犬贾第虫巢式PCR检测方法的建立Development of nested PCR assay for Giardia canis in dogs
李棕松;高珺珊;翟涛;吴威;宫鹏涛;李建华;杨举;李赫;张国才;张西臣;
摘要(Abstract)：
目的建立犬贾第虫巢式PCR检测方法并进行验证。方法根据犬贾第虫Rnase P基因序列设计两对特异性引物,通过优化Mg2+浓度和退火温度建立巢式PCR检测方法,并进行灵敏度和特异性验证。用优化的巢式PCR方法检测60份犬临床粪样。结果建立的巢式PCR方法的最佳Mg2+浓度为3.0 mmol/L;最佳退火温度为53℃;对犬贾第虫的最低检测量可达1个虫体DNA/ml;对柔嫩艾美尔球虫、伊氏锥虫、弓形虫、阴道毛滴虫、犬心丝虫等寄生虫基因组DNA的扩增结果均为阴性;60份犬临床粪样贾第虫的检出率为61.7%。结论建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于犬贾第虫感染的临床检测。
关键词(KeyWords)： 犬;贾第虫;巢式聚合酶链反应
基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30970322);; 广州市科技计划项目(2013J4100124)
作者(Authors): 李棕松;高珺珊;翟涛;吴威;宫鹏涛;李建华;杨举;李赫;张国才;张西臣;
DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.001957
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