中国生物制品学杂志

2005, (04) 316-318

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重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用
Preparation,Characlerization and Preliminary Application of Monoclonal Antibody Against Recombinant Human 14-3-3 Zeta Isoform

钟政荣,沈继龙,汪学龙,胡元生,沈继录,王家传,李小月

摘要(Abstract):

目的制备重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体(McAb),并检测14-3-3蛋白在人体组织器官的分布。方法将筛选出分泌抗人14-3-3zeta的杂交瘤细胞注射入BALB/c小鼠腹腔,制备腹水McAb,用辛酸-饱和硫酸铵沉淀法纯化,并鉴定其效价、纯度、浓度、特异性以及与天然抗原的亲和力,再用此单抗检测14-3-3蛋白在人体组织器官的分布。结果腹水及纯化后的单克隆抗体的效价分别为1∶107和1∶106。纯化后的纯度达97%,浓度为5mg/ml,能识别天然的人14-3-3蛋白,并能有效地识别兔和鼠脑组织的14-3-3蛋白。在人脑、肾、肺、肝、胃、卵巢、乳腺、结肠、胰腺等组织器官中,均检出14-3-3蛋白。结论已成功制备出重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体,并应用于实际检测,为研究14-3-3蛋白在机体生理和病理情况下的作用机制奠定了基础。

关键词(KeyWords): 14-3-3蛋白zeta亚型;单克隆抗体;性质

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30170841);; 安徽省自然科学基金(0044547;98436329)资助

作者(Author): 钟政荣,沈继龙,汪学龙,胡元生,沈继录,王家传,李小月

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