中国生物制品学杂志

2010, v.23(09) 961-963+966

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弓形虫亲环蛋白基因的克隆及原核表达
Cloning and Prokaryotic Expression of Cyclophilin Gene of Toxoplasma gondii

李运娜;于钦磊;李建华;宫鹏涛;李赫;张西臣;

摘要(Abstract):

目的克隆并原核表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)亲环蛋白(Cyclophilin,CyP)基因。方法收集、纯化Rh株弓形虫速殖子,提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增TgCyP基因,插入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-TgCyP,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果测序结果与GenBank中登录的基因序列同源性为100%,重组表达质粒pET-28a-TgCyP经PCR及双酶切鉴定证明构建正确。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的相对分子质量约为26000,表达量约占菌体总蛋白的40%,Western blot显示其能被鼠抗弓形虫免疫血清识别。结论已在E.coliBL21(DE3)中表达了Rh株TgCyP,其有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。

关键词(KeyWords): 刚地弓形虫;亲环蛋白;克隆,分子;原核细胞;基因表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家科技支撑计划课题(2008BAD96B11-3)

作者(Authors): 李运娜;于钦磊;李建华;宫鹏涛;李赫;张西臣;

DOI: 10.13200/j.cjb.2010.09.54.liyn.018

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