中国生物制品学杂志

2007, (12) 917-919

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蚓激酶在牛乳腺中的稳定表达
Stable Expression of Lumbrokinase in Mammary Gland of Cow

刘殿峰;张嘉保;张守峰;姚伟;张锐;陈健;文力正;袁宝;扈荣良;

摘要(Abstract):

目的构建蚓激酶重组逆转录病毒载体,并在牛乳腺中稳定表达蚓激酶。方法将含有蚓激酶基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLNCL中,获得蚓激酶重组逆转录病毒载体,利用脂质体转染PA317包装细胞,G418筛选阳性细胞克隆,克隆扩大培养后,病毒上清转染妊娠7个月奶牛乳腺小叶组织。产犊后采奶样,FAPA法检测蚓激酶活性,并进行凝胶薄层扫描分析。结果蚓激酶重组逆转录病毒最高滴度约为1×104CFU/ml。奶牛产后奶样中蚓激酶基因在牛乳腺中可连续表达112d,活性相当于30000英国单位/L牛奶,在牛奶中表达量可达180mg/L牛奶。结论已成功构建蚓激酶重组逆转录病毒载体,蚓激酶可在牛乳腺中相对稳定地表达。

关键词(KeyWords): 蚓激酶;逆转录病毒;包装;转染;表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家“863”高技术研究发展计划(No.2002AA206653)基金资助.

作者(Author): 刘殿峰;张嘉保;张守峰;姚伟;张锐;陈健;文力正;袁宝;扈荣良;

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