中国生物制品学杂志

2007, (12) 873-876

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人源抗乙型肝炎病毒表面抗原基因工程IgG全抗体的表达、纯化及初步鉴定
Expression,Purification and Preliminary Identification of Recombinant Human Complete IgG Antibody against HBsAg

黄仕和;周志军;彭祥兵;詹骞;张爱华;闭兰;余模松;梁米芳;

摘要(Abstract):

目的对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体进行表达、纯化及初步鉴定。方法用含Fc片段抗-HBsAg Fab抗体基因的载体pAC-HBs-Fc,与杆状病毒线性DNA共转染昆虫细胞sf9,产生重组抗-HBsAg的全抗体。以不同浓度的HBsAg包被酶标板孔,用间接ELISA法检测培养上清中抗体的表达及特异性;用蛋白G亲和层析柱进行抗体的纯化,并对纯化的抗体进行SDS-PAGE、Western blot和竞争性ELISA分析。结果上清中表达的重组IgG抗体仅与HBsAg呈阳性反应,特异性良好,纯化后其纯度达97.1%。经SDS-PAGE和Western blot分析可见,IgG抗体轻链和重链的相对分子质量分别约为27000和55000,为人源IgG抗体。CHO表达的HBsAg和血源性HBsAg能竞争性抑制该重组IgG抗体与E.coli表达的HBsAg反应,其抑制率分别为55.9%和81.9%。结论人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体可在杆状病毒载体表达系统中成功表达。

关键词(KeyWords): 乙型肝炎病毒表面抗原;IgG;基因工程抗体;杆状病毒;表达;纯化

Abstract:

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作者(Author): 黄仕和;周志军;彭祥兵;詹骞;张爱华;闭兰;余模松;梁米芳;

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