中国生物制品学杂志

2008, (06) 489-492

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重组人B7-H4IgV融合蛋白的表达、纯化及活性
Expression, Purification and Activity of Recombinant Human B7-H4IgV Fusion Protein

朱文华;姜昌丽;张存;游彦杰;王伟华;刘艳;张珍;冉永刚;叶星明;李维娜;韩苇;张英起;

摘要(Abstract):

目的表达、纯化重组人B7-H4IgV融合蛋白,并检测其活性。方法将人B7-H4胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达。表达产物经Ni2+-NTA柱亲和层析纯化,并进行Westernblot鉴定。用纯化的rhB7-H4IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术测定小鼠抗血清的活性;免疫SP2/0荷瘤小鼠,观察对肿瘤细胞生长的抑制作用。结果表达的rhB7-H4IgV蛋白约占菌体总蛋白的25%,纯化后蛋白纯度为93%,浓度约为0.5mg/ml,与抗His单抗可产生特异性反应条带。免疫昆明小鼠产生的抗血清效价可达1∶10000,可与SP2/0肿瘤细胞结合。rhB7-H4IgV蛋白对SP2/0移植瘤生长具有一定的抑制作用。结论已成功表达并纯化了重组人B7-H4IgV融合蛋白,纯化蛋白可诱发小鼠体内免疫应答,产生的抗体能与表达B7-H4的肿瘤细胞SP2/0结合,rhB7-H4IgV蛋白在一定程度上能抑制SP2/0移植瘤的生长。

关键词(KeyWords): B7-H4IgV融合蛋白;原核表达;活性;肿瘤;免疫治疗

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Authors): 朱文华;姜昌丽;张存;游彦杰;王伟华;刘艳;张珍;冉永刚;叶星明;李维娜;韩苇;张英起;

DOI: 10.13200/j.cjb.2008.06.46.zhuwh.009

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