中国生物制品学杂志

2008, (11) 933-937+944

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EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体的构建及其转染COS-7细胞条件的优化
Construction of Expression Vector for EGFP-PDGFRβ Fusion Gene and Optimization of Condition for Transfection of COS-7 Cells with The Vector

任培君;易小萍;张元兴;

摘要(Abstract):

目的构建EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化PEI介导基因转染COS-7细胞的条件。方法PCR扩增EGFP和PDGFRβ基因,依次连接至pcDNA3.1(+)质粒中,构建融合基因表达载体H-E-P-pcDNA3.1(+),经PEI介导转染COS-7细胞,并对转染条件进行优化。结果融合基因表达载体经酶切及测序证明构建正确。经PEI介导转染COS-7细胞的最佳条件为:DNA浓度2μg/ml,N/P比值15.5,在无血清条件下转染。此条件适用于滚瓶培养细胞的转染。结论已成功构建了EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化了经PEI介导转染COS-7细胞的条件。

关键词(KeyWords): EGFP基因;PDGFRβ基因;融合表达;COS-7细胞;转染

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 任培君;易小萍;张元兴;

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