中国生物制品学杂志

2001, (02) 78-80

[打印本页] [关闭]
本期目录 | 过刊浏览 | 高级检索

胰高血糖素基因克隆、表达及鉴定
Cloning, Expression and Characterization of Recombinant Human Glucagon

母敬郁,张桂荣,王峤,尚庆义,杨翰仪,Joni Lukwanize Wettai,Ananthanarayanan VS

摘要(Abstract):

目的 研制基因工程胰高血糖素,用于治疗因注射胰岛素或口服抗糖尿病药物而引起的严重低血 糖反应。方法 依据人胰高血糖素氨基酸组成序列,采用大肠杆菌出现频率高的氨基酸密码子,体外合成胰高血 糖素基因序列,克隆于pGEX-1N质粒,转化人BL21(DE3)菌中,对阳性克隆转化质粒进行DNA测序。用IPTG诱导 转化的胰高血糖素工程菌,产生谷胱苷肽转移酶的融合蛋白,经谷胱苷肽Sepharose4B亲和层析后,由 Factor Xa酶 进行柱上切割,最后用RP-HPLC得到纯化产物。产品用质谱法测相对分子质量,并对N末端15个氨基酸测序。 结果DNA测序显示克隆基因序列正确,产品相对分子质量为3486J末端15个氨基酸序列与理论值相同,产率为 1.9mg/L。结论 获得以可溶性融合蛋白方式表达的胰高血糖素基因工程菌,适于快速生产天然序列重组胰高血 糖素。

关键词(KeyWords): 胰高血糖素;基因克隆;表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家留学基金委1997年资助项目;; 长春市2000年科技发展资助项目。

作者(Author): 母敬郁,张桂荣,王峤,尚庆义,杨翰仪,Joni Lukwanize Wettai,Ananthanarayanan VS

Email:

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享