研发的意义及进展

    张哲罡;成立;李长贵;杨晓明;

    流感是由流感病毒导致的传染病,在世界范围内已造成大规模的人类和家禽死亡,给社会带来了严重的经济损失。接种疫苗是控制流感传播的最好方法。目前鸡胚基质流感疫苗和细胞基质流感疫苗,在国外市场上均有上市产品。细胞基质流感疫苗在生产上相比传统鸡胚工艺具有更严格的无菌环境,生产规模更易扩大,更加灵活,过敏来源更少,扩增的病毒更匹配人类使用等诸多优势。但细胞基流感疫苗在生产中也面临挑战,如病毒滴度如何进一步提高,如何选育出抗原产量更高的细胞株,如何优化反应器的培养条件等。本文综合比较了鸡胚基质流感疫苗与细胞基质流感疫苗,并对细胞基质流感疫苗开发的意义、面临的困难及国内外目前的研究进展进行综述。

    2019年11期 v.32 1293-1297页 [查看摘要][在线阅读][下载 205K]
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专题报道

  • 人类细小病毒B19与血液制品安全

    邱晓;白玉;

    <正>人细小病毒B19(human parvovirus B19),简称B19,是唯一感染人类的细小病毒,广泛流行于全球各地,B19可通过呼吸道及血液制品传播。B19感染某些特定人群后会引起诸如持续性贫血、流产等不良后果。目前治疗B19感染的方法仅有免疫球蛋白输注及输血。B19与血液制品的安全性密切相关,其已被美国、欧盟等多个国家和地区监管机构列为

    2019年11期 v.32 1298-1300+1304页 [查看摘要][在线阅读][下载 141K]
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消息

  • 欢迎订阅《中国生物制品学杂志》

    <正>《中国生物制品学杂志》于1988年创刊,由中华人民共和国卫生部主管,系中华预防医学会系列杂志之一,为报道我国生物制品研究开发重大成果和最新进展的国内唯一生物制品专业学术期刊。主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。主要设有疫苗研究、基础研究、治疗性制剂、诊断制剂、临床研究、技术方

    2019年11期 v.32 1233页 [查看摘要][在线阅读][下载 36K]
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