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羊布氏菌vjbR基因的克隆及原核表达

卜昭阳1,2,王景龙1,李晓艳1,2,万丽娜3,郎需龙1,2,万忠海1,2,孟柯音1,2,王兴龙1,2

摘要(Abstract):

目的 克隆并原核表达羊布氏菌强毒株16MvjbR基因。方法PCR扩增羊布氏杆菌16M株vjbR基因,亚克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组原核表达质粒pET-28a-vjbR,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经His Trap FF纯化后,进行Western blot分析。 结果 扩增的 vjbR基因大小为708 bp,与预期一致;重组原核表达质粒pET-28a-vjbR经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为29 000,诱导4 h表达量可达6. 84 mg /ml;纯化的重组蛋白纯度为65. 7%,能被羊布氏杆菌阳性血清所识别。结论 成功在大肠杆菌中表达了羊布氏菌VJBR蛋白,为其功能的研究、羊布病诊断试剂盒的研制及亚单位疫苗的研发奠定了基础。关键词:羊布氏菌;vjbR基因;密度感应系统;克隆;原核细胞;基因表达

关键词(KeyWords): 羊布氏菌;vjbR基因;密度感应系统;克隆;原核细胞;基因表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 卜昭阳1,2,王景龙1,李晓艳1,2,万丽娜3,郎需龙1,2,万忠海1,2,孟柯音1,2,王兴龙1,2

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