中国生物制品学杂志

2010, v.23(10) 1125-1128

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快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增技术的建立
Development of A Loop-mediated Isothermal Amplification Method for Rapid Detection of porA and 16S rRNA Genes of Neisseria gonorrhoeae

崔亚利;何於娟;刘鑫;胥文春;刘明芳;龚艺;贺潇;

摘要(Abstract):

目的建立快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,探讨其用于淋球菌感染早期诊断的可行性。方法利用Primer-ExplorerV3软件分别针对淋球菌porA及16S rRNA基因设计6条引物(2条内引物FIP、BIP,2条外引物F3、B3,2条环引物LF、LB),以淋球菌标准菌株基因组DNA为模板,进行LAMP扩增,同时,以外引物F3、B3为PCR引物,进行PCR扩增,并比较2种扩增方法的灵敏度和特异性。结果LAMP法与PCR法灵敏度相同,可检测到10个拷贝的目的基因;其针对淋球菌porA和16S rRNA基因的引物对脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和大肠埃希菌的DNA均不能扩增。结论已成功建立了检测淋球菌porA和16S rRNA基因的LAMP技术,为淋球菌的快速检测提供了新的手段,有望成为淋球菌常规检测的简便方法。

关键词(KeyWords): 淋球菌;porA基因;16S rRNA基因;环介导等温扩增技术;聚合酶链反应

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(30700914)

作者(Author): 崔亚利;何於娟;刘鑫;胥文春;刘明芳;龚艺;贺潇;

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