中国生物制品学杂志

2018, (02) 195-199

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利用气相二氧化硅从人血浆中制备载脂蛋白A1方法的建立

李光飞;陶玲;王伟;

摘要(Abstract):

目的 建立利用气相二氧化硅从人血浆中制备载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,apo A1)的方法,并对该方法的效果进行评价。方法 在人血浆中加入气相二氧化硅吸附apo A1,考察气相二氧化硅加入人血浆比例(m/V)及孵育时间对吸附的影响,确定最佳吸附条件。吸附后,离心分离人血浆与气相二氧化硅,再用不同浓度的乙醇溶液洗脱气相二氧化硅吸附的apo A1,确定乙醇溶液的最佳洗脱浓度。洗脱产物采用BCA法测定总蛋白浓度后,经SDS-PAGE,采用凝胶成像分析软件Bandscan 5.0分析apo A1纯度,并评价该方法制备apo A1的效率。结果 人血浆中加入1%(m/V)的气相二氧化硅时,apoA1提取效果最佳。气相二氧化硅与人血浆混合物孵育10 min,可完成对apoA1的饱和吸附。该混合物固液分离在大于12 000×g的离心力条件下离心10 min,可获得最佳效果。洗脱液中乙醇最佳浓度为20%(V/V)。在该洗脱条件下,可从1 mL人血浆中制备纯度为78.7%的apoA1 0.92 mg。结论 建立了利用气相二氧化硅从人血浆中制备apoA1的方法,该方法可简便高效地从人血浆中制备apoA1。

关键词(KeyWords): 载脂蛋白A1;气相二氧化硅;人血浆

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作者(Author): 李光飞;陶玲;王伟;

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