中国生物制品学杂志

2014, v.27(07) 954-958

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

固化床反应器大规模灌注培养CHO-C28细胞生产乙型肝炎病毒表面抗原
Large scale perfusion culture of CHO-C28 cells in fixed bed reactor for production of hepaqtitis B surface antigen

刘伯宁;王英;周兴军;赵宏远;侯丽媛;彭瑞珍;耿欣;李幼勃;容艳勇;刘欢欢;高健;

摘要(Abstract):

目的开发一种应用固定化反应器大规模培养CHO-C28细胞的灌注培养工艺,用于制备重组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法利用自行研发的微型反应器以轴向旋转模拟固化床内培养基流经载体表面,分析固化床反应器灌注培养CHO-C28细胞表达HBsAg的可行性;使用AP20小型固化床反应器进行小试工艺;将AP20反应器消化后收集的2.3×1010个细胞接种至AP200固化床反应器,对灌注工艺进行中试放大,收获培养液,测定溶氧、pH、葡萄糖、乳酸及HBsAg蛋白浓度,并与转瓶培养工艺进行比较。结果预装无纺纸片的微型反应器接种CHO-C28细胞后,可连续灌注培养60 d,HBsAg表达水平为1 100 ng/ml。AP20反应器接种CHO-C28细胞后,HBsAg表达水平在维持期约1 100 ng/ml;将AP20反应器培养至第10天的CHO-C28细胞消化后,收集2.3×1010个细胞,接种AP200反应器,可连续灌注培养60 d,生长期中,葡萄糖消耗速率最高可达450 g/d,维持期葡萄糖消耗速率降至250 g/d,整个维持期内葡萄糖浓度维持在约1.5 g/L,收液中乳酸积累量为22 mmol/L,HBsAg表达水平约1 200 ng/ml。固化床灌注培养工艺的工艺条件控制精度高,培养环境更适合CHO-C28细胞生长,培养周期与转瓶工艺相当。结论固化床反应器灌注培养CHO-C28细胞工艺与转瓶工艺HBsAg表达水平相当,具备较高的产业化应用价值。

关键词(KeyWords): 乙型肝炎表面抗原;反应器;灌注培养

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Authors): 刘伯宁;王英;周兴军;赵宏远;侯丽媛;彭瑞珍;耿欣;李幼勃;容艳勇;刘欢欢;高健;

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.000460

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享