中国生物制品学杂志

2011, v.24(01) 41-44

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JTV1基因真核表达质粒的构建及其在K562细胞中的表达
Construction of Eukaryotic Expression Vector for JTV1 Gene and Its Expression in K562 Cells

吴燕;刘北忠;王翀;钟梁;朱丹;王春光;金丹婷;高艳军;黎亮;

摘要(Abstract):

目的 构建JTV1基因真核表达质粒并稳定转染人白血病细胞系K562,检测转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平及其对K562细胞增殖的影响。方法从人外周血单个核细胞中克隆JTV1基因,并将其插入pcDNA3.1表达载体中,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1,经脂质体介导转染K562细胞,采用RT-PCR和Western blot法鉴定转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测JTV1稳定表达对K562细胞增殖的影响。结果重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1经双酶切及测序证实,目的基因已插入质粒中;人JTV1基因能在K562细胞中稳定表达;JTV1具有抑制K562细胞增殖的作用。结论已成功构建了JTV1基因真核表达质粒,并获得了稳定表达人JTV1基因的K562细胞克隆,为进一步研究人JTV1基因的功能及其与白血病细胞增殖及凋亡的相关性提供了细胞模型。

关键词(KeyWords): JTV1基因;真核细胞;基因表达;K562细胞;细胞增殖

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30300449);; 国家中医药管理局(02-03ZP52);; 重庆医科大学课题(XBYB2007104)

作者(Author): 吴燕;刘北忠;王翀;钟梁;朱丹;王春光;金丹婷;高艳军;黎亮;

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