中国生物制品学杂志

2007, (12) 937-939+947

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疫苗制品中Vero细胞残余蛋白含量检测方法的建立
Development of An ELISA Kit for Residual Vero Cell Protein in Vaccines

王辉;张月兰;过琴媛;贾丽丽;钟书声;赵玉秀;马可;罗书荣;

摘要(Abstract):

目的建立疫苗制品中Vero细胞残余蛋白含量检测方法。方法制备Vero细胞蛋白抗原参考品,免疫家兔,提纯抗体作为包被抗体并以酶标记,建立酶联免疫检测系统。用Vero细胞蛋白抗原参考品绘制定量标准曲线,并对各项指标进行验证。结果提纯后抗体纯度达90%以上,抗体效价为1∶64,Westernblot分析显示,提纯抗体与Vero细胞蛋白抗原参考品中绝大部分蛋白成分均能特异性结合。确定最佳抗体包被浓度为10μg/ml,酶标抗体的工作浓度为1∶1000。Vero细胞蛋白抗原参考品定量范围为12.5~800.0ng/ml时,线性关系良好,r=0.997,该方法特异性、精密度及准确度良好。将试剂于4、25和37℃分别放置3周,检测同一定量参考品和样品中Vero细胞蛋白抗原含量,差异无显著意义。结论已建立了用ELISA检测疫苗制品中Vero细胞残余蛋白含量的方法。

关键词(KeyWords): 酶联免疫吸附试验;疫苗;Vero细胞;宿主细胞蛋白

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 王辉;张月兰;过琴媛;贾丽丽;钟书声;赵玉秀;马可;罗书荣;

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