中国生物制品学杂志

2008, (08) 708-710

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检测重组人血小板生成素含量的改良双抗体夹心ELISA方法的建立
Development of A Modified Double Antibody Sandwich ELISA for Determination of Recombinant Human Thrombopoietin Content

侯绪凤;赵会林;

摘要(Abstract):

目的建立检测重组人血小板生成素(rhTPO)含量的改良双抗体夹心ELISA方法。方法用棋盘滴定法确定包被单抗、一抗和酶标二抗的最佳工作浓度;绘制标准曲线,确定线性范围、检测限和定量限;检测该方法的准确性(回收率)、精密性和特异性,并与Lowry法检测结果进行比较。结果包被单抗的最佳包被浓度为1.0μg/ml,一抗和酶标二抗的最佳使用浓度分别为1∶5000和1∶10000;检测的线性范围为(125~4000)pg/ml,检测限为75pg/ml,定量限为189pg/ml;不同浓度rhTPO的回收率在(97.0±2.1)%~(105.0±8.5)%之间;6批样品的试验内变异系数在3.2%~8.1%之间,试验间变异系数在5.7%~10.4%之间,特异性良好;与Lowry法检测结果具有良好的相关性。结论已建立检测rhTPO含量的改良双抗体夹心ELISA法,准确性、精密性、特异性良好,可用于rhTPO研究及生产过程中的定量分析。

关键词(KeyWords): 重组人血小板生成素;改良双抗体夹心酶联免疫法;定量分析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Authors): 侯绪凤;赵会林;

DOI: 10.13200/j.cjb.2008.08.73.houxf.015

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