中国生物制品学杂志

2005, (04) 291-293

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人蛋白C转基因小鼠的建立及乳腺表达
Establishment of Transgenic Mice for Expression of Human Protein C Gene in Mamma ry Gland

赵宝全,章金刚,董朝辉,贾莉玮,沈永才,吕茂民,姚站馨,李伟静,孙曼霁

摘要(Abstract):

目的为了获得乳腺定位表达人蛋白C(hPC)的转基因动物。方法采用分步克隆的方法,构建大鼠乳清酸蛋白(WAP)启动子调控的人蛋白C质粒,命名为pWPC。将该质粒系统鉴定后,用PvuⅠ+SmaⅠ双酶切,回收4·6kb的片段(WAP-hPC-PolyA)。通过显微注射技术,将其注入昆明小鼠受精卵雄原核内;共注受精卵810枚,存活640枚,移植给28只假孕母鼠,怀孕的18只母鼠共产仔81只。结果提取鼠尾基因组DNA进行PCR检测,34只阳性,再经Southernblot检测,其中20只整合阳性;将7只整合阳性母鼠传代,产仔7日后收集乳汁,进行ELISA检测,结果均有表达。结论已成功建立了人蛋白C转基因鼠乳腺生物反应器,为hPC乳腺表达研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 乳清酸蛋白;人蛋白C;转基因小鼠

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 军事医学科学院创新基金资助项目(020901)

作者(Author): 赵宝全,章金刚,董朝辉,贾莉玮,沈永才,吕茂民,姚站馨,李伟静,孙曼霁

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